Drosophila Dissecção cerebral adulta: um método em neurobiologia de moscas

Abstract

Fonte: Kelly, S.M., et al. Dissecção e Coloração Imunofluorescente de Corpo de Cogumelo e Neurônios Fotorreceptores em Cérebros melanogaster de Drosophila adultos. J. Vis. Exp. (2017).

Este vídeo descreve como dissecar e isolar o cérebro de Drosophila adulto – um procedimento necessário para visualizar o órgão, que é obscurecido de outra forma pela cutícula, olho e tecido traqueal. O protocolo de exemplo mostra uma demonstração detalhada produzindo preparações de alta qualidade que podem ser usadas para métodos de imunossuagem e imagem na neurobiologia de Drosophila.

Protocol

Este protocolo é um trecho de Kelly et al., Dissecção e Coloração Imunofluorescente de Corpo de Cogumelo e Neurônios Fotorreceptores em Cérebros melanogaster drosophila adulto, J. Vis. Exp. (2017). 1. Preparação da Estação de Dissecção Posicione o estereómicrocópio e a fonte de luz com gansos de fibra óptica ligados em um grande banco. Para promover movimentos constantes das mãos e reduzir o “aperto” da mão durante a dissecação, é esse…

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
Sylgard dishes	Living Systems Instrumentation	DD-50-S-BLK	Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic	Sigma	S3139
Triton X 100	Sigma	X100-100ml
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)	VWR	89090-482
35mm dish	Genesee Scientific	32-103
Sylgard	Fisher	50-366-794
Kimwipe	Fisher	06-666
PTN Buffer			0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed