Drosofilia Dissezione cerebrale adulta: un metodo nella neurobiologia della mosca

Abstract

Fonte: Kelly, S.M., et al. J. Vis. Exp. (2017).

Questo video descrive come sezionare e isolare il cervello adulto di Drosophila- una procedura necessaria per visualizzare l’organo, che è altrimenti oscurato dalla cuticola, dall’occhio e dal tessuto tracheale. Il protocollo di esempio mostra una dimostrazione dettagliata che produce preparati di alta qualità che possono essere utilizzati per l’immunostaining e i metodi di imaging nella neurobiologia drosophila.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Kelly et al., Dissezione e colorazione immunofluorescente del corpo dei funghi e dei neuroni fotorecettori nei cervelli adulti drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017). 1. Preparazione della stazione di dissezione Posizionare lo stereomicroscopio e la sorgente luminosa con i colli d’oca in fibra ottica collegati su un grande banco. Per promuovere movimenti costanti delle mani e ridurre la “stretta” della mano durante…

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
Sylgard dishes	Living Systems Instrumentation	DD-50-S-BLK	Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic	Sigma	S3139
Triton X 100	Sigma	X100-100ml
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)	VWR	89090-482
35mm dish	Genesee Scientific	32-103
Sylgard	Fisher	50-366-794
Kimwipe	Fisher	06-666
PTN Buffer			0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed