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Ciblage génique hautement efficace médié par CRISPR/Cas9 dans des cellules souches embryonnaires pour le développement de modèles murins manipulés par des gènes
JoVE Journal
Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
CRISPR/Cas9-Mediated Highly Efficient Gene Targeting in Embryonic Stem Cells for Developing Gene-Manipulated Mouse Models
DOI:

10:57 min

August 24, 2022

, ,

Chapters

  • 00:04Introduction
  • 01:06Gene Targeting of Embryonic Stem Cells (ESCs)
  • 04:16PCR Genotyping of Targeted ESCs
  • 07:02Preparation of Eight-Cell Stage Embryo and Microinjection of ESCs
  • 09:49Results: Screening of Targeted ESC Clones
  • 10:10Conclusion

Summary

Automatic Translation

Nous présentons ici un protocole pour le développement de modèles murins génétiquement modifiés utilisant des cellules souches embryonnaires, en particulier pour les grands knock-in d’ADN (KI). Ce protocole est mis au point à l’aide de l’édition du génome CRISPR / Cas9, ce qui permet d’améliorer considérablement l’efficacité du KI par rapport à la méthode conventionnelle de ciblage de l’ADN linéarisé par recombinaison homologue.

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