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Medicine

नॉनइनवेसिव माइक्रोडायलिसिस तकनीक के माध्यम से चूहे के दिल से गतिशील निरंतर रक्त निष्कर्षण

Published: September 13, 2022 doi: 10.3791/64531

Summary

वर्तमान प्रोटोकॉल माइक्रोडायलिसिस तकनीक का उपयोग करके चूहे के दिल के रक्त के वास्तविक समय और गतिशील संग्रह के लिए एक सरल और कुशल विधि का वर्णन करता है।

Abstract

हृदय रोगों और उनके संबंधित रोगों, जैसे मायोकार्डियल रोधगलन, अतालता, एथेरोस्क्लेरोसिस, कार्डियोजेनिक फुफ्फुसीय एडिमा, फुफ्फुसीय अन्त: शल्यता और सेरेब्रल एम्बोलिज्म को समझने में रक्त घटकों का गतिशील विश्लेषण बहुत महत्वपूर्ण है। इसी समय, विशिष्ट जातीय चिकित्सा चिकित्सा की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए जीवित चूहों में निरंतर हृदय रक्त नमूना तकनीक को तोड़ना जरूरी है। इस अध्ययन में, एक सटीक और गैर-आक्रामक शल्य चिकित्सा प्रक्रिया में चूहों की दाहिनी जुगुलर नस में एक रक्त माइक्रोडायलिसिस जांच प्रत्यारोपित की गई थी। कार्डियक रक्त के नमूने तब एक ऑनलाइन माइक्रोडायलिसिस नमूना संग्रह प्रणाली से जुड़कर 2.87 एनएल / मिनट से 2.98 एमएल / मिनट की दर से एकत्र किए गए थे। इससे भी अधिक महत्वपूर्ण रूप से, अधिग्रहित रक्त के नमूने अस्थायी रूप से 4 डिग्री सेल्सियस पर माइक्रोडायलिसिस कंटेनरों में संग्रहीत किए जा सकते हैं। चूहे के दिल से माइक्रोडायलिसिस-आधारित ऑनलाइन निरंतर रक्त संग्रह कार्यक्रम ने रक्त के नमूनों की गुणवत्ता की बहुत गारंटी दी है, प्रणालीगत कार्डियोवैस्कुलर रोगों पर शोध की वैज्ञानिक तर्कसंगतता को आगे बढ़ाया और मजबूत किया है और हेमेटोलॉजी के दृष्टिकोण से नृवंशविज्ञान चिकित्सा का मूल्यांकन किया है।

Introduction

जीवन की गति के त्वरण और मनोवैज्ञानिक दबाव में वृद्धि के साथ, हृदय रोग (सीवीडी) युवा, मध्यम आयु वर्ग और बुजुर्ग लोगों में होते हैं सीवीडी की रुग्णता और मृत्यु दर अधिक है, तीव्र शुरुआत, तेजी से प्रगति और बीमारी के एक लंबे कोर्स की विशेषताओं के साथ,जो रोगियों की सुरक्षा को गंभीरता से प्रभावित करते हैं। सीवीडी की घटना कुछ रक्त घटकों में परिवर्तन से निकटता से संबंधित हो सकती है, जैसे कोलेस्ट्रॉल, सीरम लिपिड, रक्त ग्लूकोज, मायोकार्डियल एंजाइम, और प्रोटीन काइनेज के 4,5,6। रोगी की प्रासंगिक स्थिति को नियमित रक्त परीक्षा वस्तुओं का विश्लेषण करके सबसे जल्दी प्रबंधित किया जा सकता है। इसलिए, रक्त के नमूनों की गुणवत्ता परीक्षण परिणामों की सटीकता निर्धारित करती है। हालांकि, रक्त संग्रह के लिए पारंपरिक तरीकों में कुछ अपरिहार्य कमियां हैं, जो प्रयोगात्मक परिणामों को गंभीरता से प्रभावित करती हैं, जैसे कि बड़े आघात क्षेत्र, छोटे रक्त संग्रह की मात्रा, ऑपरेटरों के लिए उच्च आवश्यकताएं, वास्तविक समय में दवापरिवर्तनों को प्रतिबिंबित करने में असमर्थता, बोझिल रक्त नमूना प्रथागत, प्रयोगात्मक जानवरों की बड़ी खपत, और पशु नैतिक आवश्यकताओं को पूरा करने में विफलता 7,8,9 . चिकित्सा प्रौद्योगिकी में निरंतर प्रगति के साथ, रक्त संग्रह की गुणवत्ता ने भी उच्च आवश्यकताओं को आगे बढ़ाया है। इसलिए, उपरोक्त कमियों को दूर करने के लिए एक नई रक्त नमूना तकनीक विकसित करना जरूरी है।

