Drosophila Adult Brain Dissection: Eine Methode in der Fliegen-Neurobiologie

Abstract

Quelle: Kelly, S.M., et al. Dissektion und Immunfluoreszenz Färbung von Pilzkörper und Photorezeptor Neuronen in Erwachsenen Drosophila melanogaster Gehirne. J. Vis. (2017).

Dieses Video beschreibt, wie man das erwachsene Drosophila Gehirn sezieren und isolieren – ein Verfahren, das für die Visualisierung des Organs notwendig ist, das ansonsten durch das Nagelhaut-, Augen- und Trachealgewebe verdeckt wird. Das Beispielprotokoll zeigt eine detaillierte Demonstration, die hochwertige Präparate liefert, die für Immunfärbungs- und Bildgebungsmethoden in der Drosophila Neurobiologie verwendet werden können.

Protocol

Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Kelly et al., Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Dissektionsstation Vorbereitung Positionieren Sie das Stereomikroskop und die Lichtquelle mit angeschlossenem Fiberoptik-Schwanenhals auf einer großen Tischplatte. Um stetige Handbewegungen zu fördern und das “Schütteln” der Hand beim Sezieren zu reduzieren…

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
Sylgard dishes	Living Systems Instrumentation	DD-50-S-BLK	Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic	Sigma	S3139
Triton X 100	Sigma	X100-100ml
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)	VWR	89090-482
35mm dish	Genesee Scientific	32-103
Sylgard	Fisher	50-366-794
Kimwipe	Fisher	06-666
PTN Buffer			0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed