Este video describe cómo preparar filetes larvarios utilizados para visualizar las neuronas de arborización dendrítica sensorial (da) y sus células epidérmicas asociadas. El protocolo destacado muestra en detalle cómo eliminar el tejido muscular de la pared del cuerpo preservando la morfología de las células, que mejora la inmunostaining y visualización de las neuronas da oscurecidas y células epidérmicas.
Protocol
Este protocolo es un extracto de Tenenbaum y Gavis, Eliminación del tejido muscular de Drosophila de filetes larvarios para análisis de inmunofluorescencia de neuronas sensoriales y células epidérmicas, J. Vis. Exp. (2016). NOTA: El procedimiento para la eliminación muscular(Figura 1)es una modificación de los métodos descritos anteriormente para preparar filetes larvarios. Los pasos que preceden y siguen la e…
Representative Results
Figura 1: Descripción general del procedimiento de eliminación muscular. Una larva se disecciona y se fija a un plato de disección de elastómero de silicona. Para eliminar el tejido muscular, se inserta una punta de fórceps entre la capa muscular y la capa de células epidérmicas, comenzando desde la línea media dorsal cerca de un límite de segmento (2.2). Las fórceps se tira hacia arriba para romper el accesorio…
Materials
Dumont #5 tweezers
Electron Microscopy Sciences
72701-D
Micro Scissors, 8 cm, straight, 5 mm blades, 0.1 mm tips