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CRISPR/Cas9介导的胚胎干细胞中的高效基因靶向，用于开发基因操纵的小鼠模型

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Developmental Biology

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CRISPR/Cas9-Mediated Highly Efficient Gene Targeting in Embryonic Stem Cells for Developing Gene-Manipulated Mouse Models

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CRISPR/Cas9介导的胚胎干细胞中的高效基因靶向，用于开发基因操纵的小鼠模型

DOI:

10.3791/64385-v

•

10:57 min

•

August 24, 2022

•

Manabu Ozawa*¹, Chihiro Emori*², Masahito Ikawa²

¹Laboratory of Reproductive Systems Biology, Center for Experimental Medicine and Systems Biology, The Institute of Medical Science,The University of Tokyo, ²Research Institute for Microbial Diseases,Osaka University

Chapters

00:04Introduction
01:06Gene Targeting of Embryonic Stem Cells (ESCs)
04:16PCR Genotyping of Targeted ESCs
07:02Preparation of Eight-Cell Stage Embryo and Microinjection of ESCs
09:49Results: Screening of Targeted ESC Clones
10:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

在这里，我们提出了一种使用胚胎干细胞开发转基因小鼠模型的方案，特别是对于大DNA敲入（KI）。该协议使用CRISPR / Cas9基因组编辑进行调整，与传统的同源重组介导的线性DNA靶向方法相比，KI效率显着提高。

Tags

Keywords: CRISPR/Cas9 Gene Targeting Embryonic Stem Cells Gene-manipulated Mouse Models Gene Functions In Vivo Drug Selection Mouse Embryonic Fibroblast ESC MEF Electroporation Cas9 RNP DNA

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