A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Chapters
- 00:04Title
- 00:54Physical Alignment of Image Splitter Generated Images
- 02:25Alignment of Spectrally Separated Channels by Software Performing Spatial Transformation
- 04:34Single Molecule Imaging of Mitochondrial Membrane Proteins
- 08:32Results: Multi-color Localization of Mammalian Mitochondrial PINK1
- 10:15Conclusion
Здесь мы представляем протокол для локализации многоцветные одного мембранных белков в органеллы живых клеток. Чтобы прикрепить флуорофоров, используются самомаркируемыми белки. Белки, расположенных в различных оболочек отсеков же органеллы, могут быть локализованы с точностью ~ 18 Нм.
Tags
Multi-color Localization MicroscopySingle Membrane ProteinsOrganellesLive Mammalian CellsProtein DynamicsSpatiotemporal OrganizationMitochondrial Membrane ProteinsTransfectionSample PreparationMicroscope SetupFluorescent BeadsObjective LensImmersion OilTransmission LightLaserFluorescence ChannelsImage SplitterTIRF MicroscopyTransformation MatrixDual-color ImagesCalibrationUnit ConversionLocalization ManagerPoint Spread Function (PSF)
