Drosophila Voksen hjerne disseksjon: En metode i fly nevrobiologi

Abstract

Kilde: Kelly, S.M., et al. Disseksjon og immunfluorescent Farging av sopplegeme og fotoreseptor Neurons i voksen Drosophila melanogaster Hjerner. J. Vis. Utt. (2017).

Denne videoen beskriver hvordan du dissekerer og isolerer den voksne Drosophila-hjernen – en prosedyre som er nødvendig for å visualisere orgelet, som ellers er skjult av kutiklet, øyet og trakealvevet. Eksempelprotokollen viser en detaljert demonstrasjon som gir preparater av høy kvalitet som kan brukes til immundempende og avbildningsmetoder i Drosophila nevrobiologi.

Protocol

Denne protokollen er et utdrag fra Kelly et al., Dissection og Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains, J. Vis. Exp. (2017). 1. Klargjøring av disseksjonsstasjon Plasser stereomikroskopet og lyskilden med vedlagte fiberoptiske goosenecks på en stor benkeplate. For å fremme stødige håndbevegelser og redusere hånd “riste” mens dissekering, er det viktig at tilstrekkelig hånd- og arm…

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
Sylgard dishes	Living Systems Instrumentation	DD-50-S-BLK	Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic	Sigma	S3139
Triton X 100	Sigma	X100-100ml
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)	VWR	89090-482
35mm dish	Genesee Scientific	32-103
Sylgard	Fisher	50-366-794
Kimwipe	Fisher	06-666
PTN Buffer			0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed