סרטון זה מתאר מבחני התניה קלאסיים ה שבודקים למידה וזיכרון בדרוסופילה, הנקראת מיזוג חיזור. ההסתעפות מבוססת על הפחתת החיזור הגברי לאחר שחוותה דחייה על ידי נקבה שאינה פתוחה מראש. הפרוטוקול לדוגמה מציג כיוונון עבור ההליך שניתן להשתמש בו כדי להעריך זיכרון לטווח קצר וארוך.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך Koemans ואח ‘, Drosophila חיזור מיזוג כמדד של למידה וזיכרון, J. Vis. Exp. (2017). שים לב: בפרוטוקול המפורט להלן מתואר שכפול אחד של איסוף, הדרכה ובדיקות. על מנת לבדוק את השחזור של התוצאות, יש לחזור על צעדים אלה במקביל, בימים מרובים, ועם קבוצ?…
Representative Results
איור 1: קביעת מדד החיזור והסקירה הניסיונית. (A)תמונות המציגות התנהגות חיזור גברית סטריאוטיפית כלפי זבוב נקבה. מוצגים שלבים שונים של התנהגות חיזור: אוריינטציה (I), מעקב (II), רטט כנף (שלוחה) והקשה (III), ליקוק (IV) וניסיו…
Materials
P{KK101437}VIE-260B
VDRC
101437
Dhat-at-RNAi in 60100 background
P{KK108109}VIE-260B
–
–
Control-RNAi in 60100 background (gift from K. Keleman)
w+, UAS-dcr2/yhh;;elav-Gal4 (III)
–
–
panneuronal driver line
Containers for plant tissue culture
VWR
960177
175 mL plastic vials
Folded filters
Whatman
10311643
Filter paper to enlarge area flies can pupate on
Flat-bottom blocks (96-wells)
Qiagen
19579
Used for housing blocks
MicroAmp Clear Adhesive Film
Applied Biosystems
4306311
PCR adhesive film as lid on flat-bottom blocks
Razor blade
–
–
Any sharp will do
Needle
–
–
0.8 mm diameter
Aspirator
–
–
Cut a 1mL pipet tip with scissors in order to have two pieces. The narrow tip of the pipettip is placed as fly entrance in a ~80 cm flexible hose. To prevent a fly from getting in the hose, a normal piece of cotton or small mesh gaze is placed in between the tip and the hose. The other half of the pipettip can be used as mouth piece at the end of the hose.
Courtship chambers
–
–
file S1 can be opened with indicated CAD software
Camcorder
Sony
–
camera specification: >4M pixels, full HD.
For manual quantification, any simple video recording device has the potential to produce a video of sufficient quality to observe courtship behavior accurately. For automated quantification, there will likely be different requirements depending on the software to be used, and users should investigate this thoroughly if automated quantification is desired.