Cette vidéo décrit comment disséquer et isoler le cerveau adulte de Drosophila- une procédure nécessaire pour visualiser l’organe, qui est autrement obscurci par la cuticule, l’oeil, et le tissu trachéal. Le protocole d’exemple montre une démonstration détaillée donnant des préparations de haute qualité qui peuvent être employées pour l’immunostaining et les méthodes d’imagerie dans la neurobiologie de Drosophila.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Kelly et coll., Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Préparation de la station de dissection Placez le stéréomicroscope et la source lumineuse avec des oies à fibres optiques attachées sur un grand banc. Pour favoriser des mouvements réguliers de la main et réduire le « tremblement » de la main lors de la …
Materials
Microdissection forceps/tweezers
Ted Pella
505-NM
Sylgard dishes
Living Systems Instrumentation
DD-50-S-BLK
Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic
Sigma
S3139
Triton X 100
Sigma
X100-100ml
stereomicroscope
Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)
VWR
89090-482
35mm dish
Genesee Scientific
32-103
Sylgard
Fisher
50-366-794
Kimwipe
Fisher
06-666
PTN Buffer
0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed