Chorion وفيتيلين إزالة الغشاء الميكانيكية: طريقة لإعداد الخلايا ال Oocytes Drosophila للمراقبة المباشرة
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: بيركنز، أ. ت. ، بيكل، س. إ. باستخدام الفلورسينس في التهجين في الموقع (FISH) لرصد حالة تماسك الذراع في بروميتافاس وميتافاس الأول دروسوفيلا Oocytes. ج. فيس إكسب. (2017).
يصف هذا الفيديو طريقة لإزالة أغشية الكوريون والفيتيلين ميكانيكيا من البويضات الدروسولية الناضجة الثابتة سابقا. يظهر البروتوكول المميز عرضا مفصلا للإجراء الذي ينتج عنه بويضات متوافقة مع المقايسات الفلورية في الموقع للتهجين.
Protocol
هذا البروتوكول هو مقتطف من بيركنز وبيكل، وذلك باستخدام الفلورسينس في التهجين في الموقع (FISH) لرصد حالة تماسك الذراع في بروميتافاس وميتافاس الأول Drosophila Oocytes، J. Vis. Exp. (2017). 1. إزالة Chorions والأغشية Vitelline ملاحظة: انظر الشكل 1</s…
Representative Results
الشكل 1: أدوات علم الخلايا. الأدوات المستخدمة في البروتوكول: (1) زوج من ملقط (#5 دومون); (2) إبرة التنغستن؛ (3) طبق بئر عميق مع غطاء؛ (4) طبق تشريح الزجاج الضحلة؛ (5) سحبت باستور ماصة. يرجى النقر هن…
Materials
| Bovine serum albumin (BSA) | Fisher Scientific | BP1600-100 | Prepare 10% stock Freeze aliquots |
| 10% Triton X-100 | Thermo Scientific | 28314 | Surfact-Amps |
| PBSBTx | 1X PBS, 0.5% BSA, 0.1% Trition X-100 | ||
| Forceps | Dumont | #5 INOX, Biologie | |
| 9" Disposable glass Pasteur pipettes | Fisher | 13-678-20C | Autoclave to sterilize |
| Shallow glass dissecting dish | Custom made | ||
| Deep well dish (3 wells) | Pyrex | 7223-34 | |
| Tungsten needle | homemade | ||
| Frosted glass slides, 25 x 75 mm | VWR Scientific | 48312-002 | |
| 15 mL conical tubes | Various | ||
| 500 µl microfuge tubes | Various | ||
| Kimwipes | Various | disposable wipes |
Cite This Article
Chorion and Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20124, doi: (2023).