在这里,我们提出了一种使用胚胎干细胞开发转基因小鼠模型的方案,特别是对于大DNA敲入(KI)。该协议使用CRISPR / Cas9基因组编辑进行调整,与传统的同源重组介导的线性DNA靶向方法相比,KI效率显着提高。