Chorion और Vitelline झिल्ली यांत्रिक हटाने: प्रत्यक्ष अवलोकन के लिए ड्रोसोफिला Oocytes तैयार करने के लिए एक विधि
Published: April 30, 2023
Abstract
स्रोत: पर्किंस, ए टी, बिकेल, एस ई. प्रोमेटाफेज और मेटाफेज आई ड्रोसोफिला ओसाइट्स में आर्म सामंजस्य की स्थिति की निगरानी करने के लिए सीटू हाइब्रिडाइजेशन (फिश) में फ्लोरेसेंस का उपयोग कर रहे हैं। जे विस एक्सप्रेस। (2017).
यह वीडियो पहले से तय परिपक्व ड्रोसोफिला ओसाइट्स से कोरियोन और विटेलिन झिल्ली को यांत्रिक रूप से हटाने की एक विधि का वर्णन करता है। विशेष रुप से प्रदर्शित प्रोटोकॉल सीटू संकरण परख में फ्लोरोसेंट के साथ संगत ओसाइट्स उपज प्रक्रिया का एक विस्तृत प्रदर्शन दिखाता है।
Protocol
यह प्रोटोकॉल पर्किंस और बिकेल का एक अंश है, जो प्रोमेटाफेज और मेटाफेज आई ड्रोसोफिला ओसाइट्स, जे विस एक्सपीमें आर्म सामंजस्य की स्थिति की निगरानी करने के लिए सीटू हाइब्रिडाइजेशन (फिश) में फ्ल?…
Representative Results
चित्रा 1: साइटोलॉजी उपकरण। प्रोटोकॉल में उपयोग किए जाने वाले उपकरण: (1) संदंश की जोड़ी (#5 ड्यूमोंट); (2) टंगस्टन सुई; (3) कवर के साथ गहरी अच्छी तरह से पकवान; (4) उथले कांच विच्?…
Materials
| Bovine serum albumin (BSA) | Fisher Scientific | BP1600-100 | Prepare 10% stock Freeze aliquots |
| 10% Triton X-100 | Thermo Scientific | 28314 | Surfact-Amps |
| PBSBTx | 1X PBS, 0.5% BSA, 0.1% Trition X-100 | ||
| Forceps | Dumont | #5 INOX, Biologie | |
| 9" Disposable glass Pasteur pipettes | Fisher | 13-678-20C | Autoclave to sterilize |
| Shallow glass dissecting dish | Custom made | ||
| Deep well dish (3 wells) | Pyrex | 7223-34 | |
| Tungsten needle | homemade | ||
| Frosted glass slides, 25 x 75 mm | VWR Scientific | 48312-002 | |
| 15 mL conical tubes | Various | ||
| 500 µl microfuge tubes | Various | ||
| Kimwipes | Various | disposable wipes |
Cite This Article
Chorion and Vitelline Membrane Mechanical Removal: A Method to Prepare Drosophila Oocytes for Direct Observation. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20124, doi: (2023).