माइक्रोडायलिसिस डायलिसिससिद्धांतों 10 पर आधारित एक इनविवो सैंपलिंग तकनीक है। गैर-संतुलन स्थितियों के तहत, मापा जाने वाले यौगिकों को ऊतक से एकाग्रता ढाल के साथ ऊतक से डायलीसेट में एम्बेडेड माइक्रोडायलिसिस जांच में फैलाया और प्रसारित किया जाता है, जिसे डायलीसेट के साथ लगातार हटा दिया जाता है, जिससे जीवित ऊतक11,12 से नमूना लेने का उद्देश्य प्राप्त होता है। पारंपरिक नमूना विधियों की तुलना में, माइक्रोडायलिसिस तकनीक में निम्नलिखित पहलुओं 13,14,15 में शानदार फायदे हैं: रक्त में विभिन्न यौगिकों के परिवर्तनों की निरंतर वास्तविक समय ट्रैकिंग; नमूनाकरण के लिए कोई थकाऊ पूर्व-प्रसंस्करण की आवश्यकता नहीं होती है और वास्तव में नमूना स्थल पर लक्ष्य यौगिक की एकाग्रता का प्रतिनिधित्व कर सकता है; लक्ष्य यौगिकों के अवशोषित, वितरण, चयापचय, उत्सर्जन और विषाक्तता की जांच के लिए शरीर के विभिन्न हिस्सों में जांच प्रत्यारोपित की जा सकती है; अधिग्रहित नमूने में कोई जैविक मैक्रोमोलेक्यूल्स (>20 केडी) नहीं है। इसलिए, उच्च गुणवत्ता वाले रक्त के नमूने सीवीडी और जातीय चिकित्सा द्वारा इलाज किए गए तंत्र की बेहतर व्याख्या सुनिश्चित करते हैं।

माइक्रोडायलिसिस नमूना प्रणाली में आम तौर पर माइक्रो-इंजेक्शन पंप, कनेक्टिंग ट्यूब, पशु-मुक्त आंदोलन टैंक, माइक्रोडायलिसिस जांच और नमूना कलेक्टरशामिल होते हैं। माइक्रोडायलिसिस सिस्टम के डिवाइस के सबसे महत्वपूर्ण हिस्से के रूप में, सामान्य माइक्रोडायलिसिस जांच में संकेंद्रित जांच, लचीली जांच, रैखिक जांच और शंट जांच17 शामिल हैं। इनमें से, लचीली जांच नरम और गैर-धातु जांच हैं, जिनका उपयोग मुख्य रूप से रक्त वाहिकाओं और परिधीय ऊतकों जैसे हृदय, मांसपेशियों, त्वचा और जागृत और स्वतंत्र रूप से चलने वाले या एनेस्थेटाइज्ड जानवरों की वसा से नमूने एकत्र करने के लिए किया जाताहै। रक्त वाहिकाओं या ऊतकों के संपर्क में आने पर, जांच को लचीले ढंग से मोड़ा जा सकता है, जिससे जांच या नमूना स्थल को अपरिवर्तनीय क्षति से बचा जा सकता है। जांच प्रौद्योगिकी के निरंतर विकास के साथ, विभिन्न क्षेत्रों में माइक्रोडायलिसिस प्रौद्योगिकी का अनुप्रयोग भी गहरा हो रहा है। इस पेपर में, रक्त संग्रह के लिए डिज़ाइन की गई लचीली जांच के माध्यम से नॉनइनवेसिव माइक्रोडायलिसिस तकनीक द्वारा चूहे के दिल के रक्त को गतिशील रूप से और लगातार अधिग्रहित किया गया था।

