Summary
הפרוטוקול הנוכחי מתאר שיטה פשוטה ויעילה לאיסוף בזמן אמת ודינמי של דם לב חולדה באמצעות טכניקת המיקרודיאליזה.
Abstract
לניתוח דינמי של מרכיבי הדם חשיבות רבה בהבנת מחלות לב וכלי דם והמחלות הקשורות אליהן, כגון אוטם שריר הלב, הפרעות קצב, טרשת עורקים, בצקת ריאות קרדיוגנית, תסחיף ריאתי ותסחיף מוחי. יחד עם זאת, דחוף לפרוץ את טכניקת דגימת הדם המתמשכת בלב בחולדות חיות כדי להעריך את היעילות של טיפול ייחודי ברפואה אתנית. במחקר זה הושתלה בדיקת מיקרודיאליזה בדם בווריד הצוואר הימני של חולדות בהליך כירורגי מדויק ולא פולשני. דגימות דם לבביות נאספו בקצב של 2.87 nL/min עד 2.98 mL/min על ידי חיבור למערכת מקוונת לאיסוף דגימות מיקרודיאליזה. חשוב מכך, דגימות הדם שנרכשו יכולות להיות מאוחסנות באופן זמני במיכלי מיקרודיאליזה ב -4 מעלות צלזיוס. תוכנית איסוף הדם הרציפה המקוונת מבוססת המיקרודיזה מלב חולדה הבטיחה מאוד את איכות דגימות הדם, קידמה והמריצה את הרציונליות המדעית של המחקר על מחלות לב וכלי דם מערכתיות והערכת טיפול אתנו-רפואי מנקודת מבט של המטולוגיה.
Introduction
עם האצת קצב החיים ועליית הלחץ הפסיכולוגי, מחלות לב וכלי דם (CVD) נוטות להתרחש אצל צעירים, בגיל העמידה וקשישים 1,2. התחלואה והתמותה של מחלות לב וכלי דם גבוהות, עם מאפיינים של התפרצות חריפה, התקדמות מהירה ומהלך ארוך של המחלה, המשפיעים קשות על בטיחות החולים3. המופע של CVD עשוי להיות קשור קשר הדוק לשינויים בחלק מרכיבי הדם, כגון כולסטרול, שומנים בסרום, גלוקוז בדם, אנזימי שריר הלב וחלבון קינאז K 4,5,6. ניתן לנהל את המצב הרלוונטי של המטופל במהירות הרבה ביותר על ידי ניתוח פריטי בדיקת דם שגרתיים. לפיכך, איכות דגימות הדם קובעת את דיוק תוצאות הבדיקה. עם זאת, לשיטות קונבנציונליות לאיסוף דם יש כמה חסרונות בלתי נמנעים, המשפיעים באופן חמור על תוצאות הניסוי, כגון שטח טראומה גדול, נפח איסוף דם קטן, דרישות גבוהות למפעילים, חוסר יכולת לשקף שינויים בתרופות בזמן אמת, טיפול מקדים מסורבל בדגימות דם, צריכה גדולה של חיות ניסוי ואי עמידה בדרישות אתיות של בעלי חיים 7,8,9 . עם התקדמות מתמשכת בטכנולוגיה רפואית, איכות איסוף הדם הציבה גם דרישות גבוהות יותר. לכן, דחוף לפתח טכנולוגיית דגימת דם חדשה כדי להתגבר על החסרונות לעיל.
