표피 레이저 상처: C. elegans의 수리 프로세스를 검사하기 위해 국부적 손상을 유도합니다.

- 시작하려면, 슬라이드에 신선한 아가로즈 패드에 젊은 성인 벌레를 전송합니다.

성인 벌레의 표피는 세포 융합 이벤트로부터 발생하는 다중 핵 싱크로로 구성된 얇은 단일 층 구조입니다. 표피의 정압 표면은 유연한 콜라주 큐티클을 분비하고, 기저 표면은 기저 라미나라고 불리는 세포외 매트릭스의 얇은 층으로 덮여 있습니다.

다음으로, 레이저로 표피의 정표 표면을 감기. 손상된 세포로부터 세포질이 누출될 수 있으며, 상처 부위에 거품으로 나타난다.

레이저 조사는 내부 조직을 손상시키지 않고 표피 및 표피 세포의 국소적 중단을 일으키기 때문에 바늘 상처와 같은 다른 기술에 비해 장점이 있습니다.

- 선충을 정확하게 상처하기 위해,이 프로토콜은 회전 디스크 공초점 현미경에 부착 된 펨토초 레이저를 사용합니다.

- 한천 패드에 10 명의 젊은 성인을 모으는 것으로 시작하십시오. 12 밀리머 레바미솔 용액의 두 마이크로 리터 드롭에서 마비.

- 동물이 완전히 마비되는 것이 필수적입니다. 12 밀리머 레바솔은 상처 반응에 영향을 미치지 않습니다. 그러나, 다른 고정 방법도 사용될 수 있다.

- 펨토초 레이저 전력이 목표 전에 측정된 바와 같이 140밀리와트로 설정되어 있는지 확인하고, 레이저 반복 속도는 80 메가헤르츠에 있습니다.

표피 세포의 정표면에 초점을 맞추고, 20 밀리초로 분리된 200밀리초 펄스에 대한 레이저를 비추는 것으로 충분합니다.