Summary
Настоящий протокол описывает простой и эффективный метод динамического сбора крови сердца крысы в режиме реального времени с использованием метода микродиализа.
Abstract
Динамический анализ компонентов крови имеет большое значение для понимания сердечно-сосудистых заболеваний и связанных с ними заболеваний, таких как инфаркт миокарда, аритмия, атеросклероз, кардиогенный отек легких, тромбоэмболия легочной артерии и церебральная эмболия. В то же время необходимо срочно прорваться через метод непрерывного забора сердечной крови у живых крыс, чтобы оценить эффективность терапии отличительной этнической медицины. В этом исследовании зонд для микродиализа крови был имплантирован в правую яремную вену крыс в точной и неинвазивной хирургической процедуре. Затем образцы сердечной крови собирали со скоростью от 2,87 нл/мин до 2,98 мл/мин путем подключения к онлайн-системе сбора образцов микродиализа. Еще важнее то, что полученные образцы крови могут временно храниться в контейнерах для микродиализа при температуре 4 °C. Основанная на микродиализе онлайн-программа непрерывного сбора крови из сердца крысы в значительной степени гарантировала качество образцов крови, продвигая и укрепляя научную рациональность исследований системных сердечно-сосудистых заболеваний и оценивая этномедицинскую терапию с точки зрения гематологии.
Introduction
С ускорением темпа жизни и повышением психологического давления сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ), как правило, возникают у молодых, средних и пожилых людей 1,2. Заболеваемость и смертность от ССЗ высокие, с особенностями острого начала, быстрого прогрессирования и длительного течения заболевания, что серьезно влияет на безопасность пациентов3. Возникновение сердечно-сосудистых заболеваний может быть тесно связано с изменениями некоторых компонентов крови, таких как холестерин, липиды сыворотки крови, глюкоза крови, ферменты миокарда и протеинкиназыК4,5,6. Соответствующая ситуация пациента может быть решена наиболее быстро, проанализировав обычные пункты анализа крови. Следовательно, качество образцов крови определяет точность результатов теста. Однако традиционные методы забора крови имеют некоторые неизбежные недостатки, которые серьезно влияют на результаты эксперимента, такие как большая площадь травмы, малый объем забора крови, высокие требования к операторам, неспособность отражать изменения лекарств в режиме реального времени, громоздкая предварительная обработка образцов крови, большое потребление экспериментальных животных и несоблюдение этических требований животных 7,8,9 . Благодаря постоянному прогрессу в области медицинских технологий качество сбора крови также выдвигает более высокие требования. Поэтому необходимо срочно разработать новую технологию забора крови для преодоления вышеуказанных недостатков.
Микродиализ - это метод отбора проб in vivo, основанный на принципах диализа10. В неравновесных условиях измеряемые соединения диффундируют и перфузируются из ткани вдоль градиента концентрации в микродиализный зонд, встроенный в ткань, в диализат, который непрерывно удаляется вместе с диализатом, достигая цели отбора проб из живой ткани11,12. По сравнению с традиционными методами отбора проб метод микродиализа имеет великолепные преимущества в следующих аспектах13,14,15: непрерывное отслеживание изменений различных соединений в крови в режиме реального времени; отбор проб не требует утомительной предварительной обработки и может реально отражать концентрацию целевого соединения в месте отбора проб; зонды могут быть имплантированы в различные части тела для исследования поглощения, распределения, метаболизма, экскреции и токсичности целевых соединений; полученный образец не содержит биологических макромолекул (>20 кДа). Таким образом, более качественные образцы крови обеспечивают лучшую интерпретацию сердечно-сосудистых заболеваний и механизма, который лечится этнической медициной.
