Journal
/
Genetics
/
Gepoolde CRISPR-gebaseerde genetische schermen in zoogdiercellen
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Pooled CRISPR-Based Genetic Screens in Mammalian Cells
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Gepoolde CRISPR-gebaseerde genetische schermen in zoogdiercellen

DOI:
10.3791/59780-v

•

00:09 min

•

September 04, 2019

•

, , , ,
1Donnelly Centre,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Institute for Biomaterials and Biomedical Engineering,University of Toronto

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:36Pooled CRISPR sgRNA Lentiviral Library Plasmid Amplification
  • 02:24Large-scale CRISPR sgRNA Library Lentivirus Production
  • 03:47Primary Screen Infection, Selection, and Cell Passaging
  • 05:41CRISPR Sample Preparation and Sequencing
  • 06:43Results: Genome-scale CRISPR Screening
  • 07:54Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

Crispr Cas9-technologie biedt een efficiënte methode om het genoom van zoogdieren in elk celtype nauwkeurig te bewerken en vertegenwoordigt een nieuw middel om genoom-brede genetische schermen uit te voeren. Hier vindt u een gedetailleerd protocol over de stappen die nodig zijn voor het succesvol uitvoeren van gepoolde CRISPR Cas9 schermen.

Tags

Keywords: CRISPRGenetic ScreensMammalian CellsDrop-out ScreensGuide LibrariesEssential GenesCancerDrug MechanismsCell LinesLentivirusAntibiotic SelectionPlasmid TransformationElectrocompetent CellsLBCarbenicillinPlasmid Purification293T CellsTransfection

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/59780?article_type=v

Genetische Manipulatie van de Plant Pathogeen<em> Ustilago maydis</em> Om Fungal Biology and Plant Microbe Interactions Studie
check_url/59780?article_type=v

Selectieafhankelijke en onafhankelijke generatie van CRISPR / Cas9-gemedieerde Gene Knockouts in zoogdiercellen
check_url/59780?article_type=v

Gebundelde shRNA scherm voor de heractivering van het MeCP2 op het inactieve X-chromosoom
check_url/59780?article_type=v

Aanpassing van hybridisatie inname van chromatine-geassocieerde eiwitten voor Proteomics op zoogdiercellen
check_url/59780?article_type=v

Formaldehyde-bijgewoonde isolatie van regelgevende elementen maatregel chromatine toegankelijkheid in zoogdiercellen
check_url/59780?article_type=v

Informatic analyse van sequencedata van Batch gist 2-Hybrid schermen
check_url/59780?article_type=v

Dissectie van Enhancer functie met behulp van Multiplex CRISPR gebaseerde Enhancer inmenging in cellijnen
check_url/59780?article_type=v

Isolatie, karakterisering en MicroRNA gebaseerde genetische modificatie van stamcellen van menselijke tandheelkundige follikel
check_url/59780?article_type=v

Genetische manipulatie van Dictyostelium discoideum cellen op basis van de selectie en de groei van bacteriën
check_url/59780?article_type=v

Genoom bewerken in zoogdieren cellijnen met behulp van CRISPR-Cas

Read Article