Summary
Denne protokollen beskriver en enkel og effektiv metode for sanntids og dynamisk innsamling av rottehjerteblod ved hjelp av mikrodialyseteknikken.
Abstract
Dynamisk analyse av blodkomponenter er av stor betydning for å forstå kardiovaskulære sykdommer og deres relaterte sykdommer, som hjerteinfarkt, arytmi, aterosklerose, kardiogent lungeødem, lungeemboli og cerebral emboli. Samtidig er det presserende å bryte gjennom den kontinuerlige hjerteblodprøveteknikken hos levende rotter for å evaluere effektiviteten av særegen etnisk medisinbehandling. I denne studien ble en blodmikrodialysesonde implantert i høyre vena jugularis hos rotter i et presist og ikke-invasivt kirurgisk inngrep. Hjerteblodprøver ble deretter samlet med en hastighet på 2,87 nL / min til 2,98 ml / min ved å koble til et online mikrodialyseprøveinnsamlingssystem. Enda viktigere er det at de ervervede blodprøvene midlertidig kan lagres i mikrodialysebeholdere ved 4 °C. Det mikrodialysebaserte nettbaserte kontinuerlige blodinnsamlingsprogrammet fra rottehjerte har i stor grad garantert kvaliteten på blodprøver, fremmer og styrker den vitenskapelige rasjonaliteten i forskningen på systemiske kardiovaskulære sykdommer og evaluerer etnomedisinbehandling fra hematologiperspektivet.
Introduction
Med akselerasjonen av tempoet i livet og økningen av psykologisk trykk, har kardiovaskulære sykdommer (CVD) en tendens til å forekomme hos unge, middelaldrende og eldre mennesker 1,2. Sykeligheten og dødeligheten av CVD er høy, med egenskapene til akutt utbrudd, rask progresjon og et langt sykdomsforløp, som alvorlig påvirker pasientens sikkerhet3. Forekomsten av CVD kan være nært knyttet til endringene i noen blodkomponenter, som kolesterol, serumlipider, blodsukker, myokardenzymer og proteinkinase K 4,5,6. Pasientens aktuelle situasjon kan håndteres raskest ved å analysere rutinemessige blodundersøkelseselementer. Derfor bestemmer kvaliteten på blodprøvene nøyaktigheten av testresultatene. Imidlertid har konvensjonelle metoder for blodinnsamling noen uunngåelige ulemper, noe som alvorlig påvirker de eksperimentelle resultatene, for eksempel stort traumeområde, lite blodinnsamlingsvolum, høye krav til operatører, manglende evne til å reflektere narkotikaendringer i sanntid, tungvint blodprøveforbehandling, stort forbruk av forsøksdyr og manglende oppfyllelse av dyreetiske krav 7,8,9 . Med kontinuerlige fremskritt innen medisinsk teknologi har kvaliteten på blodinnsamlingen også stilt høyere krav. Derfor er det presserende å utvikle en ny blodprøveteknologi for å overvinne de ovennevnte manglene.
Mikrodialyse er en in vivo prøvetakingsteknikk basert på dialyseprinsipper10. Under ikke-likevektsforhold blir forbindelsene som skal måles diffundert og perfusert fra vevet langs konsentrasjonsgradienten inn i mikrodialysesonden innebygd i vevet i dialysatet, som kontinuerlig fjernes sammen med dialysatet, og oppnår formålet med prøvetaking fra levende vev11,12. Sammenlignet med tradisjonelle prøvetakingsmetoder har mikrodialyseteknikken fantastiske fordeler i følgende aspekter13,14,15: kontinuerlig sanntidssporing av endringene i forskjellige forbindelser i blod; prøvetaking krever ingen kjedelig forbehandling og kan virkelig representere konsentrasjonen av målforbindelsen på prøvetakingsstedet; sonder kan implanteres i forskjellige deler av kroppen for å undersøke absorpsjon, distribusjon, metabolisme, utskillelse og toksisitet av målforbindelsene; den oppkjøpte prøven inneholder ingen biologiske makromolekyler (>20 kD). Derfor sikrer blodprøver av høyere kvalitet en bedre tolkning av CVD og mekanismen som behandles av etnisk medisin.
Mikrodialyseprøvetakingssystemer består vanligvis av mikroinjeksjonspumper, tilkoblingsrør, dyrefrie bevegelsestanker, mikrodialyseprober og prøvesamlere16. Som den mest kritiske delen av enheten i mikrodialysesystemet omfatter vanlige mikrodialyseprober konsentriske prober, fleksible sonder, lineære sonder og shuntsonde17. Blant disse er fleksible sonder myke og ikke-metalliske sonder, hovedsakelig brukt til å samle prøver fra blodkar og perifert vev som hjerte, muskel, hud og fett av våkne og fritt bevegelige eller bedøvede dyr13. Når den kommer i kontakt med blodkar eller vev, kan sonden bøyes fleksibelt, og dermed unngå irreversibel skade på sonden eller prøvetakingsstedet. Med den kontinuerlige utviklingen av sondeteknologi blir også anvendelsen av mikrodialyseteknologi på ulike felt dypere. I dette papiret ble rottehjerteblodet dynamisk og kontinuerlig ervervet av den ikke-invasive mikrodialyseteknologien gjennom den fleksible sonden designet for blodinnsamling.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Dyreprotokollen er godkjent av administrasjonskomiteen ved Chengdu University of Traditional Chinese Medicine (Rekordnummer: 2021-11). Spesifiserte patogenfrie hannrotter av Sprague Dawley (SD) (8-10 uker, 260-300 g) ble oppdrettet i uavhengige ventilasjonsbur, opprettholdt laboratoriemiljøet ved 22 °C og 65 % relativ fuktighet, og ble brukt i denne studien. Dyrene ble hentet fra en kommersiell kilde (se materialtabell). Alle rottene ble vant til adaptiv fôring i 1 uke med fritt vann og kosthold i perioden.
1. Eksperimentell forberedelse
- Monter utstyret som er involvert i mikrodialyse av blodprøvetaking (se materialfortegnelse), som vist i figur 1.
- Klargjør antikoagulerende citratdekstroseoppløsning (ACD), som inneholder 3,50 mmol / l sitrat, 7,50 mmol / l natriumcitrat og 13,60 mmol / l glukose, som perfusjonsvæske for mikrodialyse blodoppsamling (se materialtabell).
- Før bruk, filtrer ACDene med en 0,22 μm membranfiltreringsenhet og fjern bobler ultralyd. Hold ACD ved 37 °C for å redusere stimuleringen for SD-rotter.
2. Patensinspeksjon av mikrodialyserørsystem
- Fest innløpet til sonden til dialyseenheten med sprøytenålen, slangeadapteren og FEP-slangen (se Materialfortegnelse).
MERK: Den blå enden av mikrodialysesonden er for væskeinnstrømningen, og den gjennomsiktige enden er for væskeutstrømningen. - Kontroller frekvensen til mikrodialyserørsystemet ved å perfusjonere ACD18 inn i rørsystemet med en hastighet på 2 μL/min.
MERK: Hvis ACD strømmer fra prøveinnsamlingsstedet, kan det uhindrede mikrodialysesystemet brukes til ytterligere hjerteblodinnsamling. Hvis ikke, må blodsonden kontrolleres for ødelagte lekkasjer eller om rørledningsskjøten var forseglet.
3. Implantasjon av mikrodialysesonde
- Bedøv rottene med 2 % isofluran i en luft-oksygenblanding på 0,6 l/min, fest de grundig bevisstløse rottene på operasjonsbordet og hold kroppstemperaturen på 37 °C ved hjelp av en temperaturvedlikeholder hos dyr (se materialfortegnelse).
- Fjern pelsen fra nakken med en elektrisk barbermaskin og desinfiser operasjonsstedet med tre alternerende runder med betadin og 70% alkohol. Injiser bupivakain (1,5 mg/kg) inn i rotten. Eksponer høyre vena jugularis ved stump disseksjon av bløtvev og perivaskulær fascie gjennom et 1,5 cm snitt langs halsens midtlinje.
MERK: Alle kirurgiske instrumenter og verktøy som brukes i forsøket skal steriliseres på forhånd ved autoklavering. Bruk sterile hansker og kirurgiske gardiner. Hele eksperimentelle operasjonen skal utføres i et sterilt miljø. Følg lokale retningslinjer for bruk av dyr for anestesi og analgesibehandling. - Lag en avtakbar slipknot ved hjelp av en 4-0 kirurgisk sutur i høyre halsvene i den distale enden av hjertet for midlertidig å blokkere blodstrømmen, og gjør et 1,5 cm snitt i høyre halsvene nær hjertet.
- Sett inn en nålformet kateterstilt (lengde 25 mm, diameter 0,7 mm, se materialliste) i høyre vena jugularis mot den proksimale enden av rottehjertet, sett inn blodmikrodialysesonden (total sondelengde 24 mm, membranlengde 10 mm) i et kateter, og implanter sonden med oftalmisk tang langs det skrå snittet av kateterstilten19.
- Fjern den guidede kateterstilten og senk sondens halvgjennomtrengelige membran (membranlengde 10 mm, membrandiameter 0,5 mm) helt ned i høyre vena jugular. Unravel den avtakbare slipknot i den distale enden av hjertet for å gjenopprette blodstrømmen i høyre halsvenen.
- Ligatur sonden med høyre halsvene ved hjelp av 4-0 kirurgiske suturer og subkutant tre sondens halerør gjennom baksiden av nakken. Se figur 2 for spesifikke probeimplantasjonstrinn.
MERK: Den molekylære cut-off av blodmikrodialysesonden som brukes i denne studien er >20 kD. De innsamlede blodprøvene inneholder stoffer med molekylvekt under 20 kD.
4. Prøvetaking av mikrodialyse
- En uke etter mikrodialyseprobeimplantasjonen gjennomgår rotter som gjenoppretter fra kirurgisk traumer, mikrodialyseprøvetaking. Plasser den våkne rotta i en fritt bevegelig tank (se materialfortegnelse) og koble sonden til mikrodialysesystemet. Balansere sondedialysemembranen ved å irrigere ACD med en hastighet på 2 μL/min i 1 time.
- Ta blodprøver fra mikrodialyse med en strømningshastighet på 2 μL/min og oppbevar dem midlertidig i en fraksjonsbeholder på 4 °C.
MERK: De oppnådde blodprøvene kan testes direkte ved sentrifugering ved 20.000 x g i 10 minutter ved romtemperatur. Eller den kan oppbevares ved -80 °C for følgende testing. Ved prøvetaking er det viktig å alltid observere om sonden prolapser og/eller lekker ut.
5. Operasjon etter prøvetaking
- Bedøv SD-rottene med 2 % isofluran i en luft-oksygenblanding ved 0,6 l/min.
- Dissekere for å bekrefte at sonden er i høyre vena jugularis. Fjern mikrodialysesonden fra høyre vena jugularis og legg den i ultrarent vann.
- Til slutt, avlive rottene ved innånding av 5% isofluran.
- Koble sonden til rørledningen og skyll over natten med en hastighet på 2 μL/min med ultrarent vann for å vaske ut restsaltet i røret og sonden helt.
- Fjern sonden og suge den i ultrarent vann. Oppbevares ved 4 °C for å hindre at sondedialysemembranen trekker seg sammen.
MERK: Hvis volumet av dialysevæske er uforenlig med volumet av perfusjonsvæske, kan sonden blokkeres av koagulert blod. Sonden kan plasseres i bukspyttkjertelproteinløsningen til det synlige stoffet flasser av fra spissen av sondemembranen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Den nåværende protokollen tillot å skaffe hjerteblod fra bevisste rotter i henhold til prøvetakingsparametere angitt i mikrodialyseutstyret. Normale blodprøver må være lyse rødt, mens dyr med hypoksi, potensielle blodpropper eller anemisk sykdom kan ha mørk lilla eller mørk rød. Prøver oppnådd gjennom blodmikrodialyseteknikken er fargeløse, klare og gjennomsiktige, som kan brukes til å analysere serummarkørene for forskjellige sykdommer og blodfordelingen av legemidler og deres metabolitter ved å benytte høyytelsesvæskekromatografi eller massespektrometri. De angitte parametrene og volumet av enkeltblod som samles inn er vist i tabell 1.
