एकल कृमि पीसीआर: जीनोमिक डीएनए को निकालने और बढ़ाने के लिए एक विधि

Abstract

स्रोत: पहले, एच, एट अल। CRISPR/Cas9 रिबोन्यूक्लियोप्रोटीन का उपयोग कर सी एलिगेंस में जीनोमिक प्वाइंट म्यूटेंट पैदा करने के लिए एक रैपिड और फेसियल पाइपलाइन । जे विस एक्सप्रेस। (2018). 

इस वीडियो को तेजी से पीसीआर स्क्रीनिंग द्वारा एक आनुवंशिक मार्कर के लिए एक ही सूत्रकृमि स्क्रीन करने के लिए एक तकनीक का वर्णन करता है । उदाहरण प्रोटोकॉल में, हम CRISPR-आधारित जीनोम संपादन के लिए स्क्रीन करते हैं।

Protocol

निम्नलिखित प्रोटोकॉल पूर्व एट अल, सी एलिगेंस में जीनोमिक पॉइंट म्यूटेंट उत्पन्न करने के लिए एक त्वरित और फेसियल पाइपलाइन का एक अंश है जो CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins, जे विस Exp</em…

Representative Results

चित्रा 1. सीएलिगेंसोड-1 लोकस की CRISPR-Cas9 इंजीनियरिंग। (क)योजनाबद्ध दृष्टांत सी एलिगेंसमें सोड-1 लोकस की एक्सॉन-इंट्रोन संरचना को दर?…

Materials

Nuclease-free water	Synthego Inc.	provided with the sgRNA kit EZ kit
KCl	Sigma	P5405
DNA Clean & Concentrator	Zymo Research	D4004
Zymoclean Gel DNA Recovery Kit	Zymo Research	D4002
Q5 Hot Start High-Fidelity 2X Master Mix	New England Biolabs	M0494L
Proteinase K	Sigma	P2308
MgCl2	Sigma	M2393
NP-40	Sigma	74385
Tween-20	Fisher Scientific	BP337-100
RNaseZap Decontamination Solution	Fisher Scientific	AM9780