Preparación de filetes larvarios: Un método para visualizar neuronas sensoriales intactas y células epidérmicas asociadas

Abstract

Fuente: Tenenbaum, C.M., Gavis, E. R. Eliminación del tejido muscular de Drosophila de filetes larvarios para análisis de inmunofluorescencia de neuronas sensoriales y células epidérmicas. J. Vis. (2016).

Este video describe cómo preparar filetes larvarios utilizados para visualizar las neuronas de arborización dendrítica sensorial (da) y sus células epidérmicas asociadas. El protocolo destacado muestra en detalle cómo eliminar el tejido muscular de la pared del cuerpo preservando la morfología de las células, que mejora la inmunostaining y visualización de las neuronas da oscurecidas y células epidérmicas.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Tenenbaum y Gavis, Eliminación del tejido muscular de Drosophila de filetes larvarios para análisis de inmunofluorescencia de neuronas sensoriales y células epidérmicas, J. Vis. Exp. (2016). NOTA: El procedimiento para la eliminación muscular(Figura 1)es una modificación de los métodos descritos anteriormente para preparar filetes larvarios. Los pasos que preceden y siguen la e…

Representative Results

Figura 1: Descripción general del procedimiento de eliminación muscular. Una larva se disecciona y se fija a un plato de disección de elastómero de silicona. Para eliminar el tejido muscular, se inserta una punta de fórceps entre la capa muscular y la capa de células epidérmicas, comenzando desde la línea media dorsal cerca de un límite de segmento (2.2). Las fórceps se tira hacia arriba para romper el accesorio…

Materials

Dumont #5 tweezers	Electron Microscopy Sciences	72701-D
Micro Scissors, 8 cm, straight, 5 mm blades, 0.1 mm tips	World Precision Instruments	14003
Sylgard 184 silicone elastomer kit	Dow Corning	3097358-1004	for dissecting plates
Austerlitz insect pins, 0.1 mm	Fine Science Tools	26002-10
Fostec 8375 light source	Artisan Technology Group	62792-4