Denne videoen beskriver Drosophila-lymfekjertelen – det primære stedet for hematopoiesis i fluelarven – og viser et eksempelprotokoll for å dissekere og montere orgelet for immunhiistokjemi og fluorescerende avbildning.
Protocol
Denne protokollen er et utdrag fra Reimels og Pfleger, Metoder for å undersøke lymfekjertel og hemocytter i Drosophila Larver, J. Vis. Exp. (2016). 1. Larval lymfekjertelimohistokjemi MERK: Lymfekjertelen ligger omtrent en tredjedel lengde fra den fremre enden av en larve litt under hjernen på dorsalsiden. (Se pilen i figur 1B.) Lymfekjertelen flankerer dorsalkaret og er …
Representative Results
Figur 1: In Vivo Crystal Cell Melanization. A) Larver ble plassert individuelt i PCR-rør før oppvarming. Røde piler indikerer larver som ikke er på bunnen av rørene. B) Et typisk krystallcelle melaniseringsmønster etter oppvarming, som noen ganger avslører lymfekjertelen (pil; dorsal side vist, fremre er igjen). Skalalinjen representerer 1 mm. <a href="https://www.jove.com…
Materials
PBS tablets
MP Biomedicals
2810305
dissecting dish
Corning
7220-85
microcentrifuge tube
Denville
C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit
Krayden (distributed through Fisher)
NC9644388 (Fisher catalog number)
Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.