Cette vidéo décrit comment préparer les filets larvaires utilisés pour visualiser les neurones sensoriels d’arborisation dendritique (da) et leurs cellules épidermiques associées. Le protocole présenté montre en détail comment enlever le tissu musculaire de la paroi du corps tout en préservant la morphologie des cellules, ce qui améliore l’immunostaining et la visualisation des neurones da autrement obscurcis et des cellules épidermiques.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Tenenbaum et Gavis, Removal of Drosophila Muscle Tissue from Larval Fillets for Immunofluorescence Analysis of Sensory Neurons and Epidermal Cells, J. Vis. Exp. (2016). REMARQUE: La procédure d’ablation musculaire( figure 1) est une modification des méthodes précédemment décrites pour la préparation des filets larvaire. Les étapes qui précèdent et suivent l’ablation muscula…
Representative Results
Figure 1 : Vue d’ensemble de la procédure d’ablation musculaire. Une larve est disséquée et épinglée sur un plat disséquant de l’élastomer en silicone. Pour enlever le tissu musculaire, une pince de forceps est insérée entre le muscle et la couche épidermique de cellules, à partir de la ligne médiane dorsale près d’une limite de segment (2.2). Les forceps sont tirés vers le haut pour briser l’attac…
Materials
Dumont #5 tweezers
Electron Microscopy Sciences
72701-D
Micro Scissors, 8 cm, straight, 5 mm blades, 0.1 mm tips