Summary
Denne protokol beskriver en enkel og effektiv metode til realtid og dynamisk indsamling af rottehjerteblod ved hjælp af mikrodialyseteknikken.
Abstract
Dynamisk analyse af blodkomponenter er af stor betydning for forståelsen af hjerte-kar-sygdomme og deres relaterede sygdomme, såsom myokardieinfarkt, arytmi, aterosklerose, kardiogent lungeødem, lungeemboli og cerebral emboli. Samtidig er det presserende at bryde igennem den kontinuerlige hjerteblodprøvetagningsteknik hos levende rotter for at evaluere effektiviteten af karakteristisk etnisk medicinsk terapi. I denne undersøgelse blev en blodmikrodialysesonde implanteret i højre halsvene hos rotter i en præcis og ikke-invasiv kirurgisk procedure. Hjerteblodprøver blev derefter indsamlet med en hastighed på 2,87 nL / min til 2,98 ml / min ved at oprette forbindelse til et online mikrodialyseprøveindsamlingssystem. Endnu vigtigere er det, at de erhvervede blodprøver midlertidigt kan opbevares i mikrodialysebeholdere ved 4 °C. Det mikrodialysebaserede online kontinuerlige blodindsamlingsprogram fra rottehjerte har i høj grad garanteret kvaliteten af blodprøver, fremmet og styrket den videnskabelige rationalitet i forskningen om systemiske hjerte-kar-sygdomme og evalueret etnomedicinsk terapi ud fra hæmatologiens perspektiv.
Introduction
Med accelerationen af livets tempo og stigningen i psykologisk pres har hjerte-kar-sygdomme (CVD'er) tendens til at forekomme hos unge, midaldrende og ældre 1,2. Sygeligheden og dødeligheden af CVD'er er høj med karakteristika for akut debut, hurtig progression og et langt forløb af sygdommen, hvilket alvorligt påvirker patienternes sikkerhed3. Forekomsten af CVD'er kan være tæt forbundet med ændringerne i nogle blodkomponenter, såsom kolesterol, serumlipider, blodsukker, myokardieenzymer og proteinkinase K 4,5,6. Patientens relevante situation kan håndteres hurtigst ved at analysere rutinemæssige blodprøver. Derfor bestemmer kvaliteten af blodprøverne nøjagtigheden af testresultaterne. Imidlertid har konventionelle metoder til blodindsamling nogle uundgåelige ulemper, som alvorligt påvirker de eksperimentelle resultater, såsom stort traumeområde, lille blodindsamlingsvolumen, høje krav til operatører, manglende evne til at afspejle lægemiddelændringer i realtid, besværlig blodprøveforbehandling, stort forbrug af forsøgsdyr og manglende opfyldelse af dyreetiske krav 7,8,9 . Med løbende fremskridt inden for medicinsk teknologi har kvaliteten af blodindsamlingen også stillet højere krav. Derfor er det presserende at udvikle en ny blodprøvetagningsteknologi for at overvinde ovenstående mangler.
Mikrodialyse er en in vivo-prøvetagningsteknik baseret på dialyseprincipper10. Under ikke-ligevægtsbetingelser diffunderes og perfuseres de forbindelser, der skal måles, fra vævet langs koncentrationsgradienten til mikrodialysesonden, der er indlejret i vævet i dialysatet, som kontinuerligt fjernes sammen med dialysatet, hvorved formålet med prøveudtagning fra levende væv11,12 opnås. Sammenlignet med traditionelle prøveudtagningsmetoder har mikrodialyseteknikken fantastiske fordele i følgende aspekter13,14,15: kontinuerlig realtidssporing af ændringerne af forskellige forbindelser i blod; prøveudtagning kræver ingen kedelig forbehandling og kan virkelig repræsentere koncentrationen af målforbindelsen på prøveudtagningsstedet Sonder kan implanteres i forskellige dele af kroppen for at undersøge absorption, distribution, metabolisme, udskillelse og toksicitet af målforbindelserne; den erhvervede prøve indeholder ingen biologiske makromolekyler (>20 kD). Derfor sikrer blodprøver af højere kvalitet en bedre fortolkning af CVD'er og den mekanisme, der behandles af etnisk medicin.
Mikrodialyseprøvetagningssystemer består generelt af mikroinjektionspumper, forbindelsesrør, tanke til fri bevægelighed for dyr, mikrodialysesonder og prøvesamlere16. Som den mest kritiske del af enheden i mikrodialysesystemet omfatter almindelige mikrodialyseprober koncentriske sonder, fleksible sonder, lineære sonder og shuntsonde17. Blandt disse er fleksible sonder bløde og ikke-metalliske sonder, der hovedsageligt anvendes til at indsamle prøver fra blodkar og perifere væv såsom hjerte, muskler, hud og fedt fra vågne og frit bevægelige eller bedøvede dyr13. Ved kontakt med blodkar eller væv kan sonden bøjes fleksibelt og derved undgå irreversibel skade på sonden eller prøveudtagningsstedet. Med den kontinuerlige udvikling af sondeteknologi uddybes anvendelsen af mikrodialyseteknologi på forskellige områder også. I dette papir blev rottehjerteblodet dynamisk og kontinuerligt erhvervet af den ikke-invasive mikrodialyseteknologi gennem den fleksible sonde designet til blodindsamling.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Dyreprotokollen er godkendt af administrationsudvalget for Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (rekordnummer: 2021-11). Specificerede patogenfrie hanrotter af Sprague Dawley (SD) (8-10 uger, 260-300 g) blev opdrættet i uafhængige ventilationsbure og opretholdt laboratoriemiljøet ved 22 °C og 65% relativ luftfugtighed og blev anvendt til denne undersøgelse. Dyrene blev hentet fra en kommerciel kilde (se materialetabel). Alle rotter var vant til adaptiv fodring i 1 uge med frit vand og foder i perioden.
1. Eksperimentel forberedelse
- Saml det udstyr, der er involveret i mikrodialyse af blodprøvetagning (se materialetabel), som vist i figur 1.
- Forbered antikoagulerende citratdextroseopløsning (ACD'er), der indeholder 3,50 mmol / l citrat, 7,50 mmol / l natriumcitrat og 13,60 mmol / l glucose som perfusionsvæske til mikrodialyseblodindsamling (se materialetabel).
- Før brug filtreres ACD'erne med en 0,22 μm membranfiltreringsenhed og fjernes bobler ultralyd. Hold ACD'er ved 37 °C for at reducere stimuleringen for SD-rotter.
2. Patency inspektion af mikrodialyse rørsystemer
- Fastgør indgangen til dialyseenhedens sonde med kanylen, slangeadapteren og fep-slangen (se materialetabel).
BEMÆRK: Den blå ende af mikrodialysesonden er til væsketilstrømningen, og den gennemsigtige ende er til væskeudstrømningen. - Kontroller mikrodialyserørsystemets tålmodighed ved at perfusere ACD18 ind i rørsystemet med en hastighed på 2 μL/min.
BEMÆRK: Hvis ACD'er strømmer fra prøveopsamlingsstedet, kan det uhindrede mikrodialysesystem bruges til yderligere hjerteblodindsamling. Hvis ikke, skal blodsonden kontrolleres for brudte lækager, eller om rørledningen var forseglet.
3. Implantation af mikrodialysesonde
- Bedøv rotterne med 2% isofluran i en luft-ilt-blanding på 0,6 l/min, fastgør de helt bevidstløse rotter på operationsbordet og hold kropstemperaturen på 37 °C ved hjælp af en dyretemperaturholder (se materialetabel).
- Fjern pelsen fra nakken med en elektrisk barbermaskine og desinficer det kirurgiske sted med tre skiftevis runder betadin og 70% alkohol. Injicer bupivacain (1,5 mg/kg) i rotten. Udsæt den højre jugularvene ved stump dissektion af blødt væv og perivaskulær fascia gennem et 1,5 cm snit langs midterlinjen af nakken.