מיקרודיאליזה היא טכניקת דגימה in vivo המבוססת על עקרונות הדיאליזה10. בתנאים שאינם שווי משקל, התרכובות הנמדדות מפוזרות ומחוררות מהרקמה לאורך שיפוע הריכוז אל תוך בדיקת המיקרודיאליזה המוטמעת ברקמה לתוך הדיאליזה, אשר מוסרת ברציפות יחד עם הדיאליזה, ומשיגה את מטרת הדגימה מהרקמה החיה11,12. בהשוואה לשיטות הדגימה המסורתיות, לטכניקת המיקרודיאליזה יתרונות נפלאים בהיבטים הבאים13,14,15: מעקב רציף בזמן אמת אחר שינויים של תרכובות שונות בדם; הדגימה אינה דורשת עיבוד מקדים מייגע ויכולה לייצג באמת את ריכוז תרכובת המטרה באתר הדגימה; בדיקות ניתן להשתיל בחלקים שונים של הגוף כדי לחקור את הספיגה, ההפצה, חילוף החומרים, ההפרשה והרעילות של תרכובות המטרה; הדגימה שנרכשה אינה מכילה מקרומולקולות ביולוגיות (>20 kD). לכן, דגימות הדם האיכותיות יותר מבטיחות פרשנות טובה יותר של CVD והמנגנון המטופל על ידי הרפואה האתנית.
מערכות דיגום מיקרודיאליזה מורכבות בדרך כלל ממשאבות מיקרו-הזרקה, צינורות חיבור, מיכלי תנועה ללא בעלי חיים, בדיקות מיקרודיאליזה ואוספי דגימות16. כחלק הקריטי ביותר במכשיר של מערכת המיקרודיאליזה, בדיקות מיקרודיאליזה נפוצות כוללות בדיקות קונצנטריות, בדיקות גמישות, בדיקות ליניאריות ובדיקות שאנט17. בין אלה, בדיקות גמישות הן בדיקות רכות ולא מתכתיות, המשמשות בעיקר לאיסוף דגימות מכלי דם ורקמות היקפיות כגון לב, שרירים, עור ושומן של בעלי חיים ערים ונעים בחופשיות או מורדמים13. כאשר במגע עם כלי דם או רקמות, הבדיקה יכולה להיות כפופה גמישה, ובכך למנוע נזק בלתי הפיך לבדיקה או לאתר הדגימה. עם ההתפתחות המתמשכת של טכנולוגיית הגשוש, מעמיק גם היישום של טכנולוגיית מיקרודיאליזה בתחומים שונים. במאמר זה, דם לב החולדה נרכש באופן דינמי ורציף על ידי טכנולוגיית המיקרודיאליזה הלא פולשנית באמצעות בדיקה גמישה המיועדת לאיסוף דם.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
פרוטוקול בעלי החיים אושר על ידי הוועדה המנהלית של אוניברסיטת צ'נגדו לרפואה סינית מסורתית (מספר שיא: 2021-11). חולדות Sprague Dawley (SD) זכרים מוגדרים נטולי פתוגן (8-10 שבועות, 260-300 גרם) גודלו בכלובי אוורור עצמאיים, תוך שמירה על סביבת המעבדה בטמפרטורה של 22 מעלות צלזיוס ולחות יחסית של 65%, ושימשו במחקר הנוכחי. בעלי החיים התקבלו ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים). כל החולדות הורגלו להאכלה אדפטיבית במשך שבוע אחד עם מים ותזונה בחינם במהלך התקופה.
1. הכנה ניסיונית
- הרכיבו את הציוד המעורב במיקרודיאליזה של דגימת דם (ראו טבלת חומרים), כפי שמוצג באיור 1.
- הכינו תמיסת דקסטרוז ציטראט נוגדת קרישה (ACDs), המכילה 3.50 mmol / L של ציטראט, 7.50 mmol / L של נתרן ציטראט, ו 13.60 mmol / L של גלוקוז, כנוזל זילוח לאיסוף דם מיקרודיאליזה (ראה טבלה של חומרים).
- לפני השימוש, סנן את ACDs עם יחידת סינון קרום 0.22 מיקרומטר והסר בועות אולטרה-סאונד. שמור ACDs על 37 ° C כדי להפחית את הגירוי עבור חולדות SD.
2. בדיקת פטנט של מערכת צנרת מיקרודיאליזה
- חבר את פתח הבדיקה של יחידת הדיאליזה עם מחט המזרק, מתאם הצינור וצינור ה- fep (ראה טבלת חומרים).
הערה: הקצה הכחול של בדיקת המיקרודיאליזה מיועד לזרימת הנוזלים, והקצה השקוף מיועד לזרימת הנוזלים. - בדוק את הפטנט של מערכת צנרת המיקרודיאליזה על ידי החדרת ACDs18 למערכת הצנרת במהירות של 2 μL/min.
הערה: אם ACDs זורמים מאתר איסוף הדגימות, ניתן להשתמש במערכת המיקרודיאליזה ללא הפרעה לאיסוף דם לבבי נוסף. אם לא, יש לבדוק את בדיקת הדם לאיתור נזילות שבורות או האם מפרק הצינור נאטם.
3. השתלת בדיקת מיקרודיאליזה
- הרדימו את החולדות עם איזופלורן 2% בתערובת אוויר-חמצן של 0.6 ליטר/דקה, הדקו את החולדות חסרות ההכרה לחלוטין על שולחן הניתוחים, ושמרו על טמפרטורת הגוף ב-37°C באמצעות שומר טמפרטורה של בעלי חיים (ראו טבלת חומרים).
- הסר את הפרווה מהצוואר עם מכונת גילוח חשמלית וחטא את אתר הניתוח עם שלושה סיבובים לסירוגין של בטדין ו 70% אלכוהול. הזריקו bupivacaine (1.5 מ"ג/ק"ג) לתוך החולדה. יש לחשוף את וריד הצוואר הימני על ידי דיסקציה קהה של רקמות רכות ופאשיה פריווסקולרית דרך חתך של 1.5 ס"מ לאורך קו האמצע של הצוואר.
הערה: יש לעקר מראש את כל כלי הניתוח והכלים המשמשים בניסוי על ידי אוטוקלאבינג. השתמשו בכפפות סטריליות ובווילונות כירורגיים. כל פעולת הניסוי צריכה להתבצע בסביבה סטרילית. יש לעקוב אחר ההנחיות המקומיות לשימוש בבעלי חיים למשטר הרדמה ושיכוך כאבים. - בצע החלקה ניתקת באמצעות תפר כירורגי 4-0 בווריד הצוואר הימני בקצה הדיסטלי של הלב כדי לחסום זמנית את זרימת הדם, ולבצע חתך של 1.5 ס"מ בווריד הצוואר הימני ליד הלב.
- יש להחדיר צנתר סטיילט בצורת מחט (אורך 25 מ"מ, קוטר 0.7 מ"מ, ראו טבלת חומרים) לווריד הצוואר הימני לכיוון הקצה הפרוקסימלי של לב החולדה, להחדיר את בדיקת הדם למיקרודיאליזה (אורך בדיקה כולל 24 מ"מ, אורך קרום 10 מ"מ) בצנתר, ולהשתיל את הבדיקה במלקחיים אופתלמיים לאורך החתך האלכסוני של הצנתר סטיילט19.
- הסר את סטילט הצנתר המודרך וטבול באופן מלא את הקרום החדיר למחצה של הבדיקה (אורך הממברנה 10 מ"מ, קוטר הממברנה 0.5 מ"מ) בווריד הצוואר הימני. לפרום את החלקה הננתקת בקצה הדיסטלי של הלב כדי להחזיר את זרימת הדם בווריד הצוואר הימני.
- קשרו את הבדיקה עם וריד הג'וגולרי הימני באמצעות תפרים כירורגיים 4-0 והשחילו תת עורית את צינור זנב הבדיקה דרך החלק האחורי של הצוואר. ראו איור 2 לשלבי השתלת בדיקה ספציפיים.
הערה: החתך המולקולרי על ידי בדיקת מיקרודיאליזה בדם המשמש במחקר זה הוא >20 kD. דגימות הדם שנאספו מכילות חומרים בעלי משקל מולקולרי של פחות מ -20 kD.
4. דגימת מיקרודיאליזה
- שבוע לאחר השתלת בדיקת המיקרודיאליזה, חולדות המתאוששות מטראומה כירורגית עוברות דגימת מיקרודיאליזה. הכניסו את החולדה העירה למכל הנע בחופשיות (ראו טבלת חומרים) וחברו את הגשושית למערכת המיקרודיאליזה. אזנו את קרום הדיאליזה של הבדיקה על ידי השקיית ACDs בקצב של 2 מיקרוליטר/דקה למשך שעה אחת.
- יש לאסוף דגימות דם של מיקרודיאליזה בקצב זרימה של 2 μL/min ולשמור אותן באופן זמני במיכל חלקי של 4°C.
הערה: דגימות הדם המתקבלות יכולות להיבדק ישירות על ידי צנטריפוגה ב 20,000 x גרם במשך 10 דקות בטמפרטורת החדר. או שניתן לאחסן אותו ב -80 מעלות צלזיוס לבדיקות הבאות. בעת איסוף דגימות, חשוב תמיד לבחון האם הבדיקה צונחת ו / או דולפת החוצה.
5. פעולה לאחר הדגימה
- הרדימו את חולדות SD עם 2% איזופלורן בתערובת אוויר-חמצן ב-0.6 ליטר/דקה.
- לנתח כדי לאשר מחדש כי הבדיקה היא בווריד הצוואר הימני. הסר את בדיקת מיקרודיאליזה מן הווריד הצווארי הימני ולשים אותו לתוך מים טהורים במיוחד.
- לבסוף, להרדים את החולדות על ידי שאיפה של 5% isoflurane.
- חבר את הגשושית לצנרת ושטוף במשך הלילה בקצב של 2 מיקרוליטר/דקה במים טהורים במיוחד כדי לשטוף לחלוטין את שאריות המלח בצינור ובבדיקה.
- הסר את הבדיקה והשרה אותה במים טהורים במיוחד. יש לאחסן בטמפרטורה של 4°C כדי למנוע התכווצות של קרום הדיאליזה של הבדיקה.
הערה: אם נפח נוזל הדיאליזה אינו תואם את נפח נוזל הזילוח, הבדיקה עלולה להיחסם על ידי דם קרוש. ניתן למקם את הבדיקה בתמיסת חלבון הלבלב עד שהחומר הנראה מתקלקל מקצה קרום הבדיקה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
הפרוטוקול הנוכחי איפשר קבלת דם לב מחולדות בהכרה על פי פרמטרי הדגימה שנקבעו בציוד המיקרודיאליזה. דגימות דם רגילות חייבות להיות אדומות בוהקות, בעוד שבעלי חיים עם היפוקסיה, קרישי דם פוטנציאליים או מחלה אנמית עשויים להיות סגולים כהים או אדומים כהים. דגימות המתקבלות באמצעות טכניקת מיקרודיאליזה בדם הן חסרות צבע, ברורות ושקופות, אשר ניתן להשתמש בהן כדי לנתח את הסמנים בסרום של מחלות שונות ואת התפלגות הדם של תרופות ואת המטבוליטים שלהם על ידי שימוש כרומטוגרפיה נוזלית ביצועים גבוהים או ספקטרומטריית מסה. הפרמטרים שנקבעו ונפח הדם היחיד שנאסף מוצגים בטבלה 1.