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Protocol

पशु प्रोटोकॉल को चेंगदू यूनिवर्सिटी ऑफ ट्रेडिशनल चाइनीज मेडिसिन (रिकॉर्ड संख्या: 2021-11) की प्रशासनिक समिति द्वारा अनुमोदित किया गया है। निर्दिष्ट रोगज़नक़-मुक्त नर स्प्राग डॉवले (एसडी) चूहों (8-10 सप्ताह, 260-300 ग्राम) को स्वतंत्र वेंटिलेशन पिंजरों में उठाया गया था, प्रयोगशाला के वातावरण को 22 डिग्री सेल्सियस और 65% सापेक्ष आर्द्रता पर बनाए रखा गया था, और वर्तमान अध्ययन के लिए उपयोग किया गया था। जानवरों को एक वाणिज्यिक स्रोत से प्राप्त किया गया था ( सामग्री की तालिका देखें)। सभी चूहों को अवधि के दौरान मुफ्त पानी और आहार के साथ 1 सप्ताह के लिए अनुकूली भोजन की आदत थी।

1. प्रयोगात्मक तैयारी

  1. रक्त के नमूने के माइक्रोडायलिसिस में शामिल उपकरणों को इकट्ठा करें ( सामग्री की तालिका देखें), जैसा कि चित्र 1 में दिखाया गया है।
  2. माइक्रोडायलिसिस रक्त संग्रह के लिए छिड़काव तरल पदार्थ के रूप में एंटी-कोगुलेंट साइट्रेट डेक्सट्रोज समाधान (एसीडी) तैयार करें, जिसमें 3.50 mmol / L साइट्रेट, 7.50 mmol / L सोडियम साइट्रेट और 13.60 mmol / L ग्लूकोज होते हैं ( सामग्री की तालिका देखें)।
  3. उपयोग करने से पहले, एसीडी को 0.22 μm झिल्ली निस्पंदन इकाई के साथ फ़िल्टर करें और बुलबुले को अल्ट्रासोनिक रूप से हटा दें। एसडी चूहों के लिए उत्तेजना को कम करने के लिए एसीडी को 37 डिग्री सेल्सियस पर रखें।

2. माइक्रोडायलिसिस पाइपिंग सिस्टम का पैटेंसी निरीक्षण

  1. सिरिंज सुई, ट्यूबिंग एडाप्टर और फेप ट्यूबिंग के साथ डायलिसिस यूनिट की जांच के इनलेट को संलग्न करें ( सामग्री की तालिका देखें)।
    नोट: माइक्रोडायलिसिस जांच का नीला अंत द्रव प्रवाह के लिए है, और पारदर्शी अंत द्रव बहिर्वाह के लिए है।
  2. 2 μL / min की गति से पाइपिंग सिस्टम में ACD18 को शामिल करके माइक्रोडायलिसिस पाइपिंग सिस्टम की पैटेंसी की जांच करें।
    नोट: यदि नमूना संग्रह साइट से एसीडी प्रवाहित होते हैं, तो आगे कार्डियक रक्त संग्रह के लिए बेरोकटोक माइक्रोडायलिसिस सिस्टम का उपयोग किया जा सकता है। यदि नहीं, तो टूटे हुए रिसाव के लिए रक्त जांच की जानी चाहिए या क्या पाइप-पाइप जोड़ को सील किया गया था।