Микродиализные пробоотборные системы обычно состоят из микроинжекционных насосов, соединительных трубок, резервуаров для перемещения животных, микродиализных зондов и пробоотборников16. Являясь наиболее важной частью устройства системы микродиализа, обычные микродиализные зонды включают концентрические зонды, гибкие зонды, линейные зонды и шунтирующий зонд17. Среди них гибкие зонды представляют собой мягкие и неметаллические зонды, которые в основном используются для сбора образцов из кровеносных сосудов и периферических тканей, таких как сердце, мышцы, кожа и жир, бодрствующих и свободно движущихся или анестезированных животных13. При контакте с кровеносными сосудами или тканями зонд можно гибко согнуть, что позволяет избежать необратимого повреждения зонда или места отбора проб. С непрерывным развитием зондовых технологий применение технологии микродиализа в различных областях также углубляется. В этой статье кровь сердца крысы была динамически и непрерывно получена с помощью технологии неинвазивного микродиализа с помощью гибкого зонда, предназначенного для сбора крови.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Протокол для животных был одобрен Административным комитетом Университета традиционной китайской медицины Чэнду (номер записи: 2021-11). Указанные свободные от патогенов крысы Sprague Dawley (SD) (8-10 недель, 260-300 г) были выращены в независимых вентиляционных клетках, поддерживая лабораторную среду при температуре 22 ° C и относительной влажности 65%, и были использованы для настоящего исследования. Животные были получены из коммерческого источника (см. Таблицу материалов). Все крысы были приучены к адаптивному кормлению в течение 1 недели со свободной водой и диетой в течение периода.
1. Экспериментальная подготовка
- Соберите оборудование, участвующее в микродиализе забора крови (см. Таблицу материалов), как показано на рисунке 1.
- В качестве перфузионной жидкости для забора крови при микродиализе готовят раствор декстрозы цитрата антикоагулянтного цитрата, содержащий 3,50 ммоль/л цитрата натрия, 7,50 ммоль/л цитрата натрия и 13,60 ммоль/л глюкозы (см. Таблицу материалов).
- Перед использованием отфильтруйте АКД с помощью мембранной фильтрующей установки 0,22 мкм и удалите пузырьки ультразвуковым способом. Держите ACD при 37 ° C, чтобы уменьшить стимуляцию крыс SD.
2. Проверка проходимости системы трубопроводов микродиализа
- Присоедините входное отверстие зонда диализного блока с иглой шприца, адаптером трубки и трубкой fep (см. Таблицу материалов).
ПРИМЕЧАНИЕ: Синий конец зонда микродиализа предназначен для притока жидкости, а прозрачный конец - для оттока жидкости. - Проверьте проходимость системы трубопроводов микродиализа путем перфузии ACD18 в систему трубопроводов со скоростью 2 мкл / мин.
ПРИМЕЧАНИЕ: Если ACD вытекает из места сбора образцов, для дальнейшего сбора сердечной крови можно использовать беспрепятственную систему микродиализа. Если нет, необходимо проверить датчик крови на наличие нарушенных утечек или герметичность соединения трубы с трубой.
3. Имплантация микродиализного зонда
- Обезболивают крыс 2% изофлураном в воздушно-кислородной смеси 0,6 л/мин, прикрепляют крыс без сознания к операционному столу и поддерживают температуру тела на уровне 37 °C с помощью средства поддержания температуры животных (см. Таблицу материалов).
- Удалите мех с шеи электробритвой и продезинфицируйте место операции тремя чередующимися раундами бетадина и 70% спирта. Вводят крысе бупивакаин (1,5 мг/кг). Обнажают правую яремную вену путем тупого рассечения мягких тканей и периваскулярной фасции через разрез 1,5 см по средней линии шеи.
ПРИМЕЧАНИЕ: Все хирургические инструменты и инструменты, используемые в эксперименте, должны быть заранее стерилизованы автоклавированием. Используйте стерильные перчатки и хирургические простыни. Вся экспериментальная операция должна проводиться в стерильной среде. Следуйте местным рекомендациям по использованию животных для режима анестезии и обезболивания. - Сделайте съемный скользящий узел, используя хирургический шов 4-0 в правой яремной вене на дистальном конце сердца, чтобы временно заблокировать кровоток, и сделайте разрез 1,5 см в правой яремной вене рядом с сердцем.
- Ввести игольчатый катетерный стилет (длина 25 мм, диаметр 0,7 мм, см. Таблицу материалов) в правую яремную вену по направлению к проксимальному концу сердца крысы, ввести зонд для микродиализа крови (общая длина зонда 24 мм, длина мембраны 10 мм) в катетер и имплантировать зонд глазными щипцами вдоль косого разреза катетерного стилета19.
- Извлеките направленный катетер-стилет и полностью погрузите полупроницаемую мембрану зонда (длина мембраны 10 мм, диаметр мембраны 0,5 мм) в правую яремную вену. Распутайте съемный узел на дистальном конце сердца, чтобы восстановить кровоток в правой яремной вене.
- Свяжите зонд с правой яремной веной с помощью хирургических швов 4-0 и подкожно проденьте хвостовую трубку зонда через заднюю часть шеи. На рисунке 2 показаны конкретные этапы имплантации зонда.
