7.11:

حركية الإنزيم

JoVE Core
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Core Biology
Enzyme Kinetics

91,836 Views

00:00 min
August 01, 2019

تعمل الإنزيمات على تسريع التفاعلات عن طريق خفض طاقة التنشيط للمواد المتفاعلة. تسمى السرعة التي يحول بها الإنزيم المواد المتفاعلة إلى نواتج معدل التفاعل. هناك عدة عوامل تؤثر على معدل التفاعل ، بما في ذلك عدد المواد المتفاعلة المتاحة. حركية الإنزيم هي دراسة كيف يغير الإنزيم معدل التفاعل.

يدرس العلماء عادةً حركية الإنزيم بكمية ثابتة من الإنزيم في البيئة الخاضعة للتحكم في أنبوب الاختبار. عندما يتم إضافة المزيد من المواد المتفاعلة أو الركيزة إلى كمية ثابتة من الإنزيم ، يزداد معدل التفاعل حيث يمكن للإنزيم إنتاج المزيد من المنتج. نتيجة لذلك ، عندما يتم رسم معدل التفاعل مقابل تركيز الركيزة ، فإن زيادة الركيزة تزيد من معدل التفاعل. ومع ذلك ، بمجرد احتلال جميع المواقع النشطة للإنزيم ، فإن معدل التفاعل يهدأ. يسمى تركيز الركيزة التي يقوم بالوصول إلى الحد الأقصى لمعدل التفاعل Vmax. عدد جزيئات الإنزيم الحالية يحد من Vmax. في حالة زيادة كمية الإنزيم ، يزيد Vmax ، ولكن إضافة المزيد من الركيزة ليس له أي تأثير.

يمكن أن يكشف الرسم البياني لمعدل التفاعل مقابل تركيز الركيزة عن خصائص مهمة أخرى لحركية الإنزيم. يسمى تركيز الركيزة الذي يكون عنده معدل التفاعل في منتصف الطريق إلى Vmax (أي ، ١/٢ Vmax) ثابت ميكايليس (Km). Km هو تمثيل للقابلية بين الإنزيم والركيزة. الإنزيمات ذات Km الأقل تحتاج كمية أقل من الركيزة للوصول إلى Vmax وبالتالي يكون لها تقارب أعلى مع الركيزة الخاصة بها. ومن المثير للاهتمام ، بالنسبة للعديد من الإنزيمات ، أن قيمة Km قريبة جداً من التركيز الخلوي للركيزة. بالقرب من Km ، يمكن أن تؤثر التغييرات الطفيفة في تركيز الركيزة بشكل كبير على معدل التفاعل ، لذلك يمكن أن تؤثر التغييرات الصغيرة في توفر الركيزة الخلوية على وظيفة المسار البيولوجي بأكمله.

لا تنتج جميع الإنزيمات الرسم البياني لمعدل الركيزة على شكل زائدي والمعروف باسم حركية ميكايليس مينتين. تفترض حركية ميكايليس مينتين أن الإنزيم يحفز ركيزة واحدة. تحتوي الإنزيمات التي يتم تنظيمها بشكل تفارغي على مواقع نشطة متعددة وتميل إلى إنتاج رسم بياني على شكل سيني عندما يتم رسم معدل التفاعل مقابل تركيز الركيزة.