3. माइक्रोडायलिसिस जांच आरोपण

  1. 0.6 एल / मिनट के वायु-ऑक्सीजन मिश्रण में 2% आइसोफ्लुरेन के साथ चूहों को एनेस्थेटाइज करें, ऑपरेटिंग टेबल पर पूरी तरह से बेहोश चूहों को बांधें, और पशु तापमान रखरखावकर्ता का उपयोग करके शरीर के तापमान को 37 डिग्री सेल्सियस पर बनाए रखें ( सामग्री की तालिका देखें)।
  2. इलेक्ट्रिक शेवर के साथ गर्दन से फर को हटा दें और बीटाडीन और 70% अल्कोहल के तीन वैकल्पिक राउंड के साथ सर्जिकल साइट को कीटाणुरहित करें। चूहे में बुपिवैकेन (1.5 मिलीग्राम / किग्रा) इंजेक्ट करें। गर्दन की मध्य रेखा के साथ 1.5 सेमी चीरा के माध्यम से नरम ऊतक और पेरिवास्कुलर प्रावरणी के कुंद विच्छेदन द्वारा दाहिने जुगुलर नस को उजागर करें।
    नोट: प्रयोग में उपयोग किए जाने वाले सभी सर्जिकल उपकरणों और उपकरणों को ऑटोक्लेविंग द्वारा अग्रिम रूप से निष्फल किया जाना चाहिए। बाँझ दस्ताने और सर्जिकल ड्रेप का उपयोग करें। पूरे प्रयोगात्मक ऑपरेशन को बाँझ वातावरण में किया जाना चाहिए। संज्ञाहरण और एनाल्जेसिया आहार के लिए स्थानीय पशु उपयोग दिशानिर्देशों का पालन करें।
  3. अस्थायी रूप से रक्त प्रवाह को अवरुद्ध करने के लिए हृदय के बाहर के छोर पर दाहिने जुगुलर नस में 4-0 सर्जिकल सीवन का उपयोग करके एक डिटैचेबल स्लिपनॉट बनाएं, और हृदय के पास दाईं जुगुलर नस में 1.5 सेमी चीरा लगाएं।
  4. चूहे के दिल के समीपस्थ छोर की ओर दाईं जुगुलर नस में एक सुई के आकार का कैथेटर स्टाइल (लंबाई 25 मिमी, व्यास 0.7 मिमी, सामग्री की तालिका देखें) डालें, कैथेटर में रक्त माइक्रोडायलिसिस जांच (कुल जांच लंबाई 24 मिमी, झिल्ली की लंबाई 10 मिमी) डालें, और कैथेटर स्टाइल19 के तिरछे चीरे के साथ नेत्र बल के साथ जांच प्रत्यारोपित करें।
  5. निर्देशित कैथेटर स्टाइल को हटा दें और जांच की अर्ध-पारगम्य झिल्ली (झिल्ली की लंबाई 10 मिमी, झिल्ली व्यास 0.5 मिमी) को दाईं जुगुलर नस में पूरी तरह से डुबो दें। दाहिने जुगुलर नस में रक्त के प्रवाह को बहाल करने के लिए हृदय के बाहर के छोर पर डिटैचेबल स्लिपनॉट को उजागर करें।
  6. 4-0 सर्जिकल सीवन का उपयोग करके जांच को दाहिने जुगुलर नस के साथ लपेटें और गर्दन के पीछे के माध्यम से जांच पूंछ ट्यूब को पिरोएं। विशिष्ट जांच आरोपण चरणों के लिए चित्रा 2 देखें।
    नोट: इस अध्ययन में उपयोग किए गए रक्त माइक्रोडायलिसिस जांच द्वारा आणविक कट-ऑफ >20 केडी है। एकत्र किए गए रक्त के नमूनों में 20 केडी से कम आणविक भार वाले पदार्थ होते हैं।

4. माइक्रोडायलिसिस नमूनाकरण

  1. माइक्रोडायलिसिस जांच आरोपण के एक सप्ताह बाद, सर्जिकल आघात से उबरने वाले चूहों को माइक्रोडायलिसिस नमूने से गुजरना पड़ता है। जागृत चूहे को एक मुक्त-चलती टैंक में रखें ( सामग्री की तालिका देखें) और जांच को माइक्रोडायलिसिस सिस्टम से कनेक्ट करें। 1 घंटे के लिए 2 μL / min की दर से ACD की सिंचाई करके जांच डायलिसिस झिल्ली को बराबर करें।
  2. माइक्रोडायलिसिस रक्त के नमूने 2 μL / min की प्रवाह दर पर एकत्र करें और अस्थायी रूप से उन्हें 4 डिग्री सेल्सियस आंशिक कंटेनर में रखें।
    नोट: प्राप्त रक्त के नमूनों को कमरे के तापमान पर 10 मिनट के लिए 20,000 x g पर सेंट्रीफ्यूजिंग करके सीधे परीक्षण किया जा सकता है। या इसे निम्नलिखित परीक्षण के लिए -80 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहीत किया जा सकता है। नमूने एकत्र करते समय, यह देखना हमेशा महत्वपूर्ण होता है कि जांच प्रोलैप्स और / या लीक होती है या नहीं।

5. पोस्ट-सैंपलिंग ऑपरेशन

  1. 0.6 एल / मिनट पर वायु-ऑक्सीजन मिश्रण में 2% आइसोफ्लुरेन के साथ एसडी चूहों को एनेस्थेटाइज करें।
  2. पुन: पुष्टि करने के लिए विच्छेदन करें कि जांच सही जुगुलर नस में है। माइक्रोडायलिसिस जांच को दाहिने जुगुलर नस से हटा दें और इसे अल्ट्राप्योर पानी में डालें।
  3. अंत में, चूहों को 5% आइसोफ्लुरेन की साँस द्वारा इच्छामृत्यु करें।
  4. प्रोब को पाइपलाइन से कनेक्ट करें और पाइप और प्रोब में अवशिष्ट नमक को पूरी तरह से धोने के लिए अल्ट्राप्योर पानी के साथ 2 μL / min की दर से रात भर कुल्ला करें।
  5. जांच को निकालें और इसे अल्ट्राप्योर पानी में भिगो दें। जांच डायलिसिस झिल्ली को सिकुड़ने से रोकने के लिए 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें।
    नोट: यदि डायलिसिस द्रव की मात्रा छिड़काव तरल पदार्थ की मात्रा के साथ असंगत है, तो जांच को कोगुलेटेड रक्त द्वारा अवरुद्ध किया जा सकता है। जांच को अग्नाशयी प्रोटीन समाधान में रखा जा सकता है जब तक कि दिखाई देने वाला पदार्थ जांच झिल्ली के सिरे से बंद न हो जाए।

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Representative Results

वर्तमान प्रोटोकॉल ने माइक्रोडायलिसिस उपकरण में निर्धारित नमूना मापदंडों के अनुसार जागरूक चूहों से कार्डियक रक्त प्राप्त करने की अनुमति दी। सामान्य रक्त के नमूने चमकीले लाल होने चाहिए, जबकि हाइपोक्सिया, संभावित रक्त के थक्के, या एनीमिक रोग वाले जानवरों में गहरे बैंगनी या गहरे लाल रंग हो सकते हैं। रक्त माइक्रोडायलिसिस तकनीक के माध्यम से प्राप्त नमूने रंगहीन, स्पष्ट और पारदर्शी होते हैं, जिनका उपयोग विभिन्न बीमारियों के सीरम मार्करों और उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी या मास स्पेक्ट्रोमेट्री को नियोजित करके दवाओं और उनके मेटाबोलाइट्स के रक्त वितरण का विश्लेषण करने के लिए किया जा सकता है। पैरामीटर सेट और एकत्र किए गए एकल रक्त की मात्रा तालिका 1 में दिखाई गई है।

Figure 1
चित्र 1: रक्त माइक्रोडायलिसिस में आवश्यक उपकरण और उपकरण। () पशु संज्ञाहरण प्रणाली। (बी) सर्जिकल उपकरण। (सी) ऑपरेटिंग टेबल। (डी) नमूना संग्रह ट्यूब। () रक्त माइक्रोडायलिसिस जांच, कैथेटर और सिरिंज सुई। (एफ) माइक्रोइंजेक्शन पंप। (जी) माइक्रोइंजेक्शन सिरिंज। (एच) विट्रो स्टैंड में माइक्रोडायलिसिस जांच। (I) चूहों के लिए फ्री-मूविंग टैंक। (जे) प्रशीतित अंश कलेक्टर। (के) चूहे से पूरे रक्त का नमूना और माइक्रोडायलिसिस-एडेड रक्त का नमूना। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहां क्लिक करें।

Figure 2
चित्र 2: चूहे की दाहिनी आंतरिक जुगुलर नस में प्रत्यारोपित रक्त माइक्रोडायलिसिस जांच का योजनाबद्ध चित्रण। कृपया इस आंकड़े के बड़े संस्करण को देखने के लिए यहां क्लिक करें।

पैरामीटर मूल्य
छिड़काव दर 2 μL/min
नमूनाकरण दर 2 μL/min
नमूना तापमान 4 °C
एकल रक्त संग्रह की मात्रा 12 μL

तालिका 1: माइक्रोडायलिसिस रक्त नमूना प्रणाली के पैरामीटर सेट करें।

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Discussion

सीवीडी चीन में धीरे-धीरे बढ़ती घटनाओं के साथ क्लीनिकों में एक आम पुरानी बीमारी है, और शुरुआत की उम्र कम हो जाती है, जिससे अधिकांश रोगियों की चिंता और आतंकहोता है 20,21। दुनिया में मृत्यु का प्रमुख कारण होने के नाते, सीवीडी सेरेब्रल रोधगलन और अन्य उच्च मृत्यु दर रोगों को प्रेरित कर सकता है, जिससे रोगियों के स्वस्थ जीवन को गंभीर खतराहो सकता है। इस्केमिक हृदय रोग, कार्डियोमायोपैथी, एथेरोस्क्लेरोसिस, उच्च रक्तचाप, स्ट्रोक और दिल की विफलता सहित सीवीडी तब होता है जब हृदय को रक्त की आपूर्ति करने वाली धमनियां संकीर्ण या कठोरहो जाती हैं। हालांकि सीवीडी का निदान करने के लिए कई उपाय मौजूद हैं, फिर भी रक्त परीक्षण सबसे सुविधाजनक और सबसे तेज़ है। सटीक रूप से, सीवीडी से संबंधित प्रारंभिक मार्करों का संवेदनशील और तेजी से निर्धारण रोग की पैथोफिजियोलॉजिकल स्थिति का जल्दी से निदान और समझ सकता है। इसलिए, सीवीडी वाले रोगियों की बढ़ती नैदानिक आवश्यकताओं को उच्च गुणवत्ता वाले और प्रतिनिधि रक्त के नमूने एकत्र करने की आवश्यकता होतीहै। पशु प्रयोगों में आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले रक्त संग्रह विधियों में पूंछ काटना, पूंछ की नस, आंतरिक कैंथस, पेट की महाधमनी, सबलिंगुअल नस, कैरोटिड धमनीशिरापरक, डिकैपिटेशन, सिरिंज कार्डियक अधिग्रहण और ऊरु धमनीशिरापरक रक्त नमूनाकरण शामिलहैं। विवो दवा विश्लेषण में पारंपरिक रक्त नमूनाकरण सबसे अधिक इस्तेमाल किया जाने वाला नमूना विधि है। हालांकि, जटिल रक्त संरचना और कई अंतर्जात गड़बड़ी के कारण, पृथक्करण और शुद्धिकरण प्रक्रिया कॉकामेमी और थकाऊ है,इस प्रक्रिया में दवा के नुकसान और संदूषण की संभावना के साथ। पशु नैतिकता की आवश्यकताओं पर विचार करने के अलावा, बड़े ऊतक क्षति के साथ दीर्घकालिक रक्त संग्रह भी जानवर की मृत्यु का कारण बन सकता है और संकेतक28 के परीक्षण परिणामों को गुमराह कर सकता है। इसके साथ ही, उच्च गुणवत्ता वाले और स्वीकार्य रक्त के नमूने भी पशु रक्त में जातीय जड़ी-बूटियों से प्राप्त सक्रिय अवयवों में गतिशील परिवर्तनों के गुणात्मक और मात्रात्मक पहचान सुनिश्चित करने में निर्णायक हैं।

