Drosophila ( Drosophila ) Dissection du cerveau adulte : une méthode en neurobiologie volante

Abstract

Source : Kelly, S.M., et autres Dissection et coloration immunofluorescente du corps de champignon et neurones de photorécepteur dans les cerveaux adultes de melanogaster de Drosophila. J. Vis. Exp. (2017).

Cette vidéo décrit comment disséquer et isoler le cerveau adulte de Drosophila- une procédure nécessaire pour visualiser l’organe, qui est autrement obscurci par la cuticule, l’oeil, et le tissu trachéal. Le protocole d’exemple montre une démonstration détaillée donnant des préparations de haute qualité qui peuvent être employées pour l’immunostaining et les méthodes d’imagerie dans la neurobiologie de Drosophila.

Protocol

Ce protocole est un extrait de Kelly et coll., Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Préparation de la station de dissection Placez le stéréomicroscope et la source lumineuse avec des oies à fibres optiques attachées sur un grand banc. Pour favoriser des mouvements réguliers de la main et réduire le « tremblement » de la main lors de la …

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
Sylgard dishes	Living Systems Instrumentation	DD-50-S-BLK	Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic	Sigma	S3139
Triton X 100	Sigma	X100-100ml
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)	VWR	89090-482
35mm dish	Genesee Scientific	32-103
Sylgard	Fisher	50-366-794
Kimwipe	Fisher	06-666
PTN Buffer			0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed