Larva Fileto Hazırlama: Bozulmamış Duyusal Nöronları ve İlişkili Epidermal Hücreleri Görselleştirmek için Bir Yöntem

Abstract

Kaynak: Tenenbaum, C.M., Gavis, E. R. Duyusal Nöronların ve Epidermal Hücrelerin İmmünofluoresans Analizi için Drosophila Kas Dokusunun Larva Filetolarından Uzaklaştırılması. J. Vis. Exp. (2016).

Bu videoda duyusal dendritik arborizasyon (da) nöronlarını ve ilişkili epidermal hücrelerini görselleştirmek için kullanılan larva filetolarının nasıl hazırlanacağı açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, hücrelerin morfolojisini korurken kas dokusunun vücut duvarından nasıl çıkarılacağını ayrıntılı olarak gösterir, bu da aksi halde gizlenen da nöronların ve epidermal hücrelerin immünostaining ve görselleştirilmesini geliştirir.

Protocol

Bu protokol Tenenbaum ve Gavis’ten bir alıntıdır, Duyusal Nöronların ve Epidermal Hücrelerin İmmünofluoresans Analizi için Drosophila Kas Dokusunun Larva Filetolarından Çıkarılması, J. Vis. Exp. (2016). NOT: Kas çıkarma prosedürü (Şekil 1) larva filetolarını hazırlamak için daha önce açıklanan yöntemlerin bir modifikasyonudur. Kas çıkarılmasından önceki ve sonraki adımlar kısaca öze…

Representative Results

Şekil 1: Kas Çıkarma Prosedürüne Genel Bakış. Bir larva parçalanır ve silikon bir elastomer diseksiyon kabına sabitlenir. Kas dokusunu çıkarmak için, kas ve epidermal hücre tabakası arasına, bir segment sınırına yakın dorsal orta çizgiden başlayarak bir epan uç uç yerleştirilir (2.2). Kas ve vücut duvarı arasındaki bağı kırmak için tokmaklar yukarı doğru çekilir (2.3). Bu, ilgi segmentle…

Materials

Dumont #5 tweezers	Electron Microscopy Sciences	72701-D
Micro Scissors, 8 cm, straight, 5 mm blades, 0.1 mm tips	World Precision Instruments	14003
Sylgard 184 silicone elastomer kit	Dow Corning	3097358-1004	for dissecting plates
Austerlitz insect pins, 0.1 mm	Fine Science Tools	26002-10
Fostec 8375 light source	Artisan Technology Group	62792-4