Drosophila (olika betydelser) Uppvaktningskonditionering: En metod för att testa lärande och minne i flugor
Published: April 30, 2023
Abstract
Källa: Koemans, T. S., et al. Drosophila Courtship Conditioning Som ett mått på lärande och minne. J. Vis. Exp. (2017).
Denna video beskriver en klassisk konditioneringsanalys som testar lärande och minne i Drosophila, kallad uppvaktningskonditionering. Analysen är baserad på minskningen av manlig uppvaktning efter att ha upplevt ett avslag av en icke-mottaglig förinnad kvinna. Exempelprotokollet visar en inställning för proceduren som kan användas för att bedöma korttids- och långtidsminne.
Protocol
Detta protokoll är ett utdrag från Koemans et al., Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory, J. Vis. Exp. (2017). OBS: I protokollet som beskrivs nedan beskrivs en replikat av insamling, utbildning och testning. För att testa resultatens reproducerbarhet bör dessa steg upprepas parallellt, på flera dagar och med separata grupper av flugor (tabell 1). Protokollet är baserat på en 10 dag…
Representative Results
Figur 1: Fastställande av uppvaktningsindex och experimentell översikt. (A) Bilder som visar stereotypt manligt uppvaktningsbeteende mot en kvinnlig fluga. Olika stadier av uppvaktningsbeteende visas: orientering (I), följande (II), vingvibration (förlängning) och gängning (III), slickning (IV) och försök till kopulering (V). B)Schematisk översikt ö…
Materials
| P{KK101437}VIE-260B | VDRC | 101437 | Dhat-at-RNAi in 60100 background |
| P{KK108109}VIE-260B | – | – | Control-RNAi in 60100 background (gift from K. Keleman) |
| w+, UAS-dcr2/yhh;;elav-Gal4 (III) | – | – | panneuronal driver line |
| Containers for plant tissue culture | VWR | 960177 | 175 mL plastic vials |
| Folded filters | Whatman | 10311643 | Filter paper to enlarge area flies can pupate on |
| Flat-bottom blocks (96-wells) | Qiagen | 19579 | Used for housing blocks |
| MicroAmp Clear Adhesive Film | Applied Biosystems | 4306311 | PCR adhesive film as lid on flat-bottom blocks |
| Razor blade | – | – | Any sharp will do |
| Needle | – | – | 0.8 mm diameter |
| Aspirator | – | – | Cut a 1mL pipet tip with scissors in order to have two pieces. The narrow tip of the pipettip is placed as fly entrance in a ~80 cm flexible hose. To prevent a fly from getting in the hose, a normal piece of cotton or small mesh gaze is placed in between the tip and the hose. The other half of the pipettip can be used as mouth piece at the end of the hose. |
| Courtship chambers | – | – | file S1 can be opened with indicated CAD software |
| Camcorder | Sony | – | camera specification: >4M pixels, full HD. |
| For manual quantification, any simple video recording device has the potential to produce a video of sufficient quality to observe courtship behavior accurately. For automated quantification, there will likely be different requirements depending on the software to be used, and users should investigate this thoroughly if automated quantification is desired. | |||
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| power food | |||
| Agar | Sigma | A7002 | |
| Yeast | Bruggeman | – | |
| Yeast extract | MP biomedicals | 0210330391 | |
| Peptone | Sigma | P6838 | |
| Sucrose | Sigma | S9378 | |
| Glucose | Sigma | G7021 | |
| MgSO4 | Sigma | M2643 | |
| CaCl2 | Merck | 1023780500 | |
| Methylparabene (CAUTION) | Sigma | H5501 | |
| Propionic acid (CAUTION) | Sigma | P1386 | |
| Demineralized water | – | ||
| Yeast paste | – | yeast grains and water mixture in a 1:1 ratio | |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| normal food | |||
| Agar | MP biomedicals | 215017890 | |
| Yeast | bruggeman | – | |
| Corn flour | de Molen | – | |
| Sugar | de Molen | – | |
| Methylparabene (CAUTION) | Sigma | H5501 | |
| Propionic acid (CAUTION) | Sigma | P1386 | |
| Demineralized water | – |
Cite This Article
Drosophila Courtship Conditioning: A Method to Test Learning and Memory In Flies. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20068, doi: (2023).