Chorion et Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation Chorion and Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation Chorion and Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation Chorion
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Perkins, A. T., Bickel, S. E. Using Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) to Monitor the State of Arm Cohesion in Prometaphase and Metaphase I Drosophila Oocytes. J. Vis. Exp. (2017).
Cette vidéo décrit une méthode pour enlever mécaniquement les membranes chorion et vitelline des ovocytes Drosophila matures précédemment fixés. Le protocole en vedette montre une démonstration détaillée de la procédure de rendement des ovocytes compatibles avec les analyses d’hybridation in situ fluorescente.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Perkins et Bickel, Using Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) to Monitor the State of Arm Cohesion in Prometaphase and Metaphase I Drosophila Oocytes, J. Vis. Exp. (2017). 1. Enlèvement des membranes Chorions et Vitelline REMARQUE: Voir la figure 1 pour les outils nécessaires. Ovocytes séparés à un stade avancé …
Representative Results
Figure 1 : Outils de cytologie. Outils utilisés dans le protocole : (1) paire de forceps (#5 Dumont); (2) aiguille de tungstène; (3) bien profond plat avec couvercle; (4) plat de dissecting en verre peu profond ; (5) tiré pipette Pasteur. S’il vous plaît cliquez ici pour voir une version plus grande de ce chiffre. <p cla…
Materials
| Bovine serum albumin (BSA) | Fisher Scientific | BP1600-100 | Prepare 10% stock Freeze aliquots |
| 10% Triton X-100 | Thermo Scientific | 28314 | Surfact-Amps |
| PBSBTx | 1X PBS, 0.5% BSA, 0.1% Trition X-100 | ||
| Forceps | Dumont | #5 INOX, Biologie | |
| 9" Disposable glass Pasteur pipettes | Fisher | 13-678-20C | Autoclave to sterilize |
| Shallow glass dissecting dish | Custom made | ||
| Deep well dish (3 wells) | Pyrex | 7223-34 | |
| Tungsten needle | homemade | ||
| Frosted glass slides, 25 x 75 mm | VWR Scientific | 48312-002 | |
| 15 mL conical tubes | Various | ||
| 500 µl microfuge tubes | Various | ||
| Kimwipes | Various | disposable wipes |
Cite This Article
Chorion and Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20124, doi: (2023).