ПРИМЕЧАНИЕ: Молекулярная отсечка зондом для микродиализа крови, используемым в этом исследовании, составляет >20 кДа. Собранные образцы крови содержат вещества с молекулярной массой менее 20 кДа.
4. Микродиализный отбор проб
- Через неделю после имплантации микродиализного зонда крысы, выздоравливающие после хирургической травмы, проходят микродиализный отбор проб. Поместите бодрствующую крысу в свободно движущийся резервуар (см. Таблицу материалов) и подключите зонд к системе микродиализа. Уравновесьте зондовую диализную мембрану, орошая ACD со скоростью 2 мкл / мин в течение 1 часа.
- Соберите образцы крови для микродиализа со скоростью потока 2 мкл / мин и временно храните их во фракционном контейнере с температурой 4 °C.
ПРИМЕЧАНИЕ: Полученные образцы крови могут быть проверены непосредственно центрифугированием при 20 000 x g в течение 10 минут при комнатной температуре. Или его можно хранить при -80 ° C для следующего тестирования. При сборе образцов важно всегда следить за тем, не выпадает ли зонд и/или не вытекает ли он наружу.
5. Операция после отбора проб
- Обезболивают крыс SD 2% изофлураном в воздушно-кислородной смеси со скоростью 0,6 л/мин.
- Препарируйте, чтобы еще раз подтвердить, что зонд находится в правой яремной вене. Извлеките микродиализный зонд из правой яремной вены и поместите его в сверхчистую воду.
- Наконец, усыпляют крыс путем вдыхания 5% изофлурана.
- Подключите зонд к трубопроводу и промойте в течение ночи со скоростью 2 мкл / мин сверхчистой водой, чтобы полностью смыть остатки соли в трубе и зонде.
- Извлеките зонд и замочите его в сверхчистой воде. Хранить при температуре 4 °C, чтобы предотвратить сокращение диализной мембраны зонда.
ПРИМЕЧАНИЕ: Если объем диализирующей жидкости не соответствует объему перфузионной жидкости, зонд может быть заблокирован свернувшейся кровью. Зонд может быть помещен в раствор белка поджелудочной железы до тех пор, пока видимое вещество не отслоится от кончика мембраны зонда.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Настоящий протокол позволил получить сердечную кровь от крыс, находящихся в сознании, в соответствии с параметрами отбора проб, установленными в микродиализном оборудовании. Нормальные образцы крови должны быть ярко-красными, в то время как животные с гипоксией, потенциальными сгустками крови или анемическим заболеванием могут иметь темно-фиолетовый или темно-красный цвет. Образцы, полученные с помощью метода микродиализа крови, бесцветны, прозрачны и прозрачны, что может быть использовано для анализа сывороточных маркеров различных заболеваний и распределения в крови лекарств и их метаболитов с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии или масс-спектрометрии. Заданные параметры и объем собранной разовой крови приведены в таблице 1.
Рисунок 1: Оборудование и аппаратура, необходимые для микродиализа крови . (А) Система анестезии животных. (B) Хирургические инструменты. (С) Операционный стол. D) Пробирка для отбора проб. (E) Зонд для микродиализа крови, катетер и игла шприца. (F) Микроинжекционный насос. (G) Шприц для микроинъекций. (H) Микродиализный зонд in vitro стенд. (I) Свободно движущийся резервуар для крыс. j) Охлаждаемый коллектор фракций. (K) Образец цельной крови и образец крови крысы с помощью микродиализа. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
Рисунок 2: Схематическая иллюстрация зонда для микродиализа крови, имплантированного в правую внутреннюю яремную вену крысы. Пожалуйста, нажмите здесь, чтобы просмотреть увеличенную версию этого рисунка.