Figur 1 Utstyr og apparatur ved mikrodialyse av blod. (A) A) Anestesisystem for dyr. (B) Kirurgiske instrumenter. (C) Operasjonstabell. (D) Prøveinnsamlingsrør. (E) Blodmikrodialysesonde, kateter og sprøytenål. (F) Mikroinjeksjonspumpe. (G) Sprøyte med mikroinjeksjon. (H) Mikrodialysesonde in vitro stativ. (I) Frittgående tank for rotter. (J) Nedkjølt fraksjonsoppsamler. (K) Fullblodprøve og mikrodialysestøttet blodprøve fra rotte. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
Figur 2 Skjematisk illustrasjon av blodmikrodialyseprobe implantert i høyre vena jugularis interna hos rotter. Klikk her for å se en større versjon av denne figuren.
| Parametere | Verdi |
| Perfusjonshastighet | 2 μL/min |
| Samplingsfrekvens | 2 μL/min |
| Prøvetaking temperatur | 4 °C |
| Enkelt blodoppsamlingsvolum | 12 μL |
Tabell 1: Angi parametere for mikrodialyseblodprøvesystem.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
CVD er en vanlig kronisk sykdom i klinikker med gradvis økende forekomst i Kina, og startalderen har en tendens til å være yngre, noe som forårsaker bekymring og panikk hos de fleste pasienter20,21. Å være den ledende dødsårsaken i verden, kan CVD indusere hjerneinfarkt og andre sykdommer med høy dødelighet, som alvorlig truer pasientens sunne liv22. CVD, inkludert iskemisk hjertesykdom, kardiomyopati, aterosklerose, høyt blodtrykk, hjerneslag og hjertesvikt, oppstår når arteriene som leverer blod til hjertet smalner eller herdes23,24. Selv om det finnes mange tiltak for å diagnostisere CVD, er en blodprøve fortsatt den mest praktiske og raskeste. Nøyaktig kan sensitiv og rask bestemmelse av tidlige markører relatert til CVD raskt diagnostisere og forstå den patofysiologiske tilstanden til sykdommen. Derfor krever de økende diagnostiske behovene til pasienter med CVD at man samler inn høykvalitets og representative blodprøver25. Blodinnsamlingsmetoder som vanligvis brukes i dyreforsøk omfatter haleskjæring, halevene, indre canthus, abdominal aorta, sublingual vene, carotis arteriovenøs, halshugging, sprøytehjerteoppkjøp og femoral arteriovenøs blodprøvetaking26. Konvensjonell blodprøvetaking er den mest brukte prøvetakingsmetoden for in vivo legemiddelanalyse. På grunn av den kompliserte blodsammensetningen og mange endogene forstyrrelser er separasjons- og renseprosessen imidlertid cockamamie og kjedelig, med mulighet for legemiddeltap og forurensning i denne prosessen27. I tillegg til å vurdere kravene i dyreetikk, kan langvarig blodinnsamling med større vevskader også føre til dyrets død og villede testresultater av indikatorer28. Samtidig er høykvalitets og akseptable blodprøver også avgjørende for å sikre kvalitativ og kvantitativ påvisning av dynamiske endringer i aktive ingredienser avledet fra etniske urter i dyreblodet.
Mikrodialyseprøvetakingsteknikken som er brukt i denne studien er en ny biopsiprøvetakingsteknikk utviklet de siste 20 årene og blir gradvis brukt i de farmakologiske studiene av etnisk urtemedisin29. Når det gjelder blodmikrodialyse, er det en selektiv permeabel membran som kontinuerlig kan skaffe seg store mengder prøver fra det enkelte dyr uten å miste kroppsvæske. Og mer spesielt, mikrodialysebasert blodprøveteknologi opprettholder den dynamiske balansen mellom kroppsvæske, unngår problemet med redusert blodstrøm forårsaket av tradisjonelle blodinnsamlingsteknologier, og eliminerer påvirkning av legemiddeldistribusjon på testresultater30,31. Det fortjener å bli nevnt at blodoppkjøpet ved online mikrodialyse oppnår sanntidsdeteksjon av blodmedikamentkonsentrasjon hos bevisste dyr på målsteder32,33, noe som er spesielt egnet for in vivo-studier av dype vev og vitale organer. Med den stadig mer modne anvendelsen av mikrodialyseteknologi har fremveksten av nye vevsspesifikke prober gradvis utviklet seg fra den første påvisningen av et enkelt sted i hjernen til flere steder, for eksempel leveren, huden / hudlappen, skjelettmuskulaturen og øyet, som utvider undersøkelsen av den farmakologiske virkningen av etniske urter i flere vev og organer33, 34.
Selv om mikrodialyseprøvetakingsteknologi har sine unike fordeler sammenlignet med tradisjonell prøvetakingsteknologi, har den også sine egne begrensninger35. For det første er mikrodialyse ikke egnet for prøvetaking av alle stoffer, for eksempel påvisning av proteinbiomakromolekyler og legemidler som irreversibelt kan binde seg til semi-permeable membraner. For det andre begrenser sondeegenskaper, parfysategenskaper og sondeimplantasjonsoperasjoner sonders resirkulering og gjenbruk. For det tredje har de kostbare sondene og de høye kostnadene ved kombinerte online-instrumenter begrenset bruken av mikrodialyseteknologi til en viss grad. Avslutningsvis vil anvendelsen av mikrodialyseteknologi utvilsomt spille en stor rolle i å fremme etnisk medisin i utforskningen av CVD.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har ingenting å avsløre.
Acknowledgments
Dette arbeidet ble støttet av National Natural Science Foundation of China (82104533), China Postdoctoral Science Foundation (2020M683273), Science & Technology Department of Sichuan-provinsen (2021YJ0175) og Key FoU-prosjektet til Sichuan Provincial Science and Technology Plan (2022YFS0438). I mellomtiden vil forfatterne takke Mr. Yuncheng Hong, senior utstyrsingeniør ved TRI-ANGELS D &H TRADING PTE. LTD. (Singapore city, Singapore), for å tilby tekniske tjenester for mikrodialyseteknikker.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Animal anesthesia system | Rayward Life Technology Co., Ltd | R500IE | |
| Animal temperature maintainer | Rayward Life Technology Co., Ltd | 69020 | |
| Blood microdialysis probe | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Catheter | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Citrate | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 251275 | |
| Electric shaver | Rayward Life Technology Co., Ltd | CP-5200 | |
| Fep tubing | CMA Microdialysis AB | 3409501 | |
| Free movement tank for animals | CMA Microdialysis AB | CMA120 | |
| Glucose | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | G8270 | |
| Hemostatic forceps | Rayward Life Technology Co., Ltd | F21020-16 | |
| Isofluran | Rayward Life Technology Co., Ltd | R510-22 | |
| Micro scissors | Beyotime Biotechnology Co., Ltd | FS221 | |
| Microdialysis collection tube | CMA Microdialysis AB | 7431100 | |
| Microdialysis collector | CMA Microdialysis AB | CMA4004 | |
| Microdialysis in vitro stand | CMA Microdialysis AB | CMA130 | |
| Microdialysis microinjection pump | CMA Microdialysis AB | 788130 | |
| Microdialysis syringe (1.0 mL) | CMA Microdialysis AB | 8309020 | |
| Microdialysis tubing adapter | CMA Microdialysis AB | 3409500 | |
| Microporous filter membrane | Merck Millipore Ltd. | R0DB36622 | |
| Non-absorbable surgical sutures | Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd | S19004 | |
| Operating table | Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd | 30153 | |
| Ophthalmic forceps | Rayward Life Technology Co., Ltd | F12016-15 | |
| Sodium citrate | Merck Chemical Technology (Shanghai) Co., Ltd | 1613859 | |
| Sprague Dawley (SD) rats | Chengdu Dossy Experimental Animals Co., Ltd | SYXK( )2019-049 |
|
| Surgical scissors | Rayward Life Technology Co., Ltd | S14014-15 | |
| Surgical scissors | Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd | BY-103 | |
| Syringe needle | CMA Microdialysis AB | T55347 | |
| Ultrasonic cleaner | Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd | KMH1-240W8101 |
References
- van Rensburg, W. J. J. Post-mortem evidence of a diverse distribution pattern of atherosclerosis in the South African population. Scientific Reports. 12 (1), 11366 (2022).
