כיריים ו Vitelline קרום הסרה מכנית: שיטה להכין Drosophila ביציות לתצפית ישירה

Published: April 30, 2023

Abstract

מקור: פרקינס, א.ט., ביקל, S. E. באמצעות פלואורסצנטיות במקום הכלאה (FISH) כדי לפקח על מצב לכידות הזרוע בפרומטאפאז ומטאפאזה I Drosophila Oocytes. ג’יי ויס אקספ. (2017).

וידאו זה מתאר שיטה להסיר מכנית את ממברנות chorion ו vitelline מן ביציות בוגרת קבוע בעבר Drosophila. הפרוטוקול המוצג מציג הדגמה מפורטת של ההליך המניב ביציות התואמות לפלורסנט בשב”כ.

Protocol

פרוטוקול זה הוא קטע מתוך פרקינס וביקל, באמצעות פלואורסצנטיות בהכלאה סיטו (FISH) כדי לפקח על מצב לכידות הזרוע בפרומטאפאז ומטאפאזה I Drosophila Oocytes, J. Vis. Exp. (2017). 1. הסרת כוריונים וקרומי ויטלין שים לב: ראו איור 1 לקבלת כלים הד…

Representative Results

איור 1: כלי ציטולוגיה. כלים המשמשים בפרוטוקול: (1) זוג מלקחיים (#5 דומונט); (2) מחט טונגסטן; (3) צלחת באר עמוקה עם כיסוי; (4) צלחת ניתוח זכוכית רדודה; (5) משך פיפט פסטר. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה …

Materials

Bovine serum albumin (BSA) Fisher Scientific BP1600-100 Prepare 10% stock
Freeze aliquots
10% Triton X-100 Thermo Scientific 28314 Surfact-Amps
PBSBTx 1X PBS, 0.5% BSA, 0.1% Trition X-100
Forceps Dumont #5 INOX, Biologie
9" Disposable glass Pasteur pipettes Fisher 13-678-20C Autoclave to sterilize
Shallow glass dissecting dish Custom made
Deep well dish (3 wells) Pyrex 7223-34
Tungsten needle homemade
Frosted glass slides, 25 x 75 mm VWR Scientific 48312-002
15 mL conical tubes Various
500 µl microfuge tubes Various
Kimwipes Various disposable wipes

Play Video

Cite This Article
Chorion and Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20124, doi: (2023).

View Video