BEMÆRK: Alle kirurgiske instrumenter og værktøjer, der anvendes i eksperimentet, skal steriliseres på forhånd ved autoklavering. Brug sterile handsker og kirurgiske gardiner. Hele forsøgsoperationen skal udføres i et sterilt miljø. Følg lokale retningslinjer for brug af dyr for anæstesi og analgesiregime. - Lav en aftagelig slipknude ved hjælp af en 4-0 kirurgisk sutur i højre jugularvene i den distale ende af hjertet for midlertidigt at blokere blodgennemstrømningen, og lav et 1,5 cm snit i højre jugularvene nær hjertet.
- Indsæt et nåleformet kateter (længde 25 mm, diameter 0,7 mm, se materialetabel) i højre halsvene mod den proksimale ende af rottehjertet, indsæt blodmikrodialysesonden (samlet sondelængde 24 mm, membranlængde 10 mm) i et kateter, og implanter sonden med oftalmisk tang langs det skrå snit i kateteret stylet19.
- Fjern det styrede kateter, og nedsænk sondens semipermeable membran (membranlængde 10 mm, membrandiameter 0,5 mm) helt i den højre jugularvene. Optrævl den aftagelige slipknude i den distale ende af hjertet for at genoprette blodgennemstrømningen i højre halsvene.
- Ligatur sonden med højre jugular vene ved hjælp af 4-0 kirurgiske suturer og subkutant træk sondens halerør gennem bagsiden af nakken. Se figur 2 for specifikke trin til implantation af sonder.
BEMÆRK: Den molekylære afskæring af blodmikrodialysesonden, der blev anvendt i denne undersøgelse, er >20 kD. De indsamlede blodprøver indeholder stoffer med en molekylvægt på mindre end 20 kD.
4. Prøveudtagning af mikrodialyse
- En uge efter implantationen af mikrodialysesonden gennemgår rotter, der kommer sig efter kirurgisk traume, mikrodialyseprøveudtagning. Placer den vågne rotte i en fritgående tank (se materialetabel) og tilslut sonden til mikrodialysesystemet. Sondedialysemembranen afbalanceres ved vanding af ACD'er med en hastighed på 2 μL/min i 1 time.
- Der indsamles mikrodialyseblodprøver med en strømningshastighed på 2 μL/min, og de opbevares midlertidigt i en fraktioneret beholder på 4 °C.
BEMÆRK: De opnåede blodprøver kunne testes direkte ved centrifugering ved 20.000 x g i 10 minutter ved stuetemperatur. Eller det kan opbevares ved -80 °C til følgende test. Ved indsamling af prøver er det vigtigt altid at observere, om sonden prolaps og/eller siver ud.
5. Efter prøveudtagning
- Bedøv SD-rotterne med 2% isofluran i en luft-iltblanding ved 0,6 l / min.
- Disseker for at bekræfte, at sonden er i den rigtige jugular vene. Fjern mikrodialysesonden fra højre halsvene og læg den i ultrarent vand.
- Endelig aflives rotterne ved indånding af 5% isofluran.
- Tilslut sonden til rørledningen, og skyl natten over med en hastighed på 2 μL / min med ultrarent vand for helt at vaske det resterende salt i røret og sonden ud.
- Fjern sonden og blød den i ultrarent vand. Opbevares ved 4 °C for at forhindre, at sondedialysemembranen trækker sig sammen.
BEMÆRK: Hvis mængden af dialysevæske er uforenelig med mængden af perfusionsvæske, kan sonden blokeres af koaguleret blod. Sonden kan placeres i bugspytkirtelproteinopløsningen, indtil det synlige stof flager af fra spidsen af sondemembranen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Den nuværende protokol tillod opnåelse af hjerteblod fra bevidste rotter i henhold til prøveudtagningsparametre, der er indstillet i mikrodialyseudstyret. Normale blodprøver skal være lyse rødt, mens dyr med hypoxi, potentielle blodpropper eller anæmisk sygdom kan have mørk lilla eller mørkerød. Prøver opnået gennem blodmikrodialyseteknikken er farveløse, klare og gennemsigtige, som kan bruges til at analysere serummarkørerne for forskellige sygdomme og blodfordelingen af lægemidler og deres metabolitter ved at anvende højtydende væskekromatografi eller massespektrometri. De indstillede parametre og mængden af enkeltblod, der indsamles, er vist i tabel 1.
Figur 1: Nødvendigt udstyr og apparatur til mikrodialyse af blod . (A) Dyrebedøvelsessystem. (B) Kirurgiske instrumenter. (C) Operationsstue. D) Prøveopsamlingsrør. (E) Blodmikrodialysesonde, kateter og sprøjtekanyle. (F) Mikroinjektionspumpe. (G) Injektionssprøjte. H) In vitro-bevoksning af mikrodialysesonde. (I) Fritgående tank til rotter. J) Opsamler af kølefraktioner. (K) Fuldblodprøve og mikrodialysestøttet blodprøve fra rotter. Klik her for at se en større version af denne figur.
Figur 2: Skematisk illustration af blodmikrodialysesonde implanteret i rottens højre indre halsvene. Klik her for at se en større version af denne figur.
| Parametre | Værdi |
| Perfusionshastighed | 2 μL/min |
| Samplingfrekvens | 2 μL/min |
| Prøveudtagningstemperatur | 4 °C |
| Enkelt blodindsamlingsvolumen | 12 μL |
Tabel 1: Indstil parametre for mikrodialyse blodprøvetagningssystem.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
CVD'er er en almindelig kronisk sygdom i klinikker med gradvist stigende forekomst i Kina, og debutalderen har tendens til at være yngre, hvilket forårsager bekymring og panik hos de fleste patienter20,21. Som den største dødsårsag i verden kan CVD'er fremkalde cerebral infarkt og andre sygdomme med høj dødelighed, hvilket alvorligt truer patienternes sunde liv22. CVD'er, herunder iskæmisk hjertesygdom, kardiomyopati, aterosklerose, højt blodtryk, slagtilfælde og hjertesvigt, opstår, når arterierne, der leverer blod til hjertet, indsnævres eller hærder23,24. Selvom der findes mange foranstaltninger til diagnosticering af CVD'er, er en blodprøve stadig den mest bekvemme og hurtigste. Præcis, følsom og hurtig bestemmelse af tidlige markører relateret til CVD'er kan hurtigt diagnosticere og forstå sygdommens patofysiologiske tilstand. Derfor kræver det voksende diagnostiske behov hos patienter med CVD'er, at man indsamler repræsentative blodprøver af høj kvalitet25. Blodindsamlingsmetoder, der almindeligvis anvendes i dyreforsøg, omfatter haleskæring, halevene, indre canthus, abdominal aorta, sublingual vene, carotis arteriovenøs, halshugning, sprøjtehjerteerhvervelse og lårbensarteriovenøs blodprøvetagning26. Konventionel blodprøvetagning er den mest almindeligt anvendte prøveudtagningsmetode til in vivo-lægemiddelanalyse. På grund af den komplicerede blodsammensætning og mange endogene forstyrrelser er separations- og rensningsprocessen imidlertid cockamamie og kedelig med mulighed for lægemiddeltab og forurening i denne proces27. Ud over at tage hensyn til kravene til dyreetik kan langvarig blodindsamling med større vævsskade også føre til dyrets død og vildlede testresultater af indikator28. Samtidig er acceptable blodprøver af høj kvalitet også afgørende for at sikre kvalitativ og kvantitativ påvisning af dynamiske ændringer i aktive ingredienser, der stammer fra etniske urter i dyreblodet.
Den mikrodialyseprøvetagningsteknik, der anvendes i denne undersøgelse, er en ny biopsiprøveudtagningsteknik, der er udviklet i de sidste 20 år og gradvist anvendes i de farmakologiske undersøgelser af etnisk urtemedicin29. Hvad angår blodmikrodialyse, er det en selektiv permeabel membran, der kontinuerligt kan erhverve store mængder prøver fra det enkelte dyr uden at miste kropsvæske. Og mere bemærkelsesværdigt opretholder mikrodialysebaseret blodprøvetagningsteknologi den dynamiske balance i kropsvæske, undgår problemet med reduceret blodgennemstrømning forårsaget af traditionelle blodindsamlingsteknologier og eliminerer indflydelsen af lægemiddeldistribution på testresultater30,31. Det fortjener at blive nævnt, at blodoptagelse ved online mikrodialyse opnår realtidspåvisning af blodlægemiddelkoncentration hos bevidste dyr på målsteder32,33, hvilket er særligt velegnet til in vivo-undersøgelse af dybe væv og vitale organer. Med den stadig mere modne anvendelse af mikrodialyseteknologi har fremkomsten af nye vævsspecifikke sonder gradvist udviklet sig fra den første påvisning af et enkelt sted i hjernen til flere steder, såsom lever, hud/hudklap, skeletmuskulatur og øje, hvilket udvider undersøgelsen af etniske urters farmakologiske virkning i flere væv og organer33, 34.
Selv om mikrodialyseprøvetagningsteknologi har sine unikke fordele sammenlignet med traditionel prøveudtagningsteknologi, har den også sine egne begrænsninger35. For det første er mikrodialyse ikke egnet til prøveopsamling af alle stoffer, såsom påvisning af proteinbiomakromolekyler og lægemidler, der irreversibelt kan binde til semipermeable membraner. For det andet begrænser sondeegenskaber, perfusategenskaber og sondeimplantationsoperation sondernes genbrug og genbrug. For det tredje har de dyre sonder og de høje omkostninger ved kombinerede onlineinstrumenter begrænset brugen af mikrodialyseteknologi til en vis grad. Afslutningsvis vil anvendelsen af mikrodialyseteknologi utvivlsomt spille en enorm rolle i at fremme etnisk medicin i udforskningen af CVD'er.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af National Natural Science Foundation of China (82104533), China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273), Science & Technology Department of Sichuan-provinsen (2021YJ0175) og Key R&U-projektet i Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438). I mellemtiden vil forfatterne gerne takke Mr. Yuncheng Hong, en senior udstyrsingeniør hos TRI-ANGELS D & H TRADING PTE. LTD. (Singapore by, Singapore), for at levere tekniske tjenester til mikrodialyseteknikker.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal anesthesia system | Rayward Life Technology Co., Ltd | R500IE | |
| Animal temperature maintainer | Rayward Life Technology Co., Ltd | 69020 | |
| Blood microdialysis probe | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Catheter | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Citrate | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 251275 | |
| Electric shaver | Rayward Life Technology Co., Ltd | CP-5200 | |
| Fep tubing | CMA Microdialysis AB | 3409501 | |
| Free movement tank for animals | CMA Microdialysis AB | CMA120 | |
| Glucose | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | G8270 | |
| Hemostatic forceps | Rayward Life Technology Co., Ltd | F21020-16 | |
| Isofluran | Rayward Life Technology Co., Ltd | R510-22 | |
| Micro scissors | Beyotime Biotechnology Co., Ltd | FS221 | |
| Microdialysis collection tube | CMA Microdialysis AB | 7431100 | |
| Microdialysis collector | CMA Microdialysis AB | CMA4004 | |
| Microdialysis in vitro stand | CMA Microdialysis AB | CMA130 | |
| Microdialysis microinjection pump | CMA Microdialysis AB | 788130 | |
| Microdialysis syringe (1.0 mL) | CMA Microdialysis AB | 8309020 | |
| Microdialysis tubing adapter | CMA Microdialysis AB | 3409500 | |
| Microporous filter membrane | Merck Millipore Ltd. | R0DB36622 | |
| Non-absorbable surgical sutures | Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd | S19004 | |
| Operating table | Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd | 30153 | |
| Ophthalmic forceps | Rayward Life Technology Co., Ltd | F12016-15 | |
| Sodium citrate | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 1613859 | |
| Sprague Dawley (SD) rats | Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd | SYXK( )2019-049 |
|
| Surgical scissors | Rayward Life Technology Co., Ltd | S14014-15 | |
| Surgical scissors | Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd | BY-103 | |
| Syringe needle | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Ultrasonic cleaner | Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd | KMH1-240W8101 |
References
- van Rensburg, W. J. J. Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population. Scientific Reports. 12 (1), 11366 (2022).
- Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L. Cardiovascular disease prevention and management of pre-existent cardiovascular disease in a cohort of prostate cancer survivors. Journal of Cancer Survivorship. , (2022).
- Rødevand, L., Tesli, M., Andreassen, O. A. Cardiovascular disease risk in people with severe mental disorders: an update and call for action. Current Opinion in Psychiatry. 35 (4), 277-284 (2022).
- Izumi, Y., et al. Impact of circulating cathepsin K on the coronary calcification and the clinical outcome in chronic kidney disease patients. Heart and Vessels. 31 (1), 6-14 (2016).
- Wang, K., et al. Whey protein hydrolysate alleviated atherosclerosis and hepatic steatosis by regulating lipid metabolism in apoE-/- mice fed a Western diet. Food Research International. 157, 111419 (2022).
- Angelone, T., Rocca, C., Pasqua, T. Nesfatin-1 in cardiovascular orchestration: From bench to bedside. Pharmacological Research. 156, 104766 (2020).
- Bernardi, P. M., Barreto, F., Dalla Costa, T. Application of a LC-MS/MS method for evaluating lung penetration of tobramycin in rats by microdialysis. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 134, 340-345 (2017).
- Anderzhanova, E., Wotjak, C. T. Brain microdialysis and its applications in experimental neurochemistry. Cell and Tissue Research. 354 (1), 27-39 (2013).
- Joukhadar, C., Müller, M. Microdialysis: current applications in clinical pharmacokinetic studies and its potential role in the future. Clinical Pharmacokinetics. 44 (9), 895-913 (2005).
- Stangler, L. A., et al. Microdialysis and microperfusion electrodes in neurologic disease monitoring. Fluids and Barriers of the CNS. 18 (1), 52 (2021).
- Young, B., et al. Cerebral microdialysis. Critical Care Nursing Clinics of North America. 28 (1), 109-124 (2016).
- O'Connell, M. T., Krejci, J. Microdialysis techniques and microdialysis-based patient-near diagnostics. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 414 (10), 3165-3175 (2022).
- Hammarlund-Udenaes, M. Microdialysis as an important technique in systems pharmacology-a historical and methodological review. The AAPS Journal. 19 (5), 1294-1303 (2017).
- Stahl, M., Bouw, R., Jackson, A., Pay, V. Human microdialysis. Current Pharmaceutical Biotechnology. 3 (2), 165-178 (2002).
- Pierce, C. F., Kwasnicki, A., Lakka, S. S., Engelhard, H. H. Cerebral microdialysis as a tool for assessing the delivery of chemotherapy in brain tumor patients. World Neurosurgery. 145, 187-196 (2021).
- Sørensen, M., Jacobsen, S., Petersen, L. Microdialysis in equine research: a review of clinical and experimental findings. Veterinary Journal. 197 (3), 553-559 (2013).
- Dmitrieva, N., Rodríguez-Malaver, A. J., Pérez, J., Hernández, L. Differential release of neurotransmitters from superficial and deep layers of the dorsal horn in response to acute noxious stimulation and inflammation of the rat paw. European Journal of Pain. 8 (3), 245-252 (2004).
- Li, T., et al. Microdialysis sampling and HPLC-MS/MS quantification of sinomenine, ligustrazine, gabapentin, paracetamol, pregabalin and amitriptyline in rat blood and brain extracellular fluid. Acta Pharmaceutica Sinica. 55 (9), 2198-2206 (2020).
- Chauzy, A., Lamarche, I., Adier, C., Couet, W., Marchand, S. Microdialysis study of Aztreonam-Avibactam distribution in peritoneal fluid and muscle of rats with or without experimental peritonitis. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 62 (10), 01228 (2018).
- Fang, X. X., Ardehali, H., Min, J. X., Wang, F. D. The molecular and metabolic landscape of iron and ferroptosis in cardiovascular disease. Nature Reviews. Cardiology. , 1-17 (2022).
- Samson, R., Ennezat, P. V., Le Jemtel, T. H., Oparil, S. Cardiovascular disease risk reduction and body mass index. Current Hypertension Reports. , (2022).
- Kim, M. H., et al. School racial segregation and long-term cardiovascular health among Black adults in the US: A quasi-experimental study. PLoS Medicine. 19 (6), 1004031 (2022).
- Qin, Y. H., et al. Role of m6A RNA methylation in cardiovascular disease (Review). International Journal of Molecular Medicine. 46 (6), 1958-1972 (2020).
- Xu, C. M., Liu, C. J., Xiong, J. H., Yu, J. Cardiovascular aspects of the (pro)renin receptor: Function and significance. FASEB Journal. 36 (4), 22237 (2022).
- Guvenc-Bayram, G., Yalcin, M. The intermediary role of the central cyclooxygenase / lipoxygenase enzymes in intracerebroventricular injected nesfatin-1-evoked cardiovascular effects in rats. Neuroscience Letters. 756, 135961 (2021).
- Ahrens Kress, A. P., Zhang, Y. D., Kaiser-Vry, A. R., Sauer, M. B. A comparison of blood collection techniques in mice and their effects on welfare. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 61 (3), 287-295 (2022).
- Joshi, A., Patel, H., Joshi, A., Stagni, G. Pharmacokinetic applications of cutaneous microdialysis: Continuous+intermittent vs continuous-only sampling. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 83, 16-20 (2017).
- Reyes-Garcés, N., et al. In vivo brain sampling using a microextraction probe reveals metabolic changes in rodents after deep brain stimulation. Analytical Chemistry. 91 (15), 9875-9884 (2019).
- Kho, C. M., Enche Ab Rahim, S. K., Ahmad, Z. A., Abdullah, N. S. A review on microdialysis calibration methods: the theory and current related efforts. Molecular Neurobiology. 54 (5), 3506-3527 (2017).
- Zhuang, L. N., et al. Theory and application of microdialysis in pharmacokinetic studies. Current Drug Metabolism. 16 (10), 919-931 (2015).
- Zhang, Y. F., Huang, X. X., Zhu, L. X. Metabonomics research strategy based on microdialysis technique. China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (1), 214-220 (2020).
- Carpenter, K. L., Young, A. M., Hutchinson, P. J. Advanced monitoring in traumatic brain injury: microdialysis. Current Opinion in Critical Care. 23 (2), 103-109 (2017).
- Brunner, M., Langer, O. Microdialysis versus other techniques for the clinical assessment of in vivo tissue drug distribution. The AAPS Journal. 8 (2), 263-271 (2006).
- Tettey-Amlalo, R. N., Kanfer, I., Skinner, M. F., Benfeldt, E., Verbeeck, R. K. Application of dermal microdialysis for the evaluation of bioequivalence of a ketoprofen topical gel. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 36 (2-3), 219-225 (2009).
- Dhanani, J. A., et al. Recovery rates of combination antibiotic therapy using in vitro microdialysis simulating in vivo conditions. Journal of Pharmaceutical Analysis. 8 (6), 407-412 (2018).
