Journal
/
Genetics
/
Samlede CRISPR-baserte genetiske skjermer i pattedyrceller
JoVE Journal
Genetics
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Genetics
Pooled CRISPR-Based Genetic Screens in Mammalian Cells

Samlede CRISPR-baserte genetiske skjermer i pattedyrceller

DOI:
10.3791/59780-v

•

00:09 min

•

September 04, 2019

•

, , , ,
1Donnelly Centre,University of Toronto, 2Department of Molecular Genetics,University of Toronto, 3Institute for Biomaterials and Biomedical Engineering,University of Toronto

Chapters

  • 00:04Title
  • 01:36Pooled CRISPR sgRNA Lentiviral Library Plasmid Amplification
  • 02:24Large-scale CRISPR sgRNA Library Lentivirus Production
  • 03:47Primary Screen Infection, Selection, and Cell Passaging
  • 05:41CRISPR Sample Preparation and Sequencing
  • 06:43Results: Genome-scale CRISPR Screening
  • 07:54Conclusion

Summary

Automatic Translation

Automatic Translation

CRISPR-Cas9 teknologien skaffer en effektiv metoden å presist redigere det pattedyr Genova dersom noe cellen type og representerer en ny betyr å utføre Genova-bred genetisk skjermene. En detaljert protokoll diskuterer trinnene som kreves for vellykket gjennomføring av samlet Genova hele CRISPR-Cas9 skjermene er gitt her.

Tags

Keywords: CRISPRGenetic ScreensMammalian CellsDrop-out ScreensGuide LibrariesEssential GenesCancerDrug MechanismsCell LinesLentivirusAntibiotic SelectionPlasmid TransformationElectrocompetent CellsLBCarbenicillinPlasmid Purification293T CellsTransfection

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

check_url/59780?article_type=v

Genetisk manipulering av Plant Patogen<em> Ustilago maydis</em> Å studere Fungal Biology and Plant mikrobe interaksjoner
check_url/59780?article_type=v

Utvalgsavhengig og uavhengig generasjon av CRISPR / Cas9-medierte Gene Knockouts i mammale celler
check_url/59780?article_type=v

Grupperte shRNA skjermen for aktivering av MeCP2 på inaktive X-kromosomet
check_url/59780?article_type=v

Tilpasning av hybridisering erobringen av Chromatin-assosiert proteiner for Proteomikk til pattedyrceller
check_url/59780?article_type=v

Formaldehyd-assistert isolering av regulatoriske elementer for å måle Chromatin tilgjengelighet i pattedyrceller
check_url/59780?article_type=v

Informatic analyse av sekvens Data fra satsvis gjær 2-Hybrid-skjermer
check_url/59780?article_type=v

Disseksjon Enhancer funksjon med Multiplex CRISPR-baserte Enhancer forstyrrelser i linjer
check_url/59780?article_type=v

Isolering og karakterisering MicroRNA-baserte genetisk modifisering av menneskelig Dental hårsekken stamceller
check_url/59780?article_type=v

Genteknologi Dictyostelium discoideum cellene basert på valget og vekst på bakterier
check_url/59780?article_type=v

Genomet redigering i pattedyr linjer med CRISPR-Cas

Read Article