幼虫フィレの調製:無傷の感覚ニューロンおよび関連する表皮細胞を可視化する方法

Abstract

出典:テネンバウム、C.M、Gavis、E.R.は 、感覚ニューロンおよび表皮細胞の免疫蛍光分析のための幼虫フィレからの ショウジョウバエ 筋肉組織の除去。 J. ヴィス・エクス (2016).

このビデオでは、感覚樹状(da)ニューロンおよびそれに関連する表皮細胞を視覚化するために使用される幼虫フィレを調製する方法について説明します。注目のプロトコルは、細胞の形態を維持しながら体壁から筋肉組織を除去する方法を詳細に示し、それ以外の場合は不明瞭なdaニューロンおよび表皮細胞の免疫染色および視覚化を改善する。

Protocol

このプロトコルは、テネンバウムとガビスからの抜粋であり、感覚ニューロンおよび表皮細胞の免疫蛍光分析のための幼虫フィレからのショウジョウバエ筋肉組織の除去、J.Vis. Exp. (2016)。 注: 筋肉除去の手順(図1)は、幼虫フィレットを調製するための先に説明した方法の修飾である。筋肉の除去に先立ち、それに…

Representative Results

図1:筋除去手順の概要 幼虫を解剖し、シリコーンエラストマーの解剖皿に固定します。筋肉組織を除去するために、1つの鉗子が、セグメント境界(2.2)に近い下線から始まる、筋肉と表皮細胞層の間に挿入される。鉗子は筋肉と体壁の間の付着を壊すために上に引っ張られる(2.3)。これは、関心のあるセグメントのため…

Materials

Dumont #5 tweezers	Electron Microscopy Sciences	72701-D
Micro Scissors, 8 cm, straight, 5 mm blades, 0.1 mm tips	World Precision Instruments	14003
Sylgard 184 silicone elastomer kit	Dow Corning	3097358-1004	for dissecting plates
Austerlitz insect pins, 0.1 mm	Fine Science Tools	26002-10
Fostec 8375 light source	Artisan Technology Group	62792-4