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Examinar la dinámica conformacional de las proteínas de membrana In situ Sitio-dirigida con fluorescencia de etiquetado
JoVE Journal
Biology
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JoVE Journal Biology
Examining the Conformational Dynamics of Membrane Proteins in situ with Site-directed Fluorescence Labeling
DOI:

11:55 min

May 29, 2011

,

Chapters

  • 00:05Title
  • 01:32Protein Expression Cysteine Mutation and mRNA Synthesis
  • 02:07Oocyte Removal
  • 03:36Oocyte Defoculation and mRNA Injection
  • 05:05Site-specific Fluorescence Labeling
  • 06:07Electrophysiology
  • 07:26Anisotropy Measurements and Determination of Distance Constraints
  • 09:17Relative Movement of Protein Subunits
  • 10:07Results: Current and Fluorescence Changes with Site Specific Fluorophore Labelings
  • 11:38Conclusion

Summary

Automatic Translation

Vamos a describir un método que mide la cinética del transporte de iones de proteínas de membrana junto con el sitio específico de análisis de los cambios conformacionales con fluorescencia en células individuales. Esta técnica se adapta a los canales iónicos, transportadores y bombas iónicas y pueden ser utilizados para determinar las limitaciones distancia entre subunidades de la proteína.

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