Это видео описывает, как вставлять drosophila головы в парафин с помощью воротника метод, метод, который готовит летать головы для последовательного сечения. Парафиновые секции используются для гистологических исследований анатомии мозга и для оценки нейродегенерации. Протокол показывает, как несколько мух могут быть обработаны в одном препарате, тем самым повышая эффективность времени и минимизируя экспериментальные артефакты.
Protocol
Этот протокол является выдержкой из Sunderhaus и Kretzschmar, Массовая гистология для количественной нейродегенерации в Drosophila, J. Vis. Exp. (2016). 1. Фиксация головы на воротники и встраивания в Парафин ПРИМЕЧАНИЕ: Все шаги в про…
Representative Results
Рисунок 1: Парафин Серийные разделы. A) Используя метод воротника, экспериментальные и контрольные мухи могут быть обработаны в качестве одного образца путем резьбы их на один воротник. Для ориентации (стрелки) вставляютс…
Materials
Collar
Genesee Scientific
TS 48-100
We are using custom made collars that are made from one piece of metal instead of layers as the ones by Genesee.
Rubber ice cube tray for embedding
Household store
The size can be made-to-fit by glueing in additional walls
Crystallizing dish
Fisher Scientific Company
08-762-3
Ether
Fisher Scientific Company
E138-1
Ethanol
Decon Laboratories Inc.
2701
Choloroform
Fisher Scientific Company
C298-500
Glacial Acetic Acid
Fisher Scientific Company
A38-212
Methylbenzoate
Fisher Scientific Company
M205-500
Distinct Odor – Use in fume hood!
Low Melting Point Paraffin Wax
Fisher Scientific Company
T565
Make sure to keep extra melted in a 65 °C waterbath