वयस्क ड्रोसोफिला मक्खियों का इंजेक्शन: यौगिक या लेबल डिलीवरी की एक विधि

Abstract

स्रोत: नाजारियो-टूल, ए ई. ई., वू, एल पी फल मक्खी की सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन, ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर,एक में एक वीवो फागोसिटोसिस परख का उपयोग कर। जे विस एक्सप्रेस। (2019).

यह वीडियो जीवित वयस्क मक्खियों का इंजेक्शन कैसे करता है और इसमें एक उदाहरण प्रोटोकॉल शामिल है जिसमें लेबल वाले कण और ट्राइपैन ब्लू को फ्लाई पेट में परख फैगोसाइटोसिस में इंजेक्ट किया जाता है।

Protocol

यह प्रोटोकॉल नाजारियो-टूल और वू का एक अंश है, जो फ्रूट फ्लाई, ड्रोसोफिला मेलानोगास्टरकी सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन करता है, जो वीवो फागोसाइटोसिस परख, जे विस एक्सपी (2019) में एक का उपय…

Materials

5430-10 PicoNozzle Kit	World Precision Instruments	5430-10	Holder for 1.0mm pipette
E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Fluorescein conjugate	Invitrogen	E2861	Killed E. coli labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~494/~518 nm)
Needle Pipette Puller	David Kopf Instruments	Model 725
Pneumatic PicoPump PV820	World Precision Instruments	SYS-PV820	The World Precision Instruments Pneumatic PicoPump PV820 uses differential pressures to hold liquid in the glass needle between injections. The user manually controls short bursts of gas pressure to expel the liquid – allowing delivery of sub-nanoliter volumes. The amount of liquid delivered depends on two main variables – the size of the glass needle opening and the amount of time injection pressure is applied. set the instrument to 100 ms "TIMED" mode.
Thin Wall Glass Capillaries	World Precision Instruments	TW100F-3	Needles for injection. OD = 1.0 mm
Trypan Blue Solution (0.4%)	Sigma	T8154	Used to quench extracellular fluorescence of Fluorescein, Alexa Fluor, or Texas Red labeled particles.