Хорион и Vitelline Membrane Механическое удаление: Метод подготовки drosophila Oocytes для прямого наблюдения

Abstract

Источник: Перкинс, A. T., Bickel, S. E. Использование флуоресценции на месте гибридизации (FISH) для мониторинга состояния сплочения рук в Прометафазе и Метафазы I Drosophila Oocytes. J. Vis. Exp. (2017).

Это видео описывает метод механического удаления хорионные и вителлиновые мембраны из ранее зафиксированных зрелых ооцитов дрозофилы. Рекомендуемый протокол показывает подробную демонстрацию процедуры, вызвечивающих яйцеклетки, совместимые с флуоресцентными анализами гибридизации на месте.

Protocol

Этот протокол является выдержка из Перкинс и Bickel, используя флуоресценции на месте гибридизации (FISH) для мониторинга состояния сплочения рук в Прометафазе и метафазы я Drosophila Oocytes, J. Vis. Exp. (2017). 1. Удаление хорионов и вителлиновых мембран <strong class=…

Representative Results

Рисунок 1: Цитологические инструменты. Инструменты, используемые в протоколе: (1) пара force (#5 Дюмон); (2) вольфрамовая игла; (3) глубокое блюдо с крышкой; (4) мелкое стекло, рассекающая блюдо; (5) вытащил Пастер пипетки. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_up…

Materials

Bovine serum albumin (BSA)	Fisher Scientific	BP1600-100	Prepare 10% stock Freeze aliquots
10% Triton X-100	Thermo Scientific	28314	Surfact-Amps
PBSBTx			1X PBS, 0.5% BSA, 0.1% Trition X-100
Forceps	Dumont		#5 INOX, Biologie
9" Disposable glass Pasteur pipettes	Fisher	13-678-20C	Autoclave to sterilize
Shallow glass dissecting dish			Custom made
Deep well dish (3 wells)	Pyrex	7223-34
Tungsten needle			homemade
Frosted glass slides, 25 x 75 mm	VWR Scientific	48312-002
15 mL conical tubes	Various
500 µl microfuge tubes	Various
Kimwipes	Various		disposable wipes