초리온 및 비텔린 멤브레인 기계적 제거: 직접 관찰을 위해 드로소필라 오퀴트를 준비하는 방법

Abstract

출처: 퍼킨스, A. T., Bickel, S. E. 시투 혼성화 (FISH)에서 형광을 사용하여 프로 메타 페이처와 메타 페이즈 I Drosophila Oocytes에서 팔 응집력상태를 모니터링합니다. J. 비스 익스펙. (2017).

이 비디오는 이전에 고정된 성숙한 Drosophila oocytes에서 초리온 및 비텔린 멤브레인을 기계적으로 제거하는 방법을 설명합니다. 특징프로토콜은 시투 혼성화 분석서에서 형광과 호환되는 난모세포를 산출하는 절차의 상세한 데모를 보여줍니다.

Protocol

이 프로토콜은 퍼킨스와 빅켈에서 발췌, 시투 혼성화에서 형광을 사용하여 (FISH) 프로 메타 단계와 메타 위상 I Drosophila Oocytes, J. Vis. Exp에서팔 응집력의 상태를 모니터링. (2017). 1. 치리온 및 비텔린 멤브레인 제거 참고: 필요한 도구의 경우 그림 1을 참조하십시오. 별도의 후기 …

Representative Results

그림 1: 세포학 도구. 프로토콜에 사용되는 도구: (1) 집게(#5 듀몬트); (2) 텅스텐 바늘; (3) 커버와 깊은 우물 요리; (4) 얕은 유리 해부 접시; (5) 파스퇴르 파이펫을 당겼다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오. <img alt=…

Materials

Bovine serum albumin (BSA)	Fisher Scientific	BP1600-100	Prepare 10% stock Freeze aliquots
10% Triton X-100	Thermo Scientific	28314	Surfact-Amps
PBSBTx			1X PBS, 0.5% BSA, 0.1% Trition X-100
Forceps	Dumont		#5 INOX, Biologie
9" Disposable glass Pasteur pipettes	Fisher	13-678-20C	Autoclave to sterilize
Shallow glass dissecting dish			Custom made
Deep well dish (3 wells)	Pyrex	7223-34
Tungsten needle			homemade
Frosted glass slides, 25 x 75 mm	VWR Scientific	48312-002
15 mL conical tubes	Various
500 µl microfuge tubes	Various
Kimwipes	Various		disposable wipes