Bu video, kütikül, göz ve trakeal doku tarafından gizlenen organı görselleştirmek için gerekli bir prosedür olan yetişkin Drosophila beyninin nasıl kesilip izole edildiğini açıklar. Örnek protokol, Drosophila nörobiyolojisinde immünostaining ve görüntüleme yöntemleri için kullanılabilecek yüksek kaliteli preparatlar sağlayan ayrıntılı bir gösteri göstermektedir.
Protocol
Bu protokol Kelly ve ark.,Mantar Vücudunun Diseksiyonu ve İmmünofluoresan Lekeleme ve Yetişkin Drosophila melanogaster Beyinlerde Fotoreceptör Nöronları, J. Vis. Exp’tenbir alıntıdır. (2017). 1. Diseksiyon İstasyonu Hazırlama Stereomikroskop ve ışık kaynağını ekli fiber optik kaz tüyü ile büyük bir tezgah üzerine yerleştirin. Sabit el hareketlerini teşvik etmek ve parçalarken el “titremesini” azaltmak için mikroskop etrafında ye…
Materials
Microdissection forceps/tweezers
Ted Pella
505-NM
Sylgard dishes
Living Systems Instrumentation
DD-50-S-BLK
Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic
Sigma
S3139
Triton X 100
Sigma
X100-100ml
stereomicroscope
Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)
VWR
89090-482
35mm dish
Genesee Scientific
32-103
Sylgard
Fisher
50-366-794
Kimwipe
Fisher
06-666
PTN Buffer
0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed