फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी के लिए कीट पैरों को संसाधित करना: इमेजिंग के लिए न्यूरोमस्कुलर संरचनाओं को संरक्षित करने की एक विधि

Abstract

स्रोत: गुआन, डब्ल्यू, एट अल वयस्क क्यूटिकल के माध्यम से ड्रोसोफिला लेग मोटर न्यूरॉन एक्सॉन की कल्पना करें। जे विस एक्सप्रेस। (2018).

यह वीडियो इमेजिंग विश्लेषण के लिए बरकरार अपने न्यूरोमस्कुलेचर को बनाए रखते हुए ड्रोसोफिला वयस्क पैर को विच्छेदन, ठीक करने और माउंट करने की विधि का वर्णन करता है।

Protocol

यह प्रोटोकॉल गुआन एट अलसे एक अंश है, वयस्क क्यूटिकल, जे विस एक्सपी (2018) के माध्यम से ड्रोसोफिला लेग मोटर न्यूरॉन एक्सॉन की कल्पना करें। 1. लेग विच्छेदन और निर्धारण एक ग्लास मल्टी-व?…

Representative Results

चित्रा 1: माइक्रोस्कोप स्लाइड पर पैर माउंट करने के लिए प्रक्रिया। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करे?…

Materials

Ethanol absolute	Fisher	E/6550DF/17	Absolute analytical reagent grade
nonionic surfactant detergent	Sigma-Aldrich	T8787	Triton X-100, for molecular biology
Fine forceps	Sigma-Aldrich	F6521	Jewelers forceps, Dumont No. 5
Glass multi-well plate	Electron Microscopy Sciences	71563-01	9 cavity Pyrex, 100 mm x 85 mm
PFA	Thermofisher	28908	Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free
Glycerol	Fisher BioReagents	BP 229-1	Glycerol (Molecular Biology)
Spacers	Sun Jin Lab Co	IS006	iSpacer, four wells, around 12 μL working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep
Square 22 mm x 22 mm coverslips	Fisher Scientific	FIS#12-541-B	No. 1.5-0.16 to 0.19 mm thick
Mounting Medium	Vector Laboratories	H-1000	Vectashield Antifade Mounting Medium