/

/

スプリットルシフェラーゼ相補アッセイを用いたゴルジレジデントIII型膜タンパク質によって形成される異種複合体の実証

JoVE Journal
Biology

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

JoVE Journal Biology

Demonstration of Heterologous Complexes formed by Golgi-Resident Type III Membrane Proteins using Split Luciferase Complementation Assay

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

スプリットルシフェラーゼ相補アッセイを用いたゴルジレジデントIII型膜タンパク質によって形成される異種複合体の実証

DOI:

10.3791/61669-v

•

05:28 min

•

September 10, 2020

•

Wojciech Wiertelak, Mariusz Olczak, Dorota Maszczak-Seneczko

¹Laboratory of Biochemistry, Faculty of Biotechnology,University of Wroclaw

Chapters

00:04Introduction
00:38Transient Transfection of the Expression Plasmids into the Cells
02:06Measuring Luminescence
02:57Results: Split Luciferase Complementation Assay Performed in HEK293T
04:46Conclusion

Summary

Automatic Translation

ここで提示されたプロトコルは、スプリットルシフェラーゼ相補アッセイの最新の変異体を用いて、生きた哺乳動物細胞におけるゴルジ常駐III型膜タンパク質と細胞質的に露出したN末端および/またはC末端との間の異種相互作用の発生を実証することを意図している。

Tags

Keywords: Heterologous Complexes Golgi-resident Type III Membrane Proteins Split Luciferase Complementation Assay HEK293 T-cells Transfection Luminescence Nucleotide Sugar Transporters SLC35A2 SLC35A3 Protein-protein Interactions

Article

Embed

ADD TO PLAYLIST

Usage Statistics

Related Videos

ルシフェラーゼベースのレポーター遺伝子アッセイで膜の生合成を研究して

脂質中間相を用いた構造決定のための膜タンパク質の結晶化

酵母の菌タイプIIIエフェクターの発現により誘導される増殖阻害表現型の同定

脂質中間相における膜タンパク質の結晶化

脂質Bicelle法を用いた膜タンパク質のハイスループット結晶化

脂質中間相における膜タンパク質のハイスループット結晶化のためのロボットの使用

高分子結晶学による構造決定のための脂質メソフェーズで栽培膜タンパク質の収穫とクライオ冷却結晶

自家製デュアルグロールシフェラーゼアッセイを用いて、ハイスループット機能スクリーニング

単離されたミトコンドリアのフローサイトメトリーによる外膜タンパク質の免疫検出

生細胞内のタンパク質断片相補アッセイ（PCA）によるゲノムワイドなタンパク質間相互作用のスクリーニング

Read Article