इस अध्ययन में उपयोग की जाने वाली माइक्रोडायलिसिस नमूना तकनीक पिछले 20 वर्षों में विकसित एक नई बायोप्सी नमूना तकनीक है और धीरे-धीरे जातीय हर्बल चिकित्सा29 के औषधीय अध्ययनों में लागू की जा रही है। रक्त माइक्रोडायलिसिस के लिए, यह एक चयनात्मक पारगम्य झिल्ली है जो शरीर के तरल पदार्थ को खोए बिना व्यक्तिगत जानवर से बड़ी मात्रा में नमूने प्राप्त कर सकती है। और अधिक विशेष रूप से, माइक्रोडायलिसिस-आधारित रक्त नमूना करण तकनीक शरीर के तरल पदार्थ के गतिशील संतुलन को बनाए रखती है, पारंपरिक रक्त संग्रह प्रौद्योगिकियों के कारण कम रक्त प्रवाह की समस्या से बचती है, और परीक्षण परिणामों30,31 पर दवा वितरण के प्रभाव को समाप्त करती है। यह उल्लेख किया जाना चाहिए कि ऑनलाइन माइक्रोडायलिसिस द्वारा रक्त अधिग्रहण लक्ष्य स्थलों32,33 पर जागरूक जानवरों में रक्त दवा एकाग्रता का वास्तविक समय का पता लगाने को प्राप्त करता है, जो विशेष रूप से गहरे ऊतकों और महत्वपूर्ण अंगों के विवो अध्ययन के लिए उपयुक्त है। माइक्रोडायलिसिस तकनीक के तेजी से परिपक्व अनुप्रयोग के साथ, नए ऊतक-विशिष्ट जांच का उद्भव धीरे-धीरे मस्तिष्क में एक ही साइट की प्रारंभिक पहचान से लेकर यकृत, त्वचा / त्वचा फ्लैप, कंकाल की मांसपेशी और आंख जैसे कई साइटों तक विकसित हुआ है, जो कई ऊतकों और अंगों में जातीय जड़ी बूटियों की औषधीय कार्रवाई की जांच का विस्तार करताहै34.

