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Polarização de Células e Análises Derivadas de Monócitos Humanos M1 e M2 com Citometria de Fluxo sobre Infecção por Mycobacterium tuberculosis
JoVE Journal
Immunology and Infection
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JoVE Journal Immunology and Infection
Polarization of M1 and M2 Human Monocyte-Derived Cells and Analysis with Flow Cytometry upon Mycobacterium tuberculosis Infection
DOI:

10:43 min

September 18, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:44Peripheral Blood Mononuclear Cell (PBMC) Isolation
  • 01:40Monocyte-Derived Cell Differentiation and Polarization
  • 03:25Mycobacterium tuberculosis (Mtb) Culture
  • 05:00Monocyte-Derived Cell Mtb Infection
  • 06:03Flow Cytometry Staining and Analysis
  • 07:40Results: Representative Phenotypic M1 and M2 Cell Characterization Before and After Mtb Infection
  • 09:47Conclusion

Summary

Automatic Translation

Este protocolo fornece um método para estudar a infecção por Mycobacterium tuberculosis em macrófagos m1 ou M2 polarizados humanos baseados na diferenciação de monócitos periféricos-sanguíneos para células semelhantes a macrófagos que são infectados com a cepa virulenta H37Rv, e analisado com citometria de fluxo usando um painel de 10 cores, incluindo a expressão de marcadores M1/M2 selecionados.

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