- Katz, A. J., Chen, R. C., Usinger, D. S., Danus, S. M., Zullig, L. L. Cardiovascular disease prevention and management of pre-existent cardiovascular disease in a cohort of prostate cancer survivors. Journal of Cancer Survivorship. , (2022).
- Rødevand, L., Tesli, M., Andreassen, O. A. Cardiovascular disease risk in people with severe mental disorders: an update and call for action. Current Opinion in Psychiatry. 35 (4), 277-284 (2022).
- Izumi, Y., et al. Impact of circulating cathepsin K on the coronary calcification and the clinical outcome in chronic kidney disease patients. Heart and Vessels. 31 (1), 6-14 (2016).
- Wang, K., et al. Whey protein hydrolysate alleviated atherosclerosis and hepatic steatosis by regulating lipid metabolism in apoE-/- mice fed a Western diet. Food Research International. 157, 111419 (2022).
- Angelone, T., Rocca, C., Pasqua, T. Nesfatin-1 in cardiovascular orchestration: From bench to bedside. Pharmacological Research. 156, 104766 (2020).
- Bernardi, P. M., Barreto, F., Dalla Costa, T. Application of a LC-MS/MS method for evaluating lung penetration of tobramycin in rats by microdialysis. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 134, 340-345 (2017).
- Anderzhanova, E., Wotjak, C. T. Brain microdialysis and its applications in experimental neurochemistry. Cell and Tissue Research. 354 (1), 27-39 (2013).
- Joukhadar, C., Müller, M. Microdialysis: current applications in clinical pharmacokinetic studies and its potential role in the future. Clinical Pharmacokinetics. 44 (9), 895-913 (2005).
- Stangler, L. A., et al. Microdialysis and microperfusion electrodes in neurologic disease monitoring. Fluids and Barriers of the CNS. 18 (1), 52 (2021).
- Young, B., et al. Cerebral microdialysis. Critical Care Nursing Clinics of North America. 28 (1), 109-124 (2016).
- O'Connell, M. T., Krejci, J. Microdialysis techniques and microdialysis-based patient-near diagnostics. Analytical and Bioanalytical Chemistry. 414 (10), 3165-3175 (2022).
- Hammarlund-Udenaes, M. Microdialysis as an important technique in systems pharmacology-a historical and methodological review. The AAPS Journal. 19 (5), 1294-1303 (2017).
- Stahl, M., Bouw, R., Jackson, A., Pay, V. Human microdialysis. Current Pharmaceutical Biotechnology. 3 (2), 165-178 (2002).
- Pierce, C. F., Kwasnicki, A., Lakka, S. S., Engelhard, H. H. Cerebral microdialysis as a tool for assessing the delivery of chemotherapy in brain tumor patients. World Neurosurgery. 145, 187-196 (2021).
- Sørensen, M., Jacobsen, S., Petersen, L. Microdialysis in equine research: a review of clinical and experimental findings. Veterinary Journal. 197 (3), 553-559 (2013).
- Dmitrieva, N., Rodríguez-Malaver, A. J., Pérez, J., Hernández, L. Differential release of neurotransmitters from superficial and deep layers of the dorsal horn in response to acute noxious stimulation and inflammation of the rat paw. European Journal of Pain. 8 (3), 245-252 (2004).
- Li, T., et al. Microdialysis sampling and HPLC-MS/MS quantification of sinomenine, ligustrazine, gabapentin, paracetamol, pregabalin and amitriptyline in rat blood and brain extracellular fluid. Acta Pharmaceutica Sinica. 55 (9), 2198-2206 (2020).
- Chauzy, A., Lamarche, I., Adier, C., Couet, W., Marchand, S. Microdialysis study of Aztreonam-Avibactam distribution in peritoneal fluid and muscle of rats with or without experimental peritonitis. Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 62 (10), 01228 (2018).
- Fang, X. X., Ardehali, H., Min, J. X., Wang, F. D. The molecular and metabolic landscape of iron and ferroptosis in cardiovascular disease. Nature Reviews. Cardiology. , 1-17 (2022).
- Samson, R., Ennezat, P. V., Le Jemtel, T. H., Oparil, S. Cardiovascular disease risk reduction and body mass index. Current Hypertension Reports. , (2022).
- Kim, M. H., et al. School racial segregation and long-term cardiovascular health among Black adults in the US: A quasi-experimental study. PLoS Medicine. 19 (6), 1004031 (2022).
- Qin, Y. H., et al. Role of m6A RNA methylation in cardiovascular disease (Review). International Journal of Molecular Medicine. 46 (6), 1958-1972 (2020).
- Xu, C. M., Liu, C. J., Xiong, J. H., Yu, J. Cardiovascular aspects of the (pro)renin receptor: Function and significance. FASEB Journal. 36 (4), 22237 (2022).
- Guvenc-Bayram, G., Yalcin, M. The intermediary role of the central cyclooxygenase / lipoxygenase enzymes in intracerebroventricular injected nesfatin-1-evoked cardiovascular effects in rats. Neuroscience Letters. 756, 135961 (2021).
- Ahrens Kress, A. P., Zhang, Y. D., Kaiser-Vry, A. R., Sauer, M. B. A comparison of blood collection techniques in mice and their effects on welfare. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 61 (3), 287-295 (2022).
- Joshi, A., Patel, H., Joshi, A., Stagni, G. Pharmacokinetic applications of cutaneous microdialysis: Continuous+intermittent vs continuous-only sampling. Journal of Pharmacological and Toxicological Methods. 83, 16-20 (2017).
- Reyes-Garcés, N., et al. In vivo brain sampling using a microextraction probe reveals metabolic changes in rodents after deep brain stimulation. Analytical Chemistry. 91 (15), 9875-9884 (2019).
- Kho, C. M., Enche Ab Rahim, S. K., Ahmad, Z. A., Abdullah, N. S. A review on microdialysis calibration methods: the theory and current related efforts. Molecular Neurobiology. 54 (5), 3506-3527 (2017).
- Zhuang, L. N., et al. Theory and application of microdialysis in pharmacokinetic studies. Current Drug Metabolism. 16 (10), 919-931 (2015).
- Zhang, Y. F., Huang, X. X., Zhu, L. X. Metabonomics research strategy based on microdialysis technique. China Journal of Chinese Materia Medica. 45 (1), 214-220 (2020).
- Carpenter, K. L., Young, A. M., Hutchinson, P. J. Advanced monitoring in traumatic brain injury: microdialysis. Current Opinion in Critical Care. 23 (2), 103-109 (2017).
- Brunner, M., Langer, O. Microdialysis versus other techniques for the clinical assessment of in vivo tissue drug distribution. The AAPS Journal. 8 (2), 263-271 (2006).
- Tettey-Amlalo, R. N., Kanfer, I., Skinner, M. F., Benfeldt, E., Verbeeck, R. K. Application of dermal microdialysis for the evaluation of bioequivalence of a ketoprofen topical gel. European Journal of Pharmaceutical Sciences. 36 (2-3), 219-225 (2009).
- Dhanani, J. A., et al. Recovery rates of combination antibiotic therapy using in vitro microdialysis simulating in vivo conditions. Journal of Pharmaceutical Analysis. 8 (6), 407-412 (2018).
