Drosophila (olika betydelser) Vuxen hjärn dissekering: En metod i flyga neurobiologi

Abstract

Källa: Kelly, S.M., et al. Dissekering och immunofluorescerande färgning av svamp kropp och fotoreceptor nervceller i vuxna Drosophila melanogaster hjärnor. J. Vis. Exp. (2017).

Denna video beskriver hur man dissekerar och isolerar den vuxna Drosophila hjärnan -ett förfarande som är nödvändigt för att visualisera organet, som annars skyms av nagelband, öga och trakeal vävnad. Exempelprotokollet visar en detaljerad demonstration som ger högkvalitativa preparat som kan användas för immunostaining och avbildningsmetoder i Drosophila neurobiologi.

Protocol

Detta protokoll är ett utdrag från Kelly et al., Dissekering och immunofluorescerande färgning av svamp kropp och fotoreceptor nervceller i vuxna Drosophila melanogaster hjärnor, J. Vis. Exp. (2017). 1. Förberedelse av dissekeringsstation Placera stereomikroskopet och ljuskällan med fastsatta fiberoptiska gåshud på en stor bänkskiva. För att främja stadiga handrörelser och minska hand “skaka” under dissekering är det viktigt att det finns till…

Materials

Microdissection forceps/tweezers	Ted Pella	505-NM
Sylgard dishes	Living Systems Instrumentation	DD-50-S-BLK	Available from amazon.com
Na Phosphate Buffer monobasic	Sigma	S3139
Triton X 100	Sigma	X100-100ml
stereomicroscope	Leica S6D with KL300 LED light source
9-well dish (spot plate)	VWR	89090-482
35mm dish	Genesee Scientific	32-103
Sylgard	Fisher	50-366-794
Kimwipe	Fisher	06-666
PTN Buffer			0.1M NaPhosphate, pH 7.2, 0.1% Triton-X-100, Typically make up 0.5 L of 0.1M NaPhosphate buffer and aliquote 50ml at a time as needed