Method Article

Подготовка филе личинок: метод визуализации интактных сенсорных нейронов и ассоциированных клеток эпидермиса

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Источник: Tenenbaum, C. M., Gavis, E. R. Удаление мышечной ткани дрозофилы из филе личинок для иммунофлуоресцентного анализа сенсорных нейронов и эпидермальных клеток. J. Vis. Exp. (2016).

Это видео описывает, как подготовить филе личинок, используемых для визуализации нейронов сенсорной дендритной арборизации (da) и связанных с ними эпидермальных клеток. Представленный протокол подробно показывает, как удалить мышечную ткань со стенки тела с сохранением морфологии клеток, что улучшает иммуноокрашивание и визуализацию скрытых в противном случае данейронов и эпидермальных клеток.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Этот протокол представляет собой выдержку из Tenenbaum and Gavis, Removal of Drosophila Muscle Tissue from Larval Fillets for Immunofluorescence Analysis of Sensory Neurons and Epidermal Cells, J. Vis. Exp.(2016).

ПРИМЕЧАНИЕ: Процедура удаления мышц (Рисунок 1) является модификацией ранее описанных методов подготовки филе личинок. Шаги, которые предшествуют и следуют за удалением мышц, кратко очерчены, и читатель отсылается к предыдущей работе в Brent, et al., J. Vis. Exp. (2009) и Karim and Moore, J. Vis. Exp. (2011) для более подробного описани....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Рисунок 1: Обзор процедуры удаления мышц. Личинку препарируют и прикалывают к силиконовой эластомерной чашке для препарирования. Для удаления мышечной ткани один зубец щипцов вводится между мышцей и слоем эпидермальных клеток, начиная от дорсальной средней линии вблизи границы сегмента (2.2). Щипцы тянут вверх, чтобы разорвать крепление между мышцей и стенкой тела (2.3). Это повторяется для сегментов, представляющих инте.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Пинцет Dumont #5Науки электронной микроскопии72701-Д
Микроножницы, 8 см, прямые, лезвия 5 мм, наконечники 0,1 ммМировые прецизионные приборы14003
Sylgard 184 Комплект силиконовых эластомеровИндекс Dow Corning3097358-1004 (Английскийдля препарирования пластин
Булавки от насекомых Austerlitz, 0,1 ммИнструменты для точной науки26002-10
Источник света Fostec 8375Группа ремесленных технологий62792-4
)

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Larval Fillet PreparationDrosophila LarvaMuscle Tissue RemovalSensory NeuronsEpidermal CellsDissecting ScissorsInsect PinsSilicone Coated DishCold SalineVentral Midline

Related Articles