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膜タンパク質の構造動力学を調べるその場で部位特異的蛍光標識を持つ
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Examining the Conformational Dynamics of Membrane Proteins in situ with Site-directed Fluorescence Labeling
DOI:

11:55 min

May 29, 2011

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:32Protein Expression Cysteine Mutation and mRNA Synthesis
  • 02:07Oocyte Removal
  • 03:36Oocyte Defoculation and mRNA Injection
  • 05:05Site-specific Fluorescence Labeling
  • 06:07Electrophysiology
  • 07:26Anisotropy Measurements and Determination of Distance Constraints
  • 09:17Relative Movement of Protein Subunits
  • 10:07Results: Current and Fluorescence Changes with Site Specific Fluorophore Labelings
  • 11:38Conclusion

Summary

Automatic Translation

我々は単一細胞の蛍光を用いて立体構造変化の部位特異的解析と並んで膜タンパク質のイオン輸送の動態を測定する方法を説明します。この手法は、イオンチャネル、トランスポーター、イオンポンプに適応可能であり、タンパク質サブユニット間の距離の制約を決定するために利用することができます。

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