معالجة أرجل الحشرات للتنظير المجهري الفلوري: طريقة للحفاظ على الهياكل العصبية العضلية للتصوير

Abstract

المصدر: غوان, W., وآخرون تصور Drosophila الساق العصبية الحركية محاور عصبية من خلال كتيكل الكبار. ج. فيس إكسب. (2018).

يصف هذا الفيديو طريقة لتشريح الساق البالغة Drosophila وإصلاحها وتركيبها مع الحفاظ على عضلتها العصبية سليمة لتحليل التصوير.

Protocol

هذا البروتوكول هو مقتطف من غوان وآخرون.، تصور Drosophila الساق العصبية الحركية محاور عصبية من خلال لطيف الكبار، J. Vis. Exp. (2018). 1. تشريح الساق والتثبيت تأخذ لوحة زجاجية متعددة الآبار وملء العدد المناسب من الآبار مع الإيثانول 70٪. إضافة 15-20 CO2-تخدير الذباب (من ?…

Representative Results

الشكل 1: إجراء لتركيب الساقين على الشرائح المجهر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Materials

Ethanol absolute	Fisher	E/6550DF/17	Absolute analytical reagent grade
nonionic surfactant detergent	Sigma-Aldrich	T8787	Triton X-100, for molecular biology
Fine forceps	Sigma-Aldrich	F6521	Jewelers forceps, Dumont No. 5
Glass multi-well plate	Electron Microscopy Sciences	71563-01	9 cavity Pyrex, 100 mm x 85 mm
PFA	Thermofisher	28908	Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free
Glycerol	Fisher BioReagents	BP 229-1	Glycerol (Molecular Biology)
Spacers	Sun Jin Lab Co	IS006	iSpacer, four wells, around 12 μL working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep
Square 22 mm x 22 mm coverslips	Fisher Scientific	FIS#12-541-B	No. 1.5-0.16 to 0.19 mm thick
Mounting Medium	Vector Laboratories	H-1000	Vectashield Antifade Mounting Medium