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L'examen de la dynamique conformationnelle des protéines membranaires In situ Avec site-dirigé marquage fluorescent
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Examining the Conformational Dynamics of Membrane Proteins in situ with Site-directed Fluorescence Labeling
DOI:

11:55 min

May 29, 2011

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:32Protein Expression Cysteine Mutation and mRNA Synthesis
  • 02:07Oocyte Removal
  • 03:36Oocyte Defoculation and mRNA Injection
  • 05:05Site-specific Fluorescence Labeling
  • 06:07Electrophysiology
  • 07:26Anisotropy Measurements and Determination of Distance Constraints
  • 09:17Relative Movement of Protein Subunits
  • 10:07Results: Current and Fluorescence Changes with Site Specific Fluorophore Labelings
  • 11:38Conclusion

Summary

Automatic Translation

Nous allons décrire une méthode qui mesure la cinétique de transport des ions des protéines membranaires spécifiques au site aux côtés de l'analyse des changements conformationnels à l'aide de fluorescence sur des cellules individuelles. Cette technique est adaptable aux canaux ioniques, les transporteurs et les pompes ioniques et peut être utilisé pour déterminer les contraintes distance entre sous-unités protéiques.

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