यद्यपि पारंपरिक नमूना करण तकनीक की तुलना में माइक्रोडायलिसिस नमूना करण तकनीक के अपने अनूठे फायदे हैं, लेकिन इसकी अपनी सीमाएं भीहैं। सबसे पहले, माइक्रोडायलिसिस सभी पदार्थों के नमूना संग्रह के लिए उपयुक्त नहीं है, जैसे कि प्रोटीन बायोमैक्रोमोलेक्यूल्स और ड्रग्स का पता लगाना जो अपरिवर्तनीय रूप से अर्ध-पारगम्य झिल्ली से बंध सकते हैं। दूसरे, जांच विशेषताओं, परफ्यूसेट गुण, और जांच आरोपण ऑपरेशन जांच के रीसाइक्लिंग और पुन: उपयोग को सीमित करते हैं। तीसरा, महंगी जांच और ऑनलाइन संयुक्त उपकरणों की उच्च लागत ने माइक्रोडायलिसिस तकनीक के उपयोग को कुछ हद तक सीमित कर दिया है। अंत में, माइक्रोडायलिसिस तकनीक का अनुप्रयोग निस्संदेह सीवीडी की खोज में जातीय चिकित्सा को बढ़ावा देने में एक बड़ी भूमिका निभाएगा।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए कुछ भी नहीं है।

Acknowledgments

इस काम को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (82104533), चीन पोस्टडॉक्टरल साइंस फाउंडेशन (2020एम683273), सिचुआन प्रांत के विज्ञान और प्रौद्योगिकी विभाग (2021वाईजे0175) और सिचुआन प्रांतीय विज्ञान और प्रौद्योगिकी योजना (2022वाईएफएस0438) की प्रमुख आर एंड डी परियोजना द्वारा समर्थित किया गया था। इस बीच, लेखक ट्राई-एंजेल्स डी एंड एच ट्रेडिंग पीटीई में एक वरिष्ठ उपकरण इंजीनियर श्री युनचेंग होंग को धन्यवाद देना चाहते हैं। लिमिटेड (सिंगापुर शहर, सिंगापुर), माइक्रोडायलिसिस तकनीकों के लिए तकनीकी सेवाएं प्रदान करने के लिए।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Animal anesthesia system Rayward Life Technology Co., Ltd R500IE
Animal temperature maintainer Rayward Life Technology Co., Ltd 69020
Blood microdialysis probe  CMA Microdialysis AB T55347
Catheter  CMA Microdialysis AB T55347
Citrate Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd 251275
Electric shaver Rayward Life Technology Co., Ltd CP-5200
Fep tubing  CMA Microdialysis AB 3409501
Free movement tank for animals  CMA Microdialysis AB CMA120
Glucose Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd G8270
Hemostatic forceps Rayward Life Technology Co., Ltd F21020-16
Isofluran Rayward Life Technology Co., Ltd R510-22
Micro scissors Beyotime Biotechnology Co., Ltd FS221
Microdialysis collection tube  CMA Microdialysis AB 7431100
Microdialysis collector  CMA Microdialysis AB CMA4004
Microdialysis in vitro stand  CMA Microdialysis AB CMA130
Microdialysis microinjection pump  CMA Microdialysis AB 788130
Microdialysis syringe (1.0 mL)  CMA Microdialysis AB 8309020
Microdialysis tubing adapter  CMA Microdialysis AB 3409500
Microporous filter membrane Merck Millipore Ltd. R0DB36622
Non-absorbable surgical sutures Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd S19004
Operating table Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd 30153
Ophthalmic forceps Rayward Life Technology Co., Ltd F12016-15
Sodium citrate Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd 1613859
Sprague Dawley  (SD) rats Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd SYXK(Equation 1)2019-049
Surgical scissors Rayward Life Technology Co., Ltd S14014-15
Surgical scissors Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd BY-103
Syringe needle  CMA Microdialysis AB T55347
Ultrasonic cleaner Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd KMH1-240W8101

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References

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चिकित्सा अंक 187
नॉनइनवेसिव माइक्रोडायलिसिस तकनीक के <em>माध्यम</em> से चूहे के दिल से गतिशील निरंतर रक्त निष्कर्षण
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Hou, Y., Bai, J., Zhang, Y., Meng,More

Hou, Y., Bai, J., Zhang, Y., Meng, X., Zhang, S., Wang, X. Dynamic Continuous Blood Extraction from Rat Heart via Noninvasive Microdialysis Technique. J. Vis. Exp. (187), e64531, doi:10.3791/64531 (2022).

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