Dieses Video beschreibt, wie Larvenfilets vorbereitet werden, die verwendet werden, um sensorische dendritische Arborisation (da) Neuronen und die zugehörigen epidermalen Zellen zu visualisieren. Das vorgestellte Protokoll zeigt im Detail, wie Muskelgewebe aus der Körperwand entfernt wird, während die Morphologie der Zellen erhalten bleibt, was die Immunfärbung und Visualisierung der ansonsten verdeckten Da-Neuronen und epidermalen Zellen verbessert.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Tenenbaum und Gavis, Entfernung von Drosophila Muskelgewebe aus Larval Fillets für Immunfluoreszenzanalyse von sensorischen Neuronen und Epidermalzellen, J. Vis. Exp. (2016). HINWEIS: Das Verfahren zur Muskelentfernung (Abbildung 1) ist eine Modifikation der zuvor beschriebenen Methoden zur Herstellung von Larvenfilets. Die Schritte, die der Muskelentfernung vorausgehen und folgen…
Representative Results
Abbildung 1: Übersicht über die Muskelentfernung. Eine Larve wird seziert und an eine Silikon-Elastomer-Sezieren-Schale gepinnt. Um Muskelgewebe zu entfernen, wird eine Zange prong zwischen dem Muskel und epidermalen Zellschicht eingefügt, beginnend von der dorsalen Mittellinie in der Nähe einer Segmentgrenze (2.2). Die Zange wird nach oben gezogen, um die Befestigung zwischen Muskel und Körperwand zu brechen (2.3). …
Materials
Dumont #5 tweezers
Electron Microscopy Sciences
72701-D
Micro Scissors, 8 cm, straight, 5 mm blades, 0.1 mm tips