| Параметры | Ценность |
| Скорость перфузии | 2 мкл/мин |
| Частота дискретизации | 2 мкл/мин |
| Температура отбора проб | 4 °С |
| Объем разового забора крови | 12 мкл |
Таблица 1: Заданные параметры системы микродиализного забора крови.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
ССЗ являются распространенным хроническим заболеванием в клиниках с постепенно растущей заболеваемостью в Китае, а возраст начала имеет тенденцию быть моложе, вызывая беспокойство и панику у большинства пациентов20,21. Будучи основной причиной смерти в мире, сердечно-сосудистые заболевания могут вызывать инфаркт головного мозга и другие заболевания с высокой смертностью, серьезно угрожая здоровой жизни пациентов22. Сердечно-сосудистые заболевания, включая ишемическую болезнь сердца, кардиомиопатию, атеросклероз, высокое кровяное давление, инсульт и сердечную недостаточность, возникают, когда артерии, снабжающие кровью сердце, сужаются или затвердевают23,24. Несмотря на то, что существует множество мер для диагностики сердечно-сосудистых заболеваний, анализ крови по-прежнему является наиболее удобным и быстрым. Точное, чуткое и быстрое определение ранних маркеров, связанных с ССЗ, позволяет быстро диагностировать и понять патофизиологическое состояние заболевания. Таким образом, растущие диагностические потребности пациентов с сердечно-сосудистыми заболеваниями требуют сбора высококачественных и репрезентативных образцов крови25. Методы сбора крови, обычно используемые в экспериментах на животных, включают разрезание хвоста, хвостовой вены, внутреннего кантуса, брюшной аорты, подъязычной вены, артериовенозной сонной артерии, обезглавливание, забор сердца шприцем и отбор проб бедренной артериовенозной крови26. Обычный забор крови является наиболее часто используемым методом отбора проб для анализа лекарств in vivo. Однако из-за сложного состава крови и множества эндогенных нарушений процесс разделения и очистки является кокамами и утомительным, с возможностью потери лекарств и загрязнения в этом процессе27. В дополнение к учету требований этики животных, длительный забор крови при более крупном повреждении тканей также может привести к гибели животного и ввести в заблуждение результаты испытаний показателей28. В то же время высококачественные и приемлемые образцы крови также имеют решающее значение для обеспечения качественного и количественного обнаружения динамических изменений активных ингредиентов, полученных из этнических трав в крови животных.
Метод микродиализного отбора проб, используемый в этом исследовании, представляет собой новый метод отбора биопсий, разработанный за последние 20 лет и постепенно применяемый в фармакологических исследованиях этнической фитотерапии29. Что касается микродиализа крови, то это селективная проницаемая мембрана, которая может непрерывно получать большое количество образцов от отдельного животного без потери жидкости организма. И, что более важно, технология забора крови на основе микродиализа поддерживает динамический баланс жидкости организма, позволяет избежать проблемы снижения кровотока, вызванной традиционными технологиями забора крови, и исключает влияние распределения лекарств на результаты анализов30,31. Стоит отметить, что сбор крови с помощью онлайн-микродиализа позволяет в режиме реального времени определять концентрацию лекарственного средства в крови у находящихся в сознании животных в целевых участках32,33, что особенно подходит для исследования in vivo глубоких тканей и жизненно важных органов. По мере все более зрелого применения технологии микродиализа появление новых тканеспецифических зондов постепенно развивалось от первоначального обнаружения одного участка в головном мозге до нескольких участков, таких как печень, кожа / кожный лоскут, скелетные мышцы и глаз, что расширяет исследование фармакологического действия этнических трав в нескольких тканях и органах33, 34.
Хотя технология микродиализного отбора проб имеет свои уникальные преимущества по сравнению с традиционной технологией отбора проб, она также имеет свои ограничения35. Во-первых, микродиализ не подходит для отбора проб всех веществ, таких как обнаружение белковых биомакромолекул и лекарств, которые могут необратимо связываться с полупроницаемыми мембранами. Во-вторых, характеристики зонда, перфузатные свойства и операция имплантации зонда ограничивают рециркуляцию и повторное использование зондов. В-третьих, дорогостоящие зонды и высокая стоимость комбинированных приборов в режиме онлайн в некоторой степени ограничивают использование технологии микродиализа. В заключение следует отметить, что применение технологии микродиализа, несомненно, сыграет огромную роль в продвижении этнической медицины в исследовании сердечно-сосудистых заболеваний.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторам раскрывать нечего.
