애벌레 필렛 준비: 그대로 감각 뉴런 및 관련 표피 세포를 시각화하는 방법

Abstract

출처: Tenenbaum, C.M., Gavis, E. R. 감각 신경 및 표피 세포의 면역 불피성 분석을 위한 Larval fillets에서 Drosophila 근육 조직의 제거. J. 비스 익스펙. (2016).

이 비디오는 감각 수지상 식수 (da) 뉴런과 관련 표피 세포를 시각화하는 데 사용되는 애벌레 필레를 준비하는 방법을 설명합니다. 특징적인 프로토콜은 세포의 형태를 보존하는 동안 바디 벽에서 근육 조직을 제거하는 방법을 자세히 보여줍니다, 이는 면역 염색및 그렇지 않으면 가려진 다 뉴런및 표피 세포의 시각화를 향상.

Protocol

이 프로토콜은 테넨바움과 Gavis에서 발췌, 감각 신경 및 표피 세포의 면역 불피성 분석을 위한 Larval Fillets에서 Drosophila 근육 조직의 제거, J. Vis. Exp. (2016). 참고: 근육 제거절차(도 1)는애벌레 필렛을 준비하는 방법에 대한 이전에 설명된 방법의 수정이다. 근육 제거에 앞서 따르는 단계는 간략하게 설명되어 있으며 독자…

Representative Results

그림 1: 근육 제거 절차 개요. 유충은 해부되고 실리콘 엘라스토머 해부 접시에 고정됩니다. 근육 조직을 제거하기 위해, 하나의 포스프 프롱은 근육과 표피 세포 층 사이에 삽입되며 세그먼트 경계 (2.2) 근처의 등쪽 미드 라인에서 시작됩니다. 집게는 근육과 신체 벽 (2.3) 사이의 부착을 깨기 위해 위쪽으로 당겨. 이것은 ?…

Materials

Dumont #5 tweezers	Electron Microscopy Sciences	72701-D
Micro Scissors, 8 cm, straight, 5 mm blades, 0.1 mm tips	World Precision Instruments	14003
Sylgard 184 silicone elastomer kit	Dow Corning	3097358-1004	for dissecting plates
Austerlitz insect pins, 0.1 mm	Fine Science Tools	26002-10
Fostec 8375 light source	Artisan Technology Group	62792-4