Drosophila Disección cerebral adulta: un método en neurobiología mosca

Abstract

Fuente: Kelly, S.M., et al. Disección y Tinción inmunofluorescente de cuerpo de hongos y neuronas fotorreceptores en cerebros adultos de Drosophila melanogaster. J. Vis. (2017).

Este video describe cómo diseccionar y aislar el cerebro adulto de Drosophila, un procedimiento necesario para visualizar el órgano, que de otra manera está oscurecido por la cutícula, el ojo y el tejido traqueal. El protocolo de ejemplo muestra una demostración detallada que produce preparaciones de alta calidad que se pueden utilizar para métodos de inmunodetención e imágenes en neurobiología de Drosophila.

Protocol

Este protocolo es un extracto de Kelly et al., Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Preparación de la estación de disección Coloque el estereomicroscopio y la fuente de luz con cuellos de ganso de fibra óptica unidos en una gran sobremesa. Para promover movimientos constantes de las manos y reducir el “agitación” de las manos mientras se di…

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
Sylgard dishes	Living Systems Instrumentation	DD-50-S-BLK	Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic	Sigma	S3139
Triton X 100	Sigma	X100-100ml
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)	VWR	89090-482
35mm dish	Genesee Scientific	32-103
Sylgard	Fisher	50-366-794
Kimwipe	Fisher	06-666
PTN Buffer			0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed