معالجة أرجل الحشرات للتنظير المجهري الفلوري: طريقة للحفاظ على الهياكل العصبية العضلية للتصوير

Published: April 30, 2023

Abstract

المصدر: غوان, W., وآخرون تصور Drosophila الساق العصبية الحركية محاور عصبية من خلال كتيكل الكبار. ج. فيس إكسب. (2018).

يصف هذا الفيديو طريقة لتشريح الساق البالغة Drosophila وإصلاحها وتركيبها مع الحفاظ على عضلتها العصبية سليمة لتحليل التصوير.

Protocol

هذا البروتوكول هو مقتطف من غوان وآخرون.، تصور Drosophila الساق العصبية الحركية محاور عصبية من خلال لطيف الكبار، J. Vis. Exp. (2018). 1. تشريح الساق والتثبيت تأخذ لوحة زجاجية متعددة الآبار وملء العدد المناسب من الآبار مع الإيثانول 70٪. إضافة 15-20 CO2-تخدير الذباب (من ?…

Representative Results

الشكل 1: إجراء لتركيب الساقين على الشرائح المجهر. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Materials

Ethanol absolute Fisher E/6550DF/17 Absolute analytical reagent grade
nonionic surfactant detergent Sigma-Aldrich T8787 Triton X-100, for molecular biology
Fine forceps Sigma-Aldrich F6521 Jewelers forceps, Dumont No. 5
Glass multi-well plate Electron Microscopy Sciences 71563-01 9 cavity Pyrex, 100 mm x 85 mm
PFA Thermofisher 28908 Pierc 16% Formaldehyde (w/v), Methanol-free
Glycerol Fisher BioReagents BP 229-1 Glycerol (Molecular Biology)
Spacers Sun Jin Lab Co IS006 iSpacer, four wells, around 12 μL working volume per well, 7 mm diameter, 0.18 mm deep
Square 22 mm x 22 mm coverslips Fisher Scientific FIS#12-541-B No. 1.5-0.16 to 0.19 mm thick
Mounting Medium Vector Laboratories H-1000 Vectashield Antifade Mounting Medium

Play Video

Cite This Article
Processing Insect Legs for Fluorescence Microscopy: A Method to Preserve Neuromuscular Structures for Imaging. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20121, doi: (2023).

View Video