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Schermi genetici basati su CRISPR in cellule mammaliane
JoVE Journal
Genetics
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JoVE Journal Genetics
Pooled CRISPR-Based Genetic Screens in Mammalian Cells
DOI:

00:09 min

September 04, 2019

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Chapters

  • 00:04Title
  • 01:36Pooled CRISPR sgRNA Lentiviral Library Plasmid Amplification
  • 02:24Large-scale CRISPR sgRNA Library Lentivirus Production
  • 03:47Primary Screen Infection, Selection, and Cell Passaging
  • 05:41CRISPR Sample Preparation and Sequencing
  • 06:43Results: Genome-scale CRISPR Screening
  • 07:54Conclusion

Summary

Automatic Translation

La tecnologia CRISPR-Cas9 fornisce un metodo efficiente per modificare con precisione il genoma dei mammiferi in qualsiasi tipo di cellula e rappresenta un nuovo mezzo per eseguire schermi genetici a livello di genoma. Qui viene fornito un protocollo dettagliato che illustra i passaggi necessari per il successo delle prestazioni degli schermi CRISPR-Cas9 a livello di genoma raggruppato.

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