Acknowledgments
Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (82104533), Китайским фондом постдокторантуры (2020M683273), Департаментом науки и технологий провинции Сычуань (2021YJ0175) и ключевым научно-исследовательским проектом Научно-технического плана провинции Сычуань (2022YFS0438). Между тем, авторы хотели бы поблагодарить г-на Юньчэн Хонга, старшего инженера по оборудованию в TRI-ANGELS D&H TRADING PTE. LTD. (г. Сингапур, Сингапур), за предоставление технических услуг по методам микродиализа.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal anesthesia system | Rayward Life Technology Co., Ltd | R500IE | |
| Animal temperature maintainer | Rayward Life Technology Co., Ltd | 69020 | |
| Blood microdialysis probe | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Catheter | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Citrate | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 251275 | |
| Electric shaver | Rayward Life Technology Co., Ltd | CP-5200 | |
| Fep tubing | CMA Microdialysis AB | 3409501 | |
| Free movement tank for animals | CMA Microdialysis AB | CMA120 | |
| Glucose | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | G8270 | |
| Hemostatic forceps | Rayward Life Technology Co., Ltd | F21020-16 | |
| Isofluran | Rayward Life Technology Co., Ltd | R510-22 | |
| Micro scissors | Beyotime Biotechnology Co., Ltd | FS221 | |
| Microdialysis collection tube | CMA Microdialysis AB | 7431100 | |
| Microdialysis collector | CMA Microdialysis AB | CMA4004 | |
| Microdialysis in vitro stand | CMA Microdialysis AB | CMA130 | |
| Microdialysis microinjection pump | CMA Microdialysis AB | 788130 | |
| Microdialysis syringe (1.0 mL) | CMA Microdialysis AB | 8309020 | |
| Microdialysis tubing adapter | CMA Microdialysis AB | 3409500 | |
| Microporous filter membrane | Merck Millipore Ltd. | R0DB36622 | |
| Non-absorbable surgical sutures | Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd | S19004 | |
| Operating table | Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd | 30153 | |
| Ophthalmic forceps | Rayward Life Technology Co., Ltd | F12016-15 | |
| Sodium citrate | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 1613859 | |
| Sprague Dawley (SD) rats | Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd | SYXK( )2019-049 |
|
| Surgical scissors | Rayward Life Technology Co., Ltd | S14014-15 | |
| Surgical scissors | Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd | BY-103 | |
| Syringe needle | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Ultrasonic cleaner | Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd | KMH1-240W8101 |
References
- van Rensburg, W. J. J. Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population. Scientific Reports. 12 (1), 11366 (2022).
- Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L. Cardiovascular disease prevention and management of pre-existent cardiovascular disease in a cohort of prostate cancer survivors. Journal of Cancer Survivorship. , (2022).
- Rødevand, L., Tesli, M., Andreassen, O. A. Cardiovascular disease risk in people with severe mental disorders: an update and call for action. Current Opinion in Psychiatry. 35 (4), 277-284 (2022).
- Izumi, Y., et al. Impact of circulating cathepsin K on the coronary calcification and the clinical outcome in chronic kidney disease patients. Heart and Vessels. 31 (1), 6-14 (2016).
- Wang, K., et al. Whey protein hydrolysate alleviated atherosclerosis and hepatic steatosis by regulating lipid metabolism in apoE-/- mice fed a Western diet. Food Research International. 157, 111419 (2022).
- Angelone, T., Rocca, C., Pasqua, T. Nesfatin-1 in cardiovascular orchestration: From bench to bedside. Pharmacological Research. 156, 104766 (2020).
- Bernardi, P. M., Barreto, F., Dalla Costa, T. Application of a LC-MS/MS method for evaluating lung penetration of tobramycin in rats by microdialysis. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 134, 340-345 (2017).
- Anderzhanova, E., Wotjak, C. T. Brain microdialysis and its applications in experimental neurochemistry. Cell and Tissue Research. 354 (1), 27-39 (2013).
- Joukhadar, C., Müller, M. Microdialysis: current applications in clinical pharmacokinetic studies and its potential role in the future. Clinical Pharmacokinetics. 44 (9), 895-913 (2005).
- Stangler, L. A., et al. Microdialysis and microperfusion electrodes in neurologic disease monitoring. Fluids and Barriers of the CNS. 18 (1), 52 (2021).
- Young, B., et al. Cerebral microdialysis. Critical Care Nursing Clinics of North America. 28 (1), 109-124 (2016).
- O'Connell, M. T., Krejci, J. Microdialysis techniques and microdialysis-based patient-near diagnostics. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 414 (10), 3165-3175 (2022).
- Hammarlund-Udenaes, M. Microdialysis as an important technique in systems pharmacology-a historical and methodological review. The AAPS Journal. 19 (5), 1294-1303 (2017).
- Stahl, M., Bouw, R., Jackson, A., Pay, V. Human microdialysis. Current Pharmaceutical Biotechnology. 3 (2), 165-178 (2002).
- Pierce, C. F., Kwasnicki, A., Lakka, S. S., Engelhard, H. H. Cerebral microdialysis as a tool for assessing the delivery of chemotherapy in brain tumor patients. World Neurosurgery. 145, 187-196 (2021).