איור 1: ציוד ומכשירים הדרושים במיקרו-דיאליזה בדם . (A) מערכת הרדמה של בעלי חיים. (ב) כלי ניתוח. (ג) שולחן ניתוחים. (D) צינור איסוף דגימות. (E) בדיקת מיקרודיאליזה בדם, קטטר ומחט מזרק. (F) משאבת מיקרו-הזרקה. (G) מזרק מיקרו-הזרקה. (H) בדיקת מיקרודיאליזה במבחנה . (I) מכל חופשי לחולדות. (י) אספן שברים בקירור. (K) דגימת דם מלאה ודגימת דם בעזרת מיקרודיאליזה מחולדה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: המחשה סכמטית של בדיקת מיקרודיאליזה בדם שהושתלה בווריד הצוואר הפנימי הימני של חולדה. לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
| פרמטרים | ערך |
| קצב זילוח | 2 μL/דקה |
| קצב הדגימה | 2 μL/דקה |
| טמפרטורת הדגימה | 4 °C |
| נפח איסוף דם יחיד | 12 מיקרוליטר |
טבלה 1: הגדרת פרמטרים של מערכת דגימת דם מיקרודיאליזה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
CVD היא מחלה כרונית נפוצה במרפאות עם שכיחות עולה בהדרגה בסין, וגיל ההתחלה נוטה להיות צעיר יותר, מה שגורם לדאגה ובהלה של רוב החולים20,21. להיות הגורם המוביל למוות בעולם, CVDs יכול לגרום אוטם מוחי ומחלות תמותה גבוהה אחרות, איום רציני על החיים הבריאים של חולים22. מחלות לב וכלי דם, כולל מחלת לב איסכמית, קרדיומיופתיה, טרשת עורקים, לחץ דם גבוה, שבץ ואי ספיקת לב, מתרחשות כאשר העורקים המספקים דם ללב צרים או מתקשים23,24. למרות שקיימים אמצעים רבים לאבחון CVD, בדיקת דם היא עדיין הנוחה והמהירה ביותר. באופן מדויק, קביעה רגישה ומהירה של סמנים מוקדמים הקשורים למחלות לב וכלי דם יכולה לאבחן ולהבין במהירות את המצב הפתופיזיולוגי של המחלה. לכן, הצרכים האבחנתיים ההולכים וגדלים של חולים עם CVD דורשים לאסוף דגימות דם איכותיות ומייצגות25. שיטות איסוף הדם הנפוצות בניסויים בבעלי חיים כוללות חיתוך זנב, וריד זנב, קנטוס פנימי, אבי העורקים הבטן, וריד תת-לשוני, עורקי התרדמה, עריפת ראשים, רכישת לב מזרק ודגימת דם עורקי הירך26. דגימת דם קונבנציונלית היא שיטת הדגימה הנפוצה ביותר לניתוח תרופות in vivo. עם זאת, בשל הרכב הדם המסובך והפרעות אנדוגניות רבות, תהליך ההפרדה והטיהור הוא קוקמי ומייגע, עם אפשרות של אובדן סמים וזיהום בתהליך זה27. בנוסף להתחשבות בדרישות האתיקה של בעלי החיים, איסוף דם ארוך טווח עם נזק גדול יותר לרקמות יכול גם להוביל למוות של בעל החיים ולהטעות תוצאות בדיקה של אינדיקטורים28. במקביל, דגימות דם איכותיות ומקובלות הן גם מכריעות בהבטחת זיהוי איכותי וכמותי של שינויים דינמיים בחומרים פעילים שמקורם בצמחי מרפא אתניים בדם בעלי החיים.
טכניקת דגימת המיקרודיאליזה המשמשת במחקר זה היא טכניקת דגימת ביופסיה חדשה שפותחה ב -20 השנים האחרונות ומיושמת בהדרגה במחקרים הפרמקולוגיים של רפואת צמחים אתנית29. באשר מיקרודיאליזה בדם, זהו קרום חדיר סלקטיבי שיכול ברציפות לרכוש כמויות גדולות של דגימות מן החיה הפרט מבלי לאבד נוזל הגוף. ובעיקר, טכנולוגיית דגימת דם מבוססת מיקרודיאליזה שומרת על האיזון הדינמי של נוזלי הגוף, מונעת את הבעיה של זרימת דם מופחתת הנגרמת על ידי טכנולוגיות איסוף דם מסורתיות, ומבטלת את ההשפעה של הפצת תרופות על תוצאות בדיקות30,31. ראוי לציין כי רכישת הדם על ידי מיקרודיאליזה מקוונת משיגה זיהוי בזמן אמת של ריכוז תרופות הדם בבעלי חיים מודעים באתרי יעד32,33, אשר מתאים במיוחד לחקר in vivo של רקמות עמוקות ואיברים חיוניים. עם היישום הבוגר יותר ויותר של טכנולוגיית מיקרודיאליזה, הופעתן של בדיקות ספציפיות לרקמות חדשות התפתחה בהדרגה מהזיהוי הראשוני של אתר יחיד במוח לאתרים מרובים, כגון הכבד, העור / דש העור, שרירי השלד והעין, אשר מרחיבה את חקירת הפעולה הפרמקולוגית של צמחי מרפא אתניים ברקמות ואיברים מרובים33, 34.
למרות שלטכנולוגיית דגימת מיקרודיאליזה יתרונות ייחודיים בהשוואה לטכנולוגיית הדגימה המסורתית, יש לה גם מגבלות משלה35. ראשית, מיקרודיאליזה אינה מתאימה לאיסוף דגימות של כל החומרים, כגון איתור ביומקרומולקולות חלבונים ותרופות שיכולות להיקשר באופן בלתי הפיך לממברנות חדירות למחצה. שנית, מאפייני הבדיקה, תכונות הפרבוסט ופעולת השתלת הגשושית מגבילים את המיחזור והשימוש החוזר של הגשושים. שלישית, הגשושיות היקרות והעלות הגבוהה של מכשירים משולבים מקוונים הגבילו במידה מסוימת את השימוש בטכנולוגיית מיקרודיאליזה. לסיכום, היישום של טכנולוגיית מיקרודיאליזה ללא ספק ימלא תפקיד עצום בקידום הרפואה האתנית בחקר CVDs.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
למחברים אין מה לחשוף.
Acknowledgments
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82104533), הקרן למדע פוסט-דוקטורט בסין (2020M683273), מחלקת המדע והטכנולוגיה של מחוז סצ'ואן (2021YJ0175) ופרויקט המו"פ המרכזי של תוכנית המדע והטכנולוגיה של מחוז סצ'ואן (2022YFS0438). בינתיים, המחברים רוצים להודות למר יונצ'נג הונג, מהנדס ציוד בכיר ב-TRI-ANGELS D&H TRADING PTE. LTD. (סינגפור סיטי, סינגפור), למתן שירותים טכניים לטכניקות מיקרודיאליזה.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal anesthesia system | Rayward Life Technology Co., Ltd | R500IE | |
| Animal temperature maintainer | Rayward Life Technology Co., Ltd | 69020 | |
| Blood microdialysis probe | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Catheter | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Citrate | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 251275 | |
| Electric shaver | Rayward Life Technology Co., Ltd | CP-5200 | |
| Fep tubing | CMA Microdialysis AB | 3409501 | |
| Free movement tank for animals | CMA Microdialysis AB | CMA120 | |
| Glucose | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | G8270 | |
| Hemostatic forceps | Rayward Life Technology Co., Ltd | F21020-16 | |
| Isofluran | Rayward Life Technology Co., Ltd | R510-22 | |
| Micro scissors | Beyotime Biotechnology Co., Ltd | FS221 | |
| Microdialysis collection tube | CMA Microdialysis AB | 7431100 | |
| Microdialysis collector | CMA Microdialysis AB | CMA4004 | |
| Microdialysis in vitro stand | CMA Microdialysis AB | CMA130 | |
| Microdialysis microinjection pump | CMA Microdialysis AB | 788130 | |
| Microdialysis syringe (1.0 mL) | CMA Microdialysis AB | 8309020 | |
| Microdialysis tubing adapter | CMA Microdialysis AB | 3409500 | |
| Microporous filter membrane | Merck Millipore Ltd. | R0DB36622 | |
| Non-absorbable surgical sutures | Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd | S19004 | |
| Operating table | Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd | 30153 | |
| Ophthalmic forceps | Rayward Life Technology Co., Ltd | F12016-15 | |
| Sodium citrate | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 1613859 | |
| Sprague Dawley (SD) rats | Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd | SYXK( )2019-049 |
|
| Surgical scissors | Rayward Life Technology Co., Ltd | S14014-15 | |
| Surgical scissors | Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd | BY-103 | |
| Syringe needle | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Ultrasonic cleaner | Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd | KMH1-240W8101 |
References
- van Rensburg, W. J. J. Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population. Scientific Reports. 12 (1), 11366 (2022).
- Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L. Cardiovascular disease prevention and management of pre-existent cardiovascular disease in a cohort of prostate cancer survivors. Journal of Cancer Survivorship. , (2022).
- Rødevand, L., Tesli, M., Andreassen, O. A. Cardiovascular disease risk in people with severe mental disorders: an update and call for action. Current Opinion in Psychiatry. 35 (4), 277-284 (2022).
- Izumi, Y., et al. Impact of circulating cathepsin K on the coronary calcification and the clinical outcome in chronic kidney disease patients. Heart and Vessels. 31 (1), 6-14 (2016).
- Wang, K., et al. Whey protein hydrolysate alleviated atherosclerosis and hepatic steatosis by regulating lipid metabolism in apoE-/- mice fed a Western diet. Food Research International. 157, 111419 (2022).
- Angelone, T., Rocca, C., Pasqua, T. Nesfatin-1 in cardiovascular orchestration: From bench to bedside. Pharmacological Research. 156, 104766 (2020).
- Bernardi, P. M., Barreto, F., Dalla Costa, T. Application of a LC-MS/MS method for evaluating lung penetration of tobramycin in rats by microdialysis. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 134, 340-345 (2017).
- Anderzhanova, E., Wotjak, C. T. Brain microdialysis and its applications in experimental neurochemistry. Cell and Tissue Research. 354 (1), 27-39 (2013).
- Joukhadar, C., Müller, M. Microdialysis: current applications in clinical pharmacokinetic studies and its potential role in the future. Clinical Pharmacokinetics. 44 (9), 895-913 (2005).
- Stangler, L. A., et al. Microdialysis and microperfusion electrodes in neurologic disease monitoring. Fluids and Barriers of the CNS. 18 (1), 52 (2021).
- Young, B., et al. Cerebral microdialysis. Critical Care Nursing Clinics of North America. 28 (1), 109-124 (2016).
- O'Connell, M. T., Krejci, J. Microdialysis techniques and microdialysis-based patient-near diagnostics. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 414 (10), 3165-3175 (2022).
- Hammarlund-Udenaes, M. Microdialysis as an important technique in systems pharmacology-a historical and methodological review. The AAPS Journal. 19 (5), 1294-1303 (2017).
- Stahl, M., Bouw, R., Jackson, A., Pay, V. Human microdialysis. Current Pharmaceutical Biotechnology. 3 (2), 165-178 (2002).
- Pierce, C. F., Kwasnicki, A., Lakka, S. S., Engelhard, H. H. Cerebral microdialysis as a tool for assessing the delivery of chemotherapy in brain tumor patients. World Neurosurgery. 145, 187-196 (2021).
- Sørensen, M., Jacobsen, S., Petersen, L. Microdialysis in equine research: a review of clinical and experimental findings. Veterinary Journal. 197 (3), 553-559 (2013).
- Dmitrieva, N., Rodríguez-Malaver, A. J., Pérez, J., Hernández, L. Differential release of neurotransmitters from superficial and deep layers of the dorsal horn in response to acute noxious stimulation and inflammation of the rat paw. European Journal of Pain. 8 (3), 245-252 (2004).
