Drosophila Yetişkin Beyin Diseksiyonu: Sinek Nörobiyolojisinde Bir Yöntem

Abstract

Kaynak: Kelly, S.M., vd. Yetişkin Drosophila melanogaster Beyinlerinde Mantar Gövdesi ve Fotoreceptör Nöronlarının Diseksiyonu ve İmmünofluoresan Boyanması. J. Vis. Exp. (2017).

Bu video, kütikül, göz ve trakeal doku tarafından gizlenen organı görselleştirmek için gerekli bir prosedür olan yetişkin Drosophila beyninin nasıl kesilip izole edildiğini açıklar. Örnek protokol, Drosophila nörobiyolojisinde immünostaining ve görüntüleme yöntemleri için kullanılabilecek yüksek kaliteli preparatlar sağlayan ayrıntılı bir gösteri göstermektedir.

Protocol

Bu protokol Kelly ve ark.,Mantar Vücudunun Diseksiyonu ve İmmünofluoresan Lekeleme ve Yetişkin Drosophila melanogaster Beyinlerde Fotoreceptör Nöronları, J. Vis. Exp’tenbir alıntıdır. (2017). 1. Diseksiyon İstasyonu Hazırlama Stereomikroskop ve ışık kaynağını ekli fiber optik kaz tüyü ile büyük bir tezgah üzerine yerleştirin. Sabit el hareketlerini teşvik etmek ve parçalarken el “titremesini” azaltmak için mikroskop etrafında ye…

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
Sylgard dishes	Living Systems Instrumentation	DD-50-S-BLK	Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic	Sigma	S3139
Triton X 100	Sigma	X100-100ml
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)	VWR	89090-482
35mm dish	Genesee Scientific	32-103
Sylgard	Fisher	50-366-794
Kimwipe	Fisher	06-666
PTN Buffer			0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed