Este video describe una técnica para examinar rápidamente un solo nematodo para un marcador genético mediante la detección de PCR. En el protocolo de ejemplo, examinamos la edición del genoma basada en CRISPR.
Protocol
El siguiente protocolo es un extracto de Prior et al, A Rapid and Facile Pipeline for Generating Genomic Point Mutants in C. elegans Using CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteins, J. Vis. Exp. (2018). PCR de un solo gusano y Genotipado Después de 1 – 2 días de puesta de huevos, transfiera el F1s a tapas individuales de tubo de tira PCR que contenga…
Representative Results
Figura 1. Ingeniería CRISPR-Cas9 del locus C. eleganssod-1. (A) Ilustración esquemática que representa la estructura exon-intron del locus sod-1 en C. elegans. La barra roja denota la ubicación del G93 en exon 3. El conjunto de pares de imprimación se anota en las flechas rojas (F1-R1). (B) Alineación de s…