- Li, T., et al. Microdialysis sampling and HPLC-MS/MS quantification of sinomenine, ligustrazine, gabapentin, paracetamol, pregabalin and amitriptyline in rat blood and brain extracellular fluid. Acta Pharmaceutica Sinica. 55 (9), 2198-2206 (2020).
- Chauzy, A., Lamarche, I., Adier, C., Couet, W., Marchand, S. Microdialysis study of Aztreonam-Avibactam distribution in peritoneal fluid and muscle of rats with or without experimental peritonitis. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 62 (10), 01228 (2018).
- Fang, X. X., Ardehali, H., Min, J. X., Wang, F. D. The molecular and metabolic landscape of iron and ferroptosis in cardiovascular disease. Nature Reviews. Cardiology. , 1-17 (2022).
- Samson, R., Ennezat, P. V., Le Jemtel, T. H., Oparil, S. Cardiovascular disease risk reduction and body mass index. Current Hypertension Reports. , (2022).
- Kim, M. H., et al. School racial segregation and long-term cardiovascular health among Black adults in the US: A quasi-experimental study. PLoS Medicine. 19 (6), 1004031 (2022).
- Qin, Y. H., et al. Role of m6A RNA methylation in cardiovascular disease (Review). International Journal of Molecular Medicine. 46 (6), 1958-1972 (2020).
- Xu, C. M., Liu, C. J., Xiong, J. H., Yu, J. Cardiovascular aspects of the (pro)renin receptor: Function and significance. FASEB Journal. 36 (4), 22237 (2022).
- Guvenc-Bayram, G., Yalcin, M. The intermediary role of the central cyclooxygenase / lipoxygenase enzymes in intracerebroventricular injected nesfatin-1-evoked cardiovascular effects in rats. Neuroscience Letters. 756, 135961 (2021).
- Ahrens Kress, A. P., Zhang, Y. D., Kaiser-Vry, A. R., Sauer, M. B. A comparison of blood collection techniques in mice and their effects on welfare. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 61 (3), 287-295 (2022).
- Joshi, A., Patel, H., Joshi, A., Stagni, G. Pharmacokinetic applications of cutaneous microdialysis: Continuous+intermittent vs continuous-only sampling. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 83, 16-20 (2017).
- Reyes-Garcés, N., et al. In vivo brain sampling using a microextraction probe reveals metabolic changes in rodents after deep brain stimulation. Analytical Chemistry. 91 (15), 9875-9884 (2019).
- Kho, C. M., Enche Ab Rahim, S. K., Ahmad, Z. A., Abdullah, N. S. A review on microdialysis calibration methods: the theory and current related efforts. Molecular Neurobiology. 54 (5), 3506-3527 (2017).
- Zhuang, L. N., et al. Theory and application of microdialysis in pharmacokinetic studies. Current Drug Metabolism. 16 (10), 919-931 (2015).
- Zhang, Y. F., Huang, X. X., Zhu, L. X. Metabonomics research strategy based on microdialysis technique. China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (1), 214-220 (2020).
- Carpenter, K. L., Young, A. M., Hutchinson, P. J. Advanced monitoring in traumatic brain injury: microdialysis. Current Opinion in Critical Care. 23 (2), 103-109 (2017).
- Brunner, M., Langer, O. Microdialysis versus other techniques for the clinical assessment of in vivo tissue drug distribution. The AAPS Journal. 8 (2), 263-271 (2006).
- Tettey-Amlalo, R. N., Kanfer, I., Skinner, M. F., Benfeldt, E., Verbeeck, R. K. Application of dermal microdialysis for the evaluation of bioequivalence of a ketoprofen topical gel. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 36 (2-3), 219-225 (2009).
- Dhanani, J. A., et al. Recovery rates of combination antibiotic therapy using in vitro microdialysis simulating in vivo conditions. Journal of Pharmaceutical Analysis. 8 (6), 407-412 (2018).
