Korozyon ve Vitelline Membran Mekanik Kaldırma: Drosophila Oositleri Doğrudan Gözleme Hazırlama Yöntemi
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Perkins, A. T., Bickel, S. E. Prometaphase ve Metafaz I Drosophila Oosytes’te Kol Uyumu Durumunu İzlemek için Floresan In Situ Hibridizasyonunu (FISH) Kullanmak. J. Vis. Exp. (2017).
Bu video, daha önce sabitlenmiş olgun Drosophila oositlerinden korozyon ve vitellin zarlarını mekanik olarak çıkarmak için bir yöntem açıklanmaktadır. Öne çıkan protokol, floresan in situ hibridizasyon testleriyle uyumlu oositler sağlayan prosedürün ayrıntılı bir gösterimini göstermektedir.
Protocol
Bu protokol Perkins ve Bickel’den bir alıntıdır, Prometaphase ve Metafaz I Drosophila Oocytes, J. Vis. Exp’tekiKol UyumUnun Durumunu İzlemek için Floresan Yerinde Hibridizasyon (FISH) Kullanarak . (2017). 1. Chorions ve Vitelline Membranlarının Çıkarılması NOT: Gerekli araçlar için Şekil 1’e bakın. Geç evre oositleri ayır Sı?…
Representative Results
Şekil 1: Sitoloji araçları. Protokolde kullanılan araçlar: (1) bir çift yabanalaps (#5 Dumont); (2) tungsten iğnesi; (3) kapaklı derin kuyu yemeği; (4) sığ cam diseksiyon kabı; (5) pastör pipeti çekti. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın. <p class="jove_conten…
Materials
| Bovine serum albumin (BSA) | Fisher Scientific | BP1600-100 | Prepare 10% stock Freeze aliquots |
| 10% Triton X-100 | Thermo Scientific | 28314 | Surfact-Amps |
| PBSBTx | 1X PBS, 0.5% BSA, 0.1% Trition X-100 | ||
| Forceps | Dumont | #5 INOX, Biologie | |
| 9" Disposable glass Pasteur pipettes | Fisher | 13-678-20C | Autoclave to sterilize |
| Shallow glass dissecting dish | Custom made | ||
| Deep well dish (3 wells) | Pyrex | 7223-34 | |
| Tungsten needle | homemade | ||
| Frosted glass slides, 25 x 75 mm | VWR Scientific | 48312-002 | |
| 15 mL conical tubes | Various | ||
| 500 µl microfuge tubes | Various | ||
| Kimwipes | Various | disposable wipes |
Cite This Article
Chorion and Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20124, doi: (2023).