- Sørensen, M., Jacobsen, S., Petersen, L. Microdialysis in equine research: a review of clinical and experimental findings. Veterinary Journal. 197 (3), 553-559 (2013).
- Dmitrieva, N., Rodríguez-Malaver, A. J., Pérez, J., Hernández, L. Differential release of neurotransmitters from superficial and deep layers of the dorsal horn in response to acute noxious stimulation and inflammation of the rat paw. European Journal of Pain. 8 (3), 245-252 (2004).
- Li, T., et al. Microdialysis sampling and HPLC-MS/MS quantification of sinomenine, ligustrazine, gabapentin, paracetamol, pregabalin and amitriptyline in rat blood and brain extracellular fluid. Acta Pharmaceutica Sinica. 55 (9), 2198-2206 (2020).
- Chauzy, A., Lamarche, I., Adier, C., Couet, W., Marchand, S. Microdialysis study of Aztreonam-Avibactam distribution in peritoneal fluid and muscle of rats with or without experimental peritonitis. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 62 (10), 01228 (2018).
- Fang, X. X., Ardehali, H., Min, J. X., Wang, F. D. The molecular and metabolic landscape of iron and ferroptosis in cardiovascular disease. Nature Reviews. Cardiology. , 1-17 (2022).
- Samson, R., Ennezat, P. V., Le Jemtel, T. H., Oparil, S. Cardiovascular disease risk reduction and body mass index. Current Hypertension Reports. , (2022).
- Kim, M. H., et al. School racial segregation and long-term cardiovascular health among Black adults in the US: A quasi-experimental study. PLoS Medicine. 19 (6), 1004031 (2022).
- Qin, Y. H., et al. Role of m6A RNA methylation in cardiovascular disease (Review). International Journal of Molecular Medicine. 46 (6), 1958-1972 (2020).
- Xu, C. M., Liu, C. J., Xiong, J. H., Yu, J. Cardiovascular aspects of the (pro)renin receptor: Function and significance. FASEB Journal. 36 (4), 22237 (2022).
- Guvenc-Bayram, G., Yalcin, M. The intermediary role of the central cyclooxygenase / lipoxygenase enzymes in intracerebroventricular injected nesfatin-1-evoked cardiovascular effects in rats. Neuroscience Letters. 756, 135961 (2021).
- Ahrens Kress, A. P., Zhang, Y. D., Kaiser-Vry, A. R., Sauer, M. B. A comparison of blood collection techniques in mice and their effects on welfare. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 61 (3), 287-295 (2022).
- Joshi, A., Patel, H., Joshi, A., Stagni, G. Pharmacokinetic applications of cutaneous microdialysis: Continuous+intermittent vs continuous-only sampling. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 83, 16-20 (2017).
- Reyes-Garcés, N., et al. In vivo brain sampling using a microextraction probe reveals metabolic changes in rodents after deep brain stimulation. Analytical Chemistry. 91 (15), 9875-9884 (2019).
- Kho, C. M., Enche Ab Rahim, S. K., Ahmad, Z. A., Abdullah, N. S. A review on microdialysis calibration methods: the theory and current related efforts. Molecular Neurobiology. 54 (5), 3506-3527 (2017).
- Zhuang, L. N., et al. Theory and application of microdialysis in pharmacokinetic studies. Current Drug Metabolism. 16 (10), 919-931 (2015).
- Zhang, Y. F., Huang, X. X., Zhu, L. X. Metabonomics research strategy based on microdialysis technique. China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (1), 214-220 (2020).
- Carpenter, K. L., Young, A. M., Hutchinson, P. J. Advanced monitoring in traumatic brain injury: microdialysis. Current Opinion in Critical Care. 23 (2), 103-109 (2017).
- Brunner, M., Langer, O. Microdialysis versus other techniques for the clinical assessment of in vivo tissue drug distribution. The AAPS Journal. 8 (2), 263-271 (2006).
- Tettey-Amlalo, R. N., Kanfer, I., Skinner, M. F., Benfeldt, E., Verbeeck, R. K. Application of dermal microdialysis for the evaluation of bioequivalence of a ketoprofen topical gel. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 36 (2-3), 219-225 (2009).
- Dhanani, J. A., et al. Recovery rates of combination antibiotic therapy using in vitro microdialysis simulating in vivo conditions. Journal of Pharmaceutical Analysis. 8 (6), 407-412 (2018).
