כיריים ו Vitelline קרום הסרה מכנית: שיטה להכין Drosophila ביציות לתצפית ישירה
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: פרקינס, א.ט., ביקל, S. E. באמצעות פלואורסצנטיות במקום הכלאה (FISH) כדי לפקח על מצב לכידות הזרוע בפרומטאפאז ומטאפאזה I Drosophila Oocytes. ג’יי ויס אקספ. (2017).
וידאו זה מתאר שיטה להסיר מכנית את ממברנות chorion ו vitelline מן ביציות בוגרת קבוע בעבר Drosophila. הפרוטוקול המוצג מציג הדגמה מפורטת של ההליך המניב ביציות התואמות לפלורסנט בשב”כ.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך פרקינס וביקל, באמצעות פלואורסצנטיות בהכלאה סיטו (FISH) כדי לפקח על מצב לכידות הזרוע בפרומטאפאז ומטאפאזה I Drosophila Oocytes, J. Vis. Exp. (2017). 1. הסרת כוריונים וקרומי ויטלין שים לב: ראו איור 1 לקבלת כלים הד…
Representative Results
איור 1: כלי ציטולוגיה. כלים המשמשים בפרוטוקול: (1) זוג מלקחיים (#5 דומונט); (2) מחט טונגסטן; (3) צלחת באר עמוקה עם כיסוי; (4) צלחת ניתוח זכוכית רדודה; (5) משך פיפט פסטר. לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה …
Materials
| Bovine serum albumin (BSA) | Fisher Scientific | BP1600-100 | Prepare 10% stock Freeze aliquots |
| 10% Triton X-100 | Thermo Scientific | 28314 | Surfact-Amps |
| PBSBTx | 1X PBS, 0.5% BSA, 0.1% Trition X-100 | ||
| Forceps | Dumont | #5 INOX, Biologie | |
| 9" Disposable glass Pasteur pipettes | Fisher | 13-678-20C | Autoclave to sterilize |
| Shallow glass dissecting dish | Custom made | ||
| Deep well dish (3 wells) | Pyrex | 7223-34 | |
| Tungsten needle | homemade | ||
| Frosted glass slides, 25 x 75 mm | VWR Scientific | 48312-002 | |
| 15 mL conical tubes | Various | ||
| 500 µl microfuge tubes | Various | ||
| Kimwipes | Various | disposable wipes |
Cite This Article
Chorion and Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20124, doi: (2023).