एंजाइमेटिक पाचन और मैनुअल वियोजन: सेल संस्कृति के लिए सी एलिगेंस भ्रूण तैयार करने के लिए एक विधि
Published: April 30, 2023
Abstract
स्रोत: संगलेट्टी, आर और बियांची, एल भ्रूण सी एलिगेंस कोशिकाओं को बनाने के लिए एक विधि । जे विस एक्सप्रेस। (2013).
इस वीडियो को अलग करने के लिए एक विधि का परिचय और बाँझ संस्कृति भ्रूण सी elegans कोशिकाओं में विट्रो ।
Protocol
1. भ्रूण कोशिकाओं का विघटन एक लैमिनार प्रवाह हुड का उपयोग करके बाँझ परिस्थितियों में प्रक्रिया के अगले चरणों का संचालन करें। जबकि जानवरों बैक्टीरिया प्लेटों पर गाउन कर रहे हैं, वॉश और लाइसिस …
Representative Results
चित्रा 1. सी एलिगेंस भ्रूण से पहले और चिटनस उपचार के बाद। (क) चिटनेज के संपर्क में आने से पहले अंडों की तस्वीर । तीर एक भ्रूण के आसपास पारदर्शी …
Materials
| REAGENTS | ||
| Leibovitz's L-15 Medium (1x) Liquid | Invitrogen | 11415-064 |
| Fetal Bovine Serum | Invitrogen | 16140-063 |
| Penicillin-streptomycin | Sigma | P4333-100ML |
| Chitinase from Streptomyces Griseus | Sigma | C6137-25UN |
| Peanut Lectin | Sigma | L0881-10MG |
| EQUIPMENT | ||
| 101-1000 μl Blue Graduated Pipet Tips | USA Scentific | 1111-2821 |
| 10 ml Sterilized Pipet Individually Wrapped | USA Scentific | 1071-0810 |
| Ergonomic Variable Volume (100-1000 μl) Pipettor with tip ejector | VWR International Inc. | 89079-974 |
| Portable Pipet Aid, Drummond | VWR International Inc. | 53498-103 |
| Transfer Plastic Pipet Sterile | VWR International Inc. | 14670-114 |
| 15 ml Conical Tube | USA Scentific | 1475-1611 |
| Sterile 18 gauge Needles | Becton, Dickinson and Co. | 305196 |
| Sterile 10 ml Syringes | Becton, Dickinson and Co. | 305482 |
| Plastic Syringe Filters Corning 0,20 μm pore size | Corning | 431224 |
| Acrodic 25 mm Syringe filter w/5 μm versapor Membrane | VWR International Inc. | 28144-095 |
| 60×15 mm Petri Dish Sterile | VWR International Inc. | 82050-548 |
| 100×15 mm Petri Dish Sterile | VWR International Inc. | 82050-912 |
| 12 mm Diameter Glass Coverslips | VWR International Inc. | 48300-560 |
| Clear Cell Culture Plates 24 Well Flat Bottom w/lid | Thomas scientific | 6902A09 |
| Dumont #5- Fine Forceps | Fine Science Tools | 11254-20 |
| Centrifuge 5702 | Eppendorf | 22629883 |
| Laminar Flow Hood | ||
| Inverted Microscope with x10 objective | ||
| Ambient air humidified Incubator |
Cite This Article
Enzymatic Digestion and Manual Dissociation: A Method to Prepare C. elegans Embryos for Cell Culture. